5q-综合征二例

例 1,女 ,6 4岁 ,因头昏、乏力 3个月入院。既往曾有甲状腺功能亢进史 15年 ,经服甲巯咪唑、甲状腺素片后纠正。此次发病后曾用铁剂、叶酸治疗无效。查体 :贫血貌 ,皮肤粘膜无黄染及出血点 ,肝、脾、淋巴结不肿大。实验室检查 :Ｈｂ 47ｇ/Ｌ ,ＲＢＣ 1.32× 10 12 /Ｌ ,ＷＢＣ 3.2× 10 9/Ｌ ,ＢＰＣ 2 0 0× 10 9/Ｌ ,ＭＣＶ 92 .2ｆｌ ,ＭＣＨ 31.5ｐｇ ,ＭＣＨＣ 342ｇ/Ｌ。骨髓象示有核细胞增生活跃 ,粒∶红 =1.4∶1,其中粒系占 0 .47,原始粒细胞0 .0 5 ,形态大致正常 ;红系增生极度活跃 ,以中、晚幼红细胞为主 ,偶见三核、核畸形及巨幼…     

一株新的急性髓系白血病细胞系SH-2的建立及其鉴定

Objective To establish and characterize a novel human myeloid leukemia cell line SH-2. Methods Bone marrow mononuclear cells(BMMNC) isolated from a AML-M2 patient, who failed to ob-tain complete remission after chemotherapy and allogenic bone marrow transplantation were passed in a long term IMDM culture medium supplemented with 20% fetal calf serum. Stromal cells were retained and rh-IL-3was added in the culture system. A new human myeloid leukemia cell line SH-2 was successfully established with a cytogeuetic characteristics of a loss of Y chromosome(- Y), a derivative chromosome 16 resulting from unbalanced translocation between chromosome 16 and 17, monosome 17, trisomy 19 and p53 alteration. Vari-ous methods were employed to characterize SH-2 cell line. Results SH-2 cells has been maintained without cytokine and stromal cells for more than 3 years without EB virus and mycoplasma contamination. SH-2 cells had the basically same morphological, immunophenotypic and cytogenetic features as the patient' s leukemia cells did, such as myeloid morphology, an immunophenotype of CD13+ , CD33+ , CD56+ , CD16/56+ and a hypodiploid karyotype of 45, X, - Y, der(16) t(16;17) (q24;q12) , - 17, + 19, which were gradually de-creased and replaced by the near-tetraploid cells with a karyotype of 73 - 102 (80), XX, - Y, - Y, del (lq31) ×2, der(16)t(16;17) (q24;q12) ×2, - 17, - 17, + 19, + 19. FISH and multiple FISH delineated all the abnormalities and revealed a loss of one p53 allele due to monosomy 17. DNA direct sequencing detec-ted a point mutation of CAG to CAT at codon 576 of exon 5 in another p53 allele. RT-PCR showed that SH-2 cells expressed apoptosis-related genes (bcl-2, Fas, GST- π and p21) rather than MDR-related genes. Short tandem repeat PCR provided powerful evidence for the derivation of SH-2 cell line from the patient' s leukemia cells. SH-2 cells had certain colony formation and tumorigenic capacities in nude and SCID mice. Conclu-sion SH-2 is a new myeloid leukemia cell line with a unique biology background, and will provide a useful tool for leukemia research.     

加强健康教育提高妇幼保健水平

随着社会的进步和人民生活水平的提高,人们的健康意识在增强,保健需求也在不断扩大,健康教育日益受到人们的重视。目前,我国健康教育的发展水平是不均衡的,东西部地区、城乡之间存在着较大差异。人群的健康知识水平和健康行为形成率还较低,特别是在贫困、边远农村地区,农民自我保健意识淡薄。据2001年全国6省农村健康教育现状调查显示：在农村15岁以上人群中,环境、饮水、营养、传染病、慢性病预防等8项基本卫生知识知晓率仅为36％。     

伴不典型t(15;17)易位急性早幼粒细胞白血病的临床和实验研究

目的 探讨伴不典型t(15;17)易位的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的预后特征.方法 收集本院2011年5月至9月收治2例的伴不典型t(15;17)易位APL患者为研究对象.按常规方法制备患者染色体,经R显带进行核型分析,实时定量PCR检测PML/RARα融合基因(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该伦理会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签订临床研究知情同意书).结果 2例APL患者伴不典型t(15;17)易位核型,分别是46,XY,t(8;17;15)(q22;q21;q22)和45,X,-Y,t(11;17)(q23;q21).前者PML/RARα融合基因阳性,全反式维甲酸(ATRA)+三氧化二砷(ATO)诱导治疗4周后,骨髓形态学达到完全缓解(CR);后者PLZF-RARα融合基因,采用ATRA+ATO+柔红霉素(DNR)治疗6周后复查骨髓象,异常早幼粒细胞仍占80％,于1个月后死于全身性出血,从开始接受治疗计算,总生存期仅为72 d.结论 伴不典型t(15;17)易位,但PML/RARα融合基因阳性APL患者对ATRA治疗敏感,预后良好,而伴t(11;17) (q23;q21)/PLZF-RARα融合基因阳性APL患者对ATRA不敏感,预后不良.     

成人急性髓细胞性白血病患者的WHO分型与FAB分型的比较研究

[目的]比较急性髓细胞性白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者FAB分型和WHO分型的优缺点。[方法]联合应用骨髓细胞形态学、免疫表型检测、常规细胞遗传学技术、多重RT-PCR技术对94例患者进行检测。分别对这94例患者进行FAB分型及WHO分型。[结果]WHO分型：AML：（1）伴有再现性遗传学异常的AML 42例;（2）伴有多系病态造血的AML3例;（3）治疗相关性AML和MDS 0例;（4）无法按上述分型的白血病（NOC-AML）45例。FAB分型为MDS：MDS-RAEB 1例、MDS-RAEBT7例。AML M0 3例、M1 10例、M2 33例、M3 13例、M4 6例、M5 17例、M6 4例。对90例WHO分型诊断的AML患者进行预后评估：化疗前白细胞计数、化疗1、2次是否CR及遗传学异常对预后有影响。[结论]WHO分型全面地包括了AML的类型（原发性AML、MDS相关性AML、治疗相关性AML）;提高了遗传学检测的重要性;同时将MDS-RAEBT纳入AML范围,给予MDS-RAEBT患者及时的治疗。应推广WHO分型,但以形态学为基础的FAB分型仍不可缺少。     

供体淋巴细胞输注联合伊马替尼治疗异基因造血干细胞移植后Ph+白血病复发的初步临床观察

 目的 观察供体淋巴细胞输注（DLI）联合伊马替尼治疗异基因移植后复发的Ph+白血病的疗效。方法 以实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）及荧光原位杂交（FISH）方法检测5例Ph+白血病患者移植后微小残留病灶（MRD）,在复发早期进行DLI联合伊马替尼治疗。伊马替尼初始剂量300～400 mg／d,DLI采用递增剂量方案,首次剂量为0.5×106／kg ~ 5×106／kg,间隔时间为1 ~ 4周。观察治疗反应及相关并发症。结果 5例患者中有2例慢性髓细胞白血病（CML）患者发生分子学反应,其中1例达分子学缓解;而2例高危Ph+急性淋巴细胞白血病（Ph+ ALL）患者及1例早期血液学复发的慢性髓细胞白血病第二次慢性期（CML-CP2）患者治疗无反应。复发后随访40 d～14个月,5例应用伊马替尼后均未发生严重并发症。DLI后1例发生Ⅳ度急性移植物抗宿主病（aGVHD）,2例发生Ⅰ～Ⅱ度aGVHD,1例发生肺部感染。结论 伊马替尼联合DLI可有效治疗移植后复发的CML慢性期患者,副作用可耐受,但对复发的Ph+ ALL及CML急变期患者疗效有限。     

双色间期荧光原位杂交检测急性粒-单核细胞白血病inv(16)

 目的 探讨双色荧光原位杂交（D-FISH）技术在检测急性粒-单核细胞白血病（M4）inv（16）中的价值。方法 用荧光素直接标记的双色断裂点分离的基因探针CBFβ对42例M4患者进行间期D-FISH检测,并与常规细胞遗传学进行比较分析。结果 采用R显带核型分析的42例M4患者均未发现inv(16),而D-FISH检测发现10例（23.8 %）inv(16),阳性率为30.1 % ~ 98.0 %,平均阳性率82.1 %。5例M4Eo患者均伴有inv(16)。10例阳性患者中7例核型正常,2例伴+22,1例伴+8。结论 inv(16)在M4中阳性率为23.8 %,与M4Eo密切相关;用CBFβ双色探针进行D-FISH为检测inv(16)提供了有效的方法,是细胞遗传学检查的重要补充。     

应用CpG-寡脱氧核苷酸免疫刺激进行慢性淋巴细胞白血病的染色体研究

目的 验证CpG-寡脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激是否能提高B细胞慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)核型异常检出率.方法 抽取57例B-CLL患者的骨髓或外周血,分别加入CpG-ODN DSP30+白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)、美洲商陆(pokeweed,PWM)和IL-2后进行培养,5 d后按常规收获并制备染色体,应用R显带技术进行核型分析.应用Cen12、D13S25、Rb1、ATM、P53、MYB和IgH探针对其中19例核型正常的患者进行组合荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测.抽提骨髓或外周血单个核细胞基因组DNA,应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增免疫球蛋白重链可变区(immunoglobulin variable heavy chain,IgVH)并进行DNA序列分析.应用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测白血病细胞的CD38和ZAP70表达.结果 DSP30+IL-2组的异常核型检出率(43.85%)明显高于PHA组(15.09%)、PWM组(17.31%)和IL-2组(3.13%)(P<0.01).DSP30+IL-2组共检出畸变52种.数目异常以+12或+12伴其它异常为最多见(9例);结构异常以易位为最多见(14例),包括平衡易位11例和不平衡易位3例,前者中又以14q32重排为最多见(7例).FISH显示19例正常核型患者中13例(68.42%)显示1种或多种异常,包括12三体和p53缺失各l例,IgH重排和部分缺失各1例,13q14.3缺失11例,其中5例合并RB1缺失,1例合并RB1部分缺失,未见ATM和MYB缺失者.PCR揭示10/18例有IgVH突变(55.55%).FCM检测揭示10/45例CD38+,35/45例CD38-,11/27例ZAP70+,16/27例ZAP70-.同时进行CD38和ZAP70检测的26例中,5例为CD38+ZAP70+,13例为CD38-ZAP70-,2例为CD38+ZAP70-,6例为CD38-ZAP70+.统计学分析揭示复杂核型异常与IgVH无突变之间有相关性,但未发现CD38或ZAP70表达与核型之间有相关性.结论 CpG-ODN可显著提高CLL的核型异常特别是各种平衡和不平衡易位的检出率;FISH是常规核型分析的重要补充,二者结合能提供更全面的遗传学信息.     

两种BCR/ABL探针在Ph阳性白血病荧光原位杂交检测中的不同信号模式及其意义

目的 比较BCR/ABL双色额外信号探针(dual color extra-signal BCR/ABL probe,ESFISH探针)及BCR/ABL双色双融合探针(dual color dual fusion BCR/ABL probe,D-FISH探针)在Ph阳性白血病荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测中信号模式的差异,探讨它们的诊断价值.方法 分别采用D-FISH和ES-FISH探针对74例伴有单纯t(9;22)(q34;q11)及37例伴有变异Ph易位或复杂核型异常的Ph阳性白血病患者骨髓细胞进行间期FISH检测.结果 所有单纯t(9;22)(q34;q11)易位的白血病患者应用两种探针均检测到BCR/ABL阳性信号,ES-FISH探针显示2个橙色信号、1个绿色信号和1个黄色信号模式,而D-FISH探针显示1个橙色信号、1个绿色信号和2个黄色信号模式.ES-FISH探针在9例(12.2%)Ph阳性白血病患者中识别次要BCR断裂位点(1个橙色信号、1个绿色信号和2个黄色信号),而D-FISH探针不能识别主要BCR和次要BCR断裂位点;D-FISH探针在8例(10.8%)Ph阳性白血病中区分ABL基因单独缺失(1个橙色信号、2个绿色信号、1个黄色信号)和ABL、BCR基因共同缺失(1个橙色信号、1个绿色信号和1个黄色信号),ES-FISH则不能区分之.检测变异Ph易位和含Ph易位的复杂核型异常时,两种探针的信号模式分别有4种和6种之多,且以不典型者居多,对于它们的精确解释必须依赖常规染色体分析和中期FISH结果 .结论 ES-FISH及D-FISH探针由于BCR探针大小及覆盖区域不同,在Ph阳性白血病的FISH检测中显示不同信号模式,可分别作为Ph+急性淋巴细胞白血病和慢性髓系白血病患者FISH检测的首选.若采用伊马替尼治疗,主要BCR断裂点和次要BCR断裂点、伴或不伴有衍生9号染色体部分序列缺失均不影响预后,但鉴于ES-FISH探针性价比优于D-FISH探针,推荐其作为Ph阳性白血病FISH检测的首选.