耐As2O3的白血病细胞系SHI-1／AS2的建立及耐药机制的初步研究

目的建立三氧化二砷（As2O3）的耐药细胞株,进一步从分子水平研究其耐药机制。方法采用高度短时问接触培养方法建立耐As20,的自血病细胞系（SHI—1／AS2）。细胞倍增时间和耐药倍数测定采用M1Tr法;细胞周期和细胞免疫表型测定采用流式细胞分析术;常见的10个耐药基因检测和比较采用实时定量PCR（RQ—PCR）。结果耐As203的自血病细胞系SHI-1,AS2的细胞倍增时间与SHI-1相似,差异无统计学意义（P〉O．05）。SHI-1／AS2细胞GdGl期细胞少于SHI-1细胞,而G2／M、S期细胞则多于SHI-1细胞,差异均有高度统计学意义（均P〈0．01）。SHI—1/AS2细胞对As2O3的耐药倍数是SHI-1的2．7倍,差异有统计学意义（P〈O．01）。SHI-1,AS2细胞的集落形成率高于SHI—1细胞。SHI-1／AS2细胞的耐药相关基因Bcl-2有明显上调,Bax、Fas及MGMT下调,而其他耐药相关基因无明显变化。结论建立-株对As203产生耐药的白血病细胞系SHI-1／AS2,耐药倍数是SHI-1的2．7倍,其耐药机制与Bcl-2、Bax和Fas基因介导的细胞凋亡调控有关。     

逆转录-多重巢式聚合酶链反应技术在急性单核系白血病M4/M5 MLL基因重排检测中的应用

目的 探讨逆转录-多重巢式聚合酶链反应（多重PCR）技术在初诊M4／M5患者MLL基因重排检测中的价值。方法 采用骨髓直接或短期培养法制备染色体，应用R显带技术进行核型分析。采用多重PCR技术，检测40例初诊M4／M5患者中5种急性髓系白血病常见的MLL融合基因以及MLL部分串联重复。结果 R显带揭示7有涉及11q23的易位，包括t（6；11）（q27；q23）、t（9；11）（p21；q23）、t（11；17）（q23；q21）、t（11；19）（q23；p13．1），14例有其他核型异常，19例为正常核型。多重PCR证实了7例核型分析显示11q23易位标本中的6例，例3核型分析揭示46，XX，t（6；11）（q27；q23），多重PCR检测MLL/AF6为阴性；19例显带分析为正常核型标本中检出2例MLL部分串联重复。结论 多重PCR是对初诊M4／M5患者进行各种MLL重排筛检的有效方法。     

两种BCR/ABL探针在Ph阳性白血病荧光原位杂交检测中的不同信号模式及其意义

目的 比较BCR/ABL双色额外信号探针(dual color extra-signal BCR/ABL probe,ESFISH探针)及BCR/ABL双色双融合探针(dual color dual fusion BCR/ABL probe,D-FISH探针)在Ph阳性白血病荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测中信号模式的差异,探讨它们的诊断价值.方法 分别采用D-FISH和ES-FISH探针对74例伴有单纯t(9;22)(q34;q11)及37例伴有变异Ph易位或复杂核型异常的Ph阳性白血病患者骨髓细胞进行间期FISH检测.结果 所有单纯t(9;22)(q34;q11)易位的白血病患者应用两种探针均检测到BCR/ABL阳性信号,ES-FISH探针显示2个橙色信号、1个绿色信号和1个黄色信号模式,而D-FISH探针显示1个橙色信号、1个绿色信号和2个黄色信号模式.ES-FISH探针在9例(12.2%)Ph阳性白血病患者中识别次要BCR断裂位点(1个橙色信号、1个绿色信号和2个黄色信号),而D-FISH探针不能识别主要BCR和次要BCR断裂位点;D-FISH探针在8例(10.8%)Ph阳性白血病中区分ABL基因单独缺失(1个橙色信号、2个绿色信号、1个黄色信号)和ABL、BCR基因共同缺失(1个橙色信号、1个绿色信号和1个黄色信号),ES-FISH则不能区分之.检测变异Ph易位和含Ph易位的复杂核型异常时,两种探针的信号模式分别有4种和6种之多,且以不典型者居多,对于它们的精确解释必须依赖常规染色体分析和中期FISH结果 .结论 ES-FISH及D-FISH探针由于BCR探针大小及覆盖区域不同,在Ph阳性白血病的FISH检测中显示不同信号模式,可分别作为Ph+急性淋巴细胞白血病和慢性髓系白血病患者FISH检测的首选.若采用伊马替尼治疗,主要BCR断裂点和次要BCR断裂点、伴或不伴有衍生9号染色体部分序列缺失均不影响预后,但鉴于ES-FISH探针性价比优于D-FISH探针,推荐其作为Ph阳性白血病FISH检测的首选.     

急性红白血病40例染色体的研究

急性非淋巴细胞白血病（急非淋）患者有非随机的染色体异常,其中２／３和特定的ＦＡＢ分型相关,且具有重要的诊断和预后价值,例如ｔ（８;２１）和Ｍ２、ｔ（１５;１７）和Ｍ３、ｉｎｖ（１６）和Ｍ４ＥＯ、ｔ／ｄｅｌ（ｌｌｑ２３）和Ｍ５等。关于急性红白血病（Ｍ６）染色体研究的资料不但较为少见,而且至今未发现特异性染色体重排。我院于１９８４年至２０００年５月间对４０例Ｍ６患者作了细胞遗传学检测。 一、资料和方法 １．研究对象：４０例均在我院血液室进行染色体核型分析的Ｍ６患者。Ｍ６的诊断按文献［ｌ］,即骨髓片中红…     

建湖县2000—2011年婴儿死因分析

为及时掌握建湖县婴儿死亡率、主要死亡原因、死前保健服务及其变化趋势,采取针对性干预措施,提高儿童健康水平,现将建湖县2000—2011年婴儿死亡监测资料汇总分析如下。1材料与方法1.1资料来源2000—2011年建湖县各镇上报的活     

支原体肺炎两种给药方法的疗效观察及随访

目的观察两种给药方法治疗小儿支原体肺炎的临床效果及安全性。方法选取我所2010年1月—2012年3月收治的支原体肺炎患儿66例,随机分为2组,其中观察组34例,采用红霉素静滴5 d后序贯阿奇霉素口服3 d,停4 d,如此往复2次;对照组32例,采用静滴阿奇霉素5 d后以静滴量口服3 d,停4 d,如此往复2次。结果观察组患儿治疗总有效率、不良反应发生率与对照组比较无显著差异(P>0.05);但观察组患儿退热时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间明显少于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。1年内反复呼吸道感染发生率病程≥4周者显著高于病程<4周者(P<0.05)。结论红霉素与阿奇霉素序贯治疗小儿支原体肺炎临床效果确切,症状、体征消失快,总有效率高,不良反应发生率低,是最佳治疗方案。应给予早期诊断与治疗,防止持续性的免疫损伤,从而防止反复呼吸道感染。     

1例同时伴有t(15;17)和t(8;11)易位的早幼粒细胞白血病的临床和实验室观察

典型的早幼粒细胞白血病(APL)患者有t(15;17)(q22;q12)染色体易位和PML-RARα融合基因存在,临床上对全反式维甲酸(ATRA)敏感,治疗后大多能获完全缓解(CR).但有学者报道,伴有额外染色体异常者不但容易误诊,而且预后不良[1].新近我院也遇到1例APL,除有t(15;17)易位外还同时存在t(8;11)(p23;q14)易位,其白血病细胞形态不典型,缺乏嗜天青颗粒和Auer小体,以致初诊时误诊为急性髓细胞白血病(AML)M1型,且经ATRA、DA(柔红霉素、阿糖胞苷)方案和三氧化二砷(As2O3)治疗难以获得CR,现报道如下.     

SET-NUP214融合基因在急性T淋巴细胞白血病患者中的表达及临床意义

本研究旨在探讨SET-NUP214融合基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)中的表达,分析伴有SET-NUP214的T-ALL的临床及分子生物学特征。运用RT-PCR检测58例T-ALL患者骨髓标本中SET-NUP214的表达,以间期荧光原位杂交(FISH)及微阵列比较基因组杂交(Array-CGH)检测9q34缺失,基因测序法检测PHF6和NOTCH1基因突变。结果表明,仅在6例T-ALL患者中检测到SET-NUP214融合基因的表达。除T系抗原标记外,这些患者均表达髓系抗原CD13和(或)CD33,其中4例患者经FISH检测到9q34缺失,3例患者经Array-CGH检测到del(9)(q34.11q34.33)。6例SET-NUP214阳性的T-ALL患者中有4例检测到PHF6基因突变,5例检测到NOTCH1基因突变。结论:SET-NUP214融合基因多由染色体9q34的缺失所致,SET-NUP214阳性的T-ALL常伴有PHF6及NOTCH1基因突变。     

FISH检测意义未明单克隆γ球蛋白病患者13号染色体及p53基因缺失

目的了解意义未明单克隆γ球蛋白病(MGUS)患者13号染色体及p53基因缺失情况。方法磁珠分选系统(MACS)技术分选浆细胞后,采用D13S319和17p13 DNA特异性探针和荧光原位杂交(FISH)技术对23例MGUS患者的浆细胞进行13号染色体及p53基因缺失的检测。结果23例MGUS中4例(17．4％)有del(13q14),其阳性细胞率在19％-80％之间;未见p53基因缺失。结论FISH结合MACS是检测MGUS遗传学异常的有效方法,del(13q14)可能是疾病过程中的继发事件,其预后意义及其与疾病进展的关系有待进一步探讨。     

多重荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交（M-FISH）技术在多发性骨髓瘤（MM）复杂核型异常（CCAs）检测中的价值。方法对5例常规R显带具有CCAs的MM患者应用MFISH确定复杂染色体的重排及标记染色体的组成。结粜明确了常规核型（CC）分析中的所有异常,共检出20种结构异常,其中缺失2种,易位18种,均为不平衡易位。最常累及的为14号染色体、1q的不平衡易位及6号染色体。结论对伴有CCAs的MM患者,M-FISH技术可以明确CC分析中复杂染色体异常,并发现和纠正CC分析中漏检及误检的异常,为MM的染色体异常研究提供了一种理想的方法。