血液病患者9号染色体倒位检测结果调查

目的调查血液病患者9号染色体倒位(pericentric inversion of chromosome 9,inv(9))的发生率。方法用R显带技术分析2010年1月至2015年10月苏州大学附属第一医院确诊的39 589例血液病患者染色体核型,比较各血液病患者inv(9)检出率的差异。结果血液病患者inv(9)总检出率为1.44%(571/39 589);急性髓系白血病(AML)和非AML患者inv(9)检出率分别为3.28%(172/5 251)和1.17%(399/34 338),差异有统计学意义(P0.01);在AA和非AA患者inv(9)检出率分别为3.64%(43/1 181)和1.39%(528/38 408),差异有统计学意义(P0.01)。结论 AML和AA患者inv(9)检出率升高。     

伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床及实验研究

目的:探讨伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验室特征.方法:应用常规细胞遗传学,间期荧光原位杂交技术(FTSH),多重荧光原位杂交技术,检测2例急性早幼粒细胞白血病.结果:常规细胞遗传学检测发现2例具有复杂核型,间期FISH证实2例均含有PML/RARA融合基因,多重FISH明确复杂核型性质.2例预后均较差.结论:联合常规细胞遗传学,间期FISH,多重FISH可以准确明确复杂核型的性质.具有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病患者预后较差.     

SET-NUP214融合基因在急性T淋巴细胞白血病患者中的表达及临床意义

本研究旨在探讨SET-NUP214融合基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)中的表达,分析伴有SET-NUP214的T-ALL的临床及分子生物学特征。运用RT-PCR检测58例T-ALL患者骨髓标本中SET-NUP214的表达,以间期荧光原位杂交(FISH)及微阵列比较基因组杂交(Array-CGH)检测9q34缺失,基因测序法检测PHF6和NOTCH1基因突变。结果表明,仅在6例T-ALL患者中检测到SET-NUP214融合基因的表达。除T系抗原标记外,这些患者均表达髓系抗原CD13和(或)CD33,其中4例患者经FISH检测到9q34缺失,3例患者经Array-CGH检测到del(9)(q34.11q34.33)。6例SET-NUP214阳性的T-ALL患者中有4例检测到PHF6基因突变,5例检测到NOTCH1基因突变。结论:SET-NUP214融合基因多由染色体9q34的缺失所致,SET-NUP214阳性的T-ALL常伴有PHF6及NOTCH1基因突变。     

23例多发性骨髓瘤患者的染色体分析

有研究指出几乎所有的多发性骨髓瘤患者均存在染色体异常。但由于骨髓瘤细胞有丝分裂指数低，增殖缓慢，加上骨髓浸润程度不同，限制了常规细胞遗传学方法（CC）的染色体异常检出率。在借鉴国外相关研究的基础上，我们利用细胞因子IL-6、GM-CSF和IL-3刺激浆细胞的增殖和分裂及增加秋水仙酰胺的终浓度[由常规的50ng／ml增加到（100～200）ng／ml]，以观察MM常见的染色体异常，并且使用荧光原位杂交技术以提高MM的染色体异常检出率。     

间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征20q-染色体异常

为了探讨间期荧光原位杂交(FISH)技术在检测骨髓增生异常综合征(MDS)20号染色体长臂部分缺失异常中的价值，应用绿色荧光素SpectrumGreen直接标记的酵母人工染色体(YAC)克隆912C3(跨越20号染色体长臂q12断裂点)作为探针，对52例MDS患和5名正常对照的骨髓细胞进行单色间期FISH检测，每例分析200—300个细胞，以1个绿色荧光杂交信号＞7．16％作为阳性标准，并与常规细胞遗传学(conventional cytogenetics，CC)检测结果相比较。结果显示，52例MDS患中FISH检测7例(13．5％)为阳性，CC检测其中4例为阳性，3例为阴性。结论：YAlC912C3为探针的间期FISH技术是检测MDS患20q-染色体异常的有效方法，是CC检测的一个重要补充。     

逆转录病毒载体介导的标志基因转移研究

目的：为建立高效、安全的逆转录病毒介导的基因标记系统。方法：用脂质体方法将含有标志基因 Ｎｅｏ Ｒ的逆转录病毒载体 Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 导入包装细胞 Ｐ Ａ３１７ ;通过与单向型包装细胞 Ｇ Ｐ Ｅ８６ 相互转导,获得高滴度的双嗜型产病毒细胞,并以其对人类白血病细胞进行基因标记。结果：脂质体转染法获得的病毒滴度约为２ ．０ ×１０５ Ｃ Ｆ Ｕ／ ｍｌ,而与 Ｇ Ｐ＋ Ｅ８６ 细胞转导后可提高至２ ．８ ×１０６ Ｃ Ｆ Ｕ／ ｍｌ;重组病毒转导白血病细胞（ Ｈ Ｌ－ ６０ , Ｋ５６２ , Ｋ Ｇ－ １） 后,聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 证实 Ｎｅｏ Ｒ 基因整合到靶细胞基因组,巢式 Ｐ Ｃ Ｒ 与补救分析均未能检测到辅助病毒。结论：“乒乓效应”可显著提高逆转录病毒滴度,而逆转录病毒介导的基因标记系统是安全的。     

TCF3-PBX1融合基因阳性成人急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

目的 探讨TCF3-PBX1融合基因阳性的成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的形态学、免疫学、细胞遗传学和临床特点.方法采用R显带技术进行常规核型(CC)分析,间期荧光原位杂交(FISH)技术和RT-PCR技术检测TCF3-PBX1融合基因,流式细胞术(FCM)检测细胞免疫表型;分析19例TCF3-PBX1融合基因阳性成人ALL的临床和实验室特征并进行长期随访.结果本组19例TCF3-PBX1融合基因阳件ALL占同期成人ALL的3.13%;其中L_2 12例,L_2 7例.细胞遗传学检测7例为t(1;19)平衡易位,10例为der(19)t(1;19)不平衡易位,2例为正常核型.9例经RT-PCR检测的病例均有TCF3-PBX1融合基因转录本,17例经间期FISH检测TCF3-PBX1融合基因均为阳性.18例行FCM检测的患者中16例为B淋系抗原表达,2例为T淋系抗原表达.17例患者有不同程度的肝、脾、淋巴结等髓外浸润.本组患者经1个疗程诱导化疗后17例获得完全缓解(CR),CR率为94.7%,中位无复发生存时间为3.2个月,中位总生存期为7.2个月.结论 TCF3-PBX1融合基因阳件成人ALL有着独特的临床和实验室特点;治疗缓解率高,但短期内易复发,总生存期短,应该采取更积极的治疗以改善预后;间期双色FISH联合CC及RT-PCR可以提高TCF3-PBX1融合基因的检出率.     

伴有t(9;12)(q22;p13)易位的急性髓细胞白血病M2a

目的报告1例伴有t(9;12)(q22;p13)易位的急性髓细胞白血病M2a。方法患者骨髓细胞短期培养后按常规方法制备染色体,采用R显带技术进行染色体核型分析;以9号和12号整条染色体涂染探针对其进行染色体涂染检测。结果染色体核型和染色体涂染分析均证实该患者具有t(9;12)(q22;p13)克隆性染色体异常。结论t(9;12)(q22;p13)易位是急性髓细胞白血病M2a的一种新的临床遗传学类型。     

伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床及实验研究

目的：探讨伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验室特征。方法：应用常规细胞遗传学,间期荧光原位杂交技术（FTSH）,多重荧光原位杂交技术,检测2例急性早幼粒细胞白血病。结果：常规细胞遗传学检测发现2例具有复杂核型,间期FISH证实2例均含有PML／RARA融合基因,多重FISH明确复杂核型性质。2例预后均较差。结论：联合常规细胞遗传学,间期FISH,多重FISH可以准确明确复杂核型的性质。具有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病患者预后较差。     

FISH检测意义未明单克隆γ球蛋白病患者13号染色体及p53基因缺失

目的了解意义未明单克隆γ球蛋白病(MGUS)患者13号染色体及p53基因缺失情况。方法磁珠分选系统(MACS)技术分选浆细胞后,采用D13S319和17p13 DNA特异性探针和荧光原位杂交(FISH)技术对23例MGUS患者的浆细胞进行13号染色体及p53基因缺失的检测。结果23例MGUS中4例(17．4％)有del(13q14),其阳性细胞率在19％-80％之间;未见p53基因缺失。结论FISH结合MACS是检测MGUS遗传学异常的有效方法,del(13q14)可能是疾病过程中的继发事件,其预后意义及其与疾病进展的关系有待进一步探讨。