肥胖相关新基因NYGGF4对3T3-L1脂肪前体细胞的增殖调节作用

目的 观察NYGGF4基因过表达对3T3-L1脂肪前体细胞增殖的影响,探讨该基因在肥胖发生发展中的作用.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增NYGGF4开放阅读框(ORF)的全长,通过双酶切连接法构建NYGGF4-pcDNA3.1真核表达载体.采用脂体法转染3T3-L1前体脂肪细胞,以pcDNA3.1空载和未转染细胞为对照.遗传霉素(G418)压力筛选稳定转染细胞株,PCR鉴定转染细胞的NYGGF4的mRNA水平.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测稳定转染细胞株连续7 d的生长状态,以转染空载和未转染正常3T3-L1为对照,绘制生长曲线.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.稳定转染细胞株有NYGGF4基因的表达,而pcDNA3.1空载未见人源性NYGGF4的表达;2.转染NYGGF4基因的3T3-L1细胞增殖速度明显较未转染和转染空载的3T3-L1细胞加快.结论 新基因NYGGF4可明显促进3T3-L1脂肪前体细胞的增殖,可能影响肥胖的发生发展.     

超微病理检查结合免疫荧光学方法诊断遗传性肾炎

目的探讨诊断遗传性肾炎（Ａｌｐｏｒｔ综合征）的新指标。方法应用超微病理检查结合免疫荧光方法,对４例电镜显示肾小球基底膜（ＧＢＭ）变薄或厚薄不均的患儿进行研究。结果２例Ａｌｐｏｒｔ综合征患儿的肾活检组织标本电镜下ＧＢＭ弥漫性厚薄不均,广泛变厚和分层,并与变薄的ＧＢＭ并存。间接免疫荧光检查ＧＢＭ中抗Ⅳ型胶原α３链、α５链抗体完全阴性,抗Ⅳ型胶原α１链抗体明显增强。而２例薄基底膜肾病患儿肾活检组织尽管电镜下ＧＢＭ也有变薄、断裂和分层现象,且其中１例有节段性增厚,但间接免疫荧光检查ＧＢＭ中抗Ⅳ型胶原成分均无改变。结论超微病理结合间接免疫荧光学检查,有助于诊断Ａｌｐｏｒｔ综合征,并能将其与薄基底膜肾病相鉴别