基于蛋白质组学探讨丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制

目的：通过长期高脂饲料喂养复制高脂血症动物模型,采用蛋白质组学、分子生物学等方法阐释丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制。方法：Wistar大鼠,按血脂水平随机分正常组、模型组、丹参饮组,每组10只。正常组动物喂食基础饲料,模型组和丹参饮组动物喂食高脂饲料造模,3组动物均自由饮水、自由进食。于第9周开始治疗干预,丹参饮组实验动物给予丹参饮灌胃给药,剂量为3.6 g·kg-1生药;模型组和正常组实验动物根据体质量给予等体积生理盐水。第12周后取材并进行相关指标检测,利用生化分析仪来检测血清中血脂4项水平,利用血液流变仪来检测全血黏度和血浆黏度,利用液质联用色谱仪来检测血小板蛋白质组,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血小板膜糖蛋白4(CD36)、黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(PIP5K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达。结果：与模型组比较,丹参饮组高脂血症模型大鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平能够明显降低(P<0.05),高密...     

温中益气胶囊对幽门结扎型胃溃疡大鼠的治疗作用

目的： 研究温中益气胶囊对幽门结扎型胃溃疡大鼠的治疗作用以及对小鼠的抗炎、镇痛作用。 方法： 采用幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型。取清洁级健康SD大鼠60只,雌雄各半,随机分成空白组,模型组,阳性对照药三九胃泰颗粒组（3.69 g·kg^-1）,温中益气胶囊高、中、低剂量组（2.21,1.11,0.55 g·kg^-1）。每天ig给药1次,连续给药7 d,模型组和空白组给予等量蒸馏水。第5天给药后各组动物禁食不禁水48 h,末次给药后2 h麻醉,进行幽门结扎手术,缝合后直肠给药1次,禁食水。18 h后麻醉大鼠,颈总动脉取血。取全胃观察大鼠胃溃疡面积和溃疡指数,胃组织匀浆测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、H⁺-K⁺-ATP酶、生长抑素（SS）含量。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和热板刺激法进行抗炎和镇痛实验,测定小鼠耳肿胀度、抑制率及痛阈值的大小。分别取清洁级小鼠50只,随机分成空白组、阳性对照药三九胃泰颗粒组（5.19 g·kg^-1）、温中益气胶囊高、中、低剂量组（3.12,1.56,0.78 g·kg^-1）。 结果： 胃溃疡实验中,与空白组比较,模型组H⁺-K⁺-ATP酶活性和MDA含量显著增加（P<0.01）,SS和SOD活性显著降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,温中益气胶囊能显著减小大鼠胃溃疡面积和溃疡指数,降低H⁺-K⁺-ATP酶的活性和MDA含量并增加胃组织中SS和SOD水平（P<0.01,P<0.05）。抗炎、镇痛实验中,与空白组比较,温中益气胶囊能降低二甲苯致小鼠耳廓肿胀度,提高小鼠痛阈值（P<0.01或P<0.05）。 结论： 温中益气胶囊可能通过降低H⁺-K⁺-ATP酶活性和MDA含量、增强SOD活性、增加SS的含量来实现抗幽门结扎型胃溃疡作用,并具有明显的抗炎、镇痛作用。     

麻姜宣肺胶囊药效学研究

目的： 观察麻姜宣肺胶囊的镇咳、祛痰、抗炎、解热和平喘作用。 方法： 将小鼠随机分为空白组、阳性药组和麻姜宣肺胶囊的高、中、低剂量组（2.49,1.24,0.62 g·kg^-1）,ig 7 d,分别采用氨水法、酚红法和小鼠耳肿胀法对麻姜宣肺胶囊的镇咳、祛痰、抗炎作用进行研究。将大鼠随机分为空白组、阳性药组、模型组和麻姜宣肺胶囊高、中、低剂量组（1.8,0.9,0.45 g·kg^-1）,采用内毒素致热实验观察其解热作用。将豚鼠随机分为空白组、阳性药组和麻姜宣肺胶囊的高、中、低剂量组（1.55,0.77,0.39 g·kg^-1）,采用整体动物引喘实验观察其平喘作用。 结果： 麻姜宣肺胶囊高、中剂量可减少小鼠咳嗽次数,延长咳嗽潜伏期（P<0.05,P<0.01）;高剂量能增加小鼠呼吸道酚红排泌量（P<0.01）;高、中、低剂量可抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀度（P<0.05）;高剂量可抑制脂多糖所致的大鼠体温升高（P<0.05,P<0.01）;高剂量可延长豚鼠乙酰胆碱和磷酸组胺所致的引喘潜伏期（P<0.05,P<0.01）。 结论： 麻姜宣肺胶囊具有镇咳、祛痰、抗炎、解热和平喘的作用。     

丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学

目的:观察丹参饮对气虚血瘀模型大鼠血小板生物学的影响,从血小板动态变化上探讨丹参饮作用机制。方法:选取SD大鼠40只为研究对象,一次性向气管内注射博莱霉素生理盐水溶液复制气虚血瘀模型,将40只SD大鼠随机分为空白对照组、气虚血瘀模型组、丹参饮高剂量组(3. 6 g/kg)、低剂量组(0. 9 g/kg),每组10只。造模后第2天开始灌胃给药,连续21 d,末次给药1 h后5%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,检测全血黏度、血浆黏度、血小板参数、血小板活化黏附、聚集、释放以及纤溶相关指标。结果:丹参饮可显著降低模型大鼠中低切变率下的全血黏度和血浆黏度,差异有统计学意义(P 0. 05),可显著降低PDW和MPV血小板相关参数,差异有统计学意义(P 0. 05);可显著升高环磷酸腺苷(cAMP)水平,差异有统计学意义(P 0. 05),降低环磷酸鸟苷(cGMP)、β-血小板球蛋白(β-TG)血小板第4因子(PF_4)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平,差异有统计学意义(P 0. 05),延长凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT),差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:丹参饮可能主要通过改善血小板聚集、抑制凝血及血小板释放亢进的状态方面达到降低全血黏度,改善气虚血瘀状态。     

健脾口服液对脾虚证小鼠胃肠运动功能及胃肠激素分泌的影响

目的:研究健脾口服液对脾虚小鼠胃肠运动功能及胃肠激素分泌的影响,探讨健脾口服液调节胃肠运动功能的机制.方法:60只昆明种小鼠,随机分为6组即健脾口服液高、中、低剂量组、阳性药对照组、模型对照组、正常对照组,每组10只;健脾口服液高、中、低剂量组给药量分别为22.88,11.44,5.72 g·kg-1;启脾口服液为8 mL· kg-1;正常组及模型组给以等体积生理盐水,每天ig给药1次,造模14 d后开始用药,持续给药7d.观察健脾口服液对脾虚小鼠胃肠运动功能及胃泌素、血管活性肽含量的影响.结果:健脾口服液各剂量组均可不同程度的提高脾虚模型小鼠胃甲基橙残留率,降低脾虚模型小鼠小肠内容物推进率,差异有显著性意义;健脾口服液各剂量组均可不同程度的提高脾虚模型小鼠血浆中胃泌素(GAS)、降低血管活性肽(VIP)含量,差异有显著性意义.结论:健脾口服液可以改善脾虚泄泻小鼠胃排空功能和小肠推进功能,提高胃泌素和降低血管活性肽含量可能是治疗脾虚证的作用机制之一.     

延胡索乙素对老年大鼠红细胞膜影响的实验研究

目的:从红细胞膜成分变化角度研究延胡索乙素改善老龄大鼠血液流变学的机制。方法:将老龄Wistar大鼠随机分为老龄空白组、老龄延胡索乙素高、低剂量组、阿司匹林组,并以青年Wistar大鼠作为对照组,灌胃14天后取血、制膜,测红细胞膜上胆固醇、唾液酸、巯基、MDA含量以及SOD活性、Na+-K+-ATP酶活性。结果:延胡索乙素高剂量可明显增强老龄大鼠红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性(P0.05);降低红细胞膜胆固醇(P0.01);升高膜上巯基含量(P0.01);明显提高红细胞膜SOD活性(P0.05);降低膜上MDA水平(P0.05)。结论:延胡索乙素改善老龄血瘀模型大鼠血液流变学的机制可能与提高Na+-K+-ATP活性、降低膜胆固醇含量、升高红细胞膜表面巯基含量、提高膜SOD活性、降低MDA含量有关。     

补阳还五汤对高脂血症模型大鼠血液流变学和血小板相关生物学指标的影响

目的:探讨补阳还五汤对于高脂血症模型大鼠血液流变学和血小板相关生物学指标的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(10只)和造模组(40只)。空白对照组大鼠给予普通饲料,造模组大鼠给予高脂饲料,分组喂养至少6周以复制高脂血症模型。将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(辛伐他汀,0.004 g/kg)和补阳还五汤低、高剂量组(3.5、14.0g/kg,以生药量计),每组10只。空白对照组和模型对照组大鼠灌胃生理盐水,各药物组大鼠灌胃相应药液,0.01 mL/g,每日1次,连续4周。末次给药30 min后,检测大鼠的血液流变学指标(全血黏度、血浆黏度)、血小板黏附作用相关指标[黏附率、血管性血友病因子(vWF)、纤维连接蛋白(FN)]、血小板释放作用相关指标[β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板第4因子(PF4)]、血小板纤溶系统相关指标[组织型纤溶酶原活化剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)]、血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)、大型血小板比率(PLCR)]和凝血4项指标[活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)]。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠全血黏度(低、中、高切变率)、血浆黏度、血小板黏附率以及vWF、FN、β-TG、PAI-1、PLT、MPV、PCT、PLCR、FIB含量或水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),t-PA含量显著降低(P<0.05)。与模型对照组比较,各药物组大鼠全血黏度(除补阳还五汤高剂量组高切变率全血黏度外)、血浆黏度、血小板黏附率以及v WF、FN、β-TG、PAI-1、PLT、PDW(除补阳还五汤低、高剂量组外)、MPV、PCT、PLCR(除补阳还五汤低剂量组外)、FIB含量或水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),t-PA含量(除阳性对照组外)均显著升高(P<0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过降低血液黏度和FN含量、改善血小板黏附性、增强纤溶活性、改善血小板聚集状态、抑制凝血及血小板释放亢进等途径,来发挥对高脂血症模型大鼠病理状态的改善作用。     

早搏灵胶囊对肾上腺素诱导室性心律失常家兔的影响及作用机制的研究

目的:通过观察早搏灵胶囊对肾上腺素诱导的家兔的室性心律失常出现时间、持续时间及心肌钠钾ATP酶活性的影响,探讨早搏灵胶囊治疗室性心律失常的作用机制。方法:选取新西兰家兔32只,随机分成4组,每组均为8只,分别为空白组、模型组、普萘洛尔组、早搏灵胶囊组。连续灌胃7d后,以肾上腺素造模,统计家兔的室性心律失常出现时间、室性心律失常持续时间,以及通过定磷法测定心肌钠钾ATP酶活性。结果:与模型组相比,早搏灵胶囊组和普萘洛尔组能明显延迟室性心律失常出现时间,缩短室性心律失常持续时间,有显著性差异;早搏灵胶囊组与普萘洛尔组在室性心律失常持续时间上无明显差异,但其延迟室性心律失常出现时间的作用低于普萘洛尔组,具有显著性差异;与模型组比较,早搏灵胶囊组与普萘洛尔组钠钾ATP酶活性明显增高,具有显著性差异;早搏灵胶囊组钠钾ATP酶活性低于普萘洛尔组,有显著性差异。结论:早搏灵胶囊能够抵抗肾上腺素诱导的家兔的室性心律失常发生;早搏灵胶囊具有保护肾上腺素诱导的家兔心肌钠钾ATP酶活性的作用。     

活骨丹胶囊对大鼠血液流变学及部分生化指标的影响

目的: 研究活骨丹胶囊对实验大鼠激素性股骨头坏死模型的血液流变学、血脂、血钙、骨代谢等指标的影响。 方法: 取清洁级健康SD大鼠60只,雌雄各30只,按体重随机分成空白组,模型组,阳性对照药仙灵骨葆胶囊组(0.28 g·kg^-1),活骨丹胶囊高、中、低剂量组(1.80,0.90,0.45 g·kg^-1)。除空白组外,各组每周1次大腿内侧im醋酸泼尼松龙(24.5 mg·kg^-1),连续8周造模,在造模的同时,各给药组均灌胃给药,模型组和空白组给予等量蒸馏水,预防性灌胃给药8周后取血测定大鼠全血黏度,血浆黏度,血沉K值,血清总胆固醇(CHO),甘油三酯(TG)的含量,血清碱性磷酸酶(ALP),酸性磷酸酶(ACP),血钙(Ca),血磷(P)的含量。 结果: 与空白组比较,模型组中高、中、低各组切变率下的全血黏度均显著升高(P<0.01),血沉K值及血浆黏度均显著升高(P<0.01),血清中CHO,TG,ALP的含量均显著升高(P<0.01),血清Ca含量升高(P<0.05)。与模型组比较,活骨丹胶囊各剂量组可明显增加血清中的Ca,P含量,同时降低ALP和ACP的活性,降低全血黏度,血浆黏度及血脂,差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。 结论: 活骨丹对于骨质破坏所引起的ALP,ACP升高有一定的拮抗作用,同时能降低血脂,调节血清中的Ca,P沉积,增加骨密度。     

寒凝血瘀模型大鼠红细胞膜生物学研究

目的: 从血液流变学和红细胞膜生物学变化探讨寒凝血瘀证在红细胞膜上的生物学差异。方法: 20只Wistar大鼠,随机分为空白组及寒凝血瘀组,每组10只。寒凝血瘀组大鼠置于0~1℃冰水中8~10 min,待大鼠全身僵直后取出,连续造模14 d,第15天大鼠皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mL·kg^-1(0.8 mg·kg^-1),共2次,间隔4 h,2次之间将大鼠置于冰水中浸泡5 min,末次造模后禁食不禁水12 h。次日以乌拉坦1 g·kg^-1麻醉,固定,取血测定血液流变学指标以及红细胞膜组分相关指标。结果: 与空白组比较,寒凝血瘀组大鼠体重显著降低;全血黏度显著增高(P<0.05);血浆黏度及血脂无显著变化;红细胞变形指数在600,800,1 000 s^-1切变率下均显著降低(P<0.05);血沉K值显著升高(P<0.05);APTT(活化部分凝血活酶时间)降低极显著(P<0.01);FIB(纤维蛋白原)含量显著升高(P<0.05);TT(凝血酶时间)、PT(凝血酶原时间)无显著影响,但有降低趋势;Na⁺-K⁺-ATP酶活力、唾液酸含量及SOD(超氧化物歧化酶)活力均显著降低(P<0.05);MDA(丙二醛)含量及膜胆固醇含量有升高趋势但无显著差异;巯基含量有降低趋势,但无显著差异。结论: 寒凝血瘀模型可能由于红细胞膜上Na⁺-K⁺-ATP酶、唾液酸及SOD的减少导致全血黏度及红细胞变形性发生改变。