线粒体DNA与衰老和长寿

线粒体DNA（mtDNA）是细胞中独立存在于核DNA（nDNA）之外的呈闭合环状的DNA分子．研究表明mtDNA有半自主复制．高突变性、母系遗传、异质性等特点。它包含37个基因．其中的2个编码rRNA、22个编码tRNA．另外13个基因编码与线粒体氧化磷酸化有关的蛋白质。这些蛋白质与其他nDNA编码的蛋白质一起．组成了完整的电子传递链，完成细胞呼吸功能，为细胞提供能量。当线粒体功能出现异常的时候．细胞往往因能量供应不足而丧失活力，进而出现衰老。另外因为mtDNA特殊的结构积累了大量的突变，最终加速衰老的发生发展。众多研究表明线粒体与衰老和长寿有着密切联系．使得线粒体成为衰老和长寿机制研究的重要热点．本文就此作一综述.     

应用优化银染测序法鉴定HLA-DQA1*0102/*0102纯合子

聚合酶链式反应-序列特异引物（polymerase chain reaction-sequence specific primer,PCR-SSP）技术是目前临床上或科研工作中较为常用的基因分型方法,尤其在人类白细胞抗原（HLA）基因的分型中更是被广泛使用.然而,与其它分型方法一样,PCR-SSP亦无法回避所谓“空白基因”问题.如果在分型过程中出现过多的“空白基因”,势必影响某个等位基因频率的统计,进而影响到整个结果的可靠性.对于“空白基因”,目前多采用DNA序列测定加以确定到底是等位基因纯合子或存在新的突变,有的学者也结合使用PCR-单链构象多态性（PCR-SSCP）方法来进行确认.我们在用PCR-SSP为109名广西巴马县壮族长寿老人及71名对照组进行HLA-DQA1座位进行基因分型过程中,发现了33个HLA-DQA1^＊0102/-个体,经本实验室优化的DNA直接银染测序法进行序列测定,最终确定这些个体均为HLA-DQA1^＊0102/^＊0102等位基因纯合子.     

3种PCR产物纯化方法的比较

PCR产物中一般都含有过量的引物及核苷酸 ,这些成分将直接影响到后续的酶切、双脱氧 PCR测序反应等过程 ,因此有必要去除。目前核酸的纯化方法很多 ,但往往因需时较长或回收率太低而影响下一步的操作。近年来 ,商品化试剂盒的出现使得 DNA的纯化过程变为简便快捷 ,但因价格高昂而令多数实验室难以承受。本研究选择 3种具有代表性的常用方法对 HL A- DQA1基因第二外显子的 PCR产物进行纯化比较 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　材料 :基因组 DNA采用常规的酚 /氯仿法从广西巴马县壮族长寿老人的全血中提取。扩增 HL A- DQA1第二外…     

慢性荨麻疹患者甲状腺功能的研究

目的 探讨慢性荨麻疹与甲状腺功能的关系。方法 采用放射免疫法及ELISA对56例慢性荨麻疹患者及40例正常人对照组的甲状腺功能、甲状腺自身抗体及细胞因子进行检测。结果 56例患者中促甲状腺素(TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、抗甲状腺微粒体抗体(TM-Ab)异常的分别有8例、5例、7例,其水平均显著高于对照组(P均<0.05);白介素1(IL-1)、白介素8(IL-8),也显著高于对照组(P均<0.001),但两组的三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及γ三碘甲腺原氨酸(γ-T3)相比,差异无显著性。结论 慢性荨麻疹的甲状腺功能、甲状腺自身抗体及细胞因子异常,提示部分患者的发病可能与甲状腺功能有关。     

慢性荨麻疹患者血清细胞因子的临床研究

慢性荨麻疹是一种常见的皮肤粘膜过敏性疾病,病因复杂,发病机制尚不完全明了[1] ,近来有学者提出其发病与免疫机制有关[2 ] 。我们检测5 6例荨麻疹患者外周血部分细胞因子水平,以了解患者的TH 细胞功能。现报告如下。1　材料和方法1.1　病例选择　本院门诊病人,风团反复发作,病     

广西红水河流域长寿人群PPARD+294T/C基因多态性与血脂水平的相关性分析

目的 检测广西红水河流域长寿人群过氧化物酶体增殖激活物受体8(peroxisome proliferator-activated receptor delta,PPARD)+ 294T/C基因的多态性,并探讨其基因型与该地区血脂水平和长寿的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对505例广西红水河流域90岁以上壮族长寿老人(长寿组)、468例普通健康壮族老人(对照组)进行基因分型,并检测血压、体质量、身高、体质量指数、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)等指标.结果 研究人群中PPARD+ 294T/C 3种基因型(TT、CC、TC)频率在长寿组和对照组分别为51.70％、10.30％、38.00％和45.30％、11.10％、43.60％,等位基因频率分别为T 70.70％、C 29.30％和T 67.09％、C 32.91％.两组PPARD基因+294T/C位点的3种基因型及等位基因频率的分布无明显差异(P＞0.05);长寿组的TC、TG、LDL均高于对照组(P＜0.05).长寿组CC基因型携带者的LDL水平高于TC和TT基因型携带者而对照组中TT基因型携带者的TC、TG和LDL水平高于TC和CC携带者.结论 PPARD+ 294T/C的基因多态性与血脂水平有一定的关系,但可能不是广西红水河地区长寿的分子遗传学机制之一.     

广西黑衣壮族人群载脂蛋白B基因3''端高可变区等位基因多态性与血脂水平的关系

目的研究广西黑衣壮族人群载脂蛋白B基因3′端高可变区等位基因(variable number of tan-dem repeats region3′of apolipoprotein Bgene,3′APOB-VNTR)多态性及其与血脂水平的关系。方法采用整群抽样方法对548名黑衣壮族人群进行流行病学调查及测定血脂和载脂蛋白水平;用聚合酶链反应和琼脂糖凝胶电泳法检测3′APOB-VNTR等位基因及其基因型的分布频率;对黑衣壮最常见的等位基因进行测序验证。并将其结果与496名当地的汉族人群作比较。结果两组人群均可检出19种高可变区等位基因(hy-pervariable elements,HVE),分别为HVE24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62和64,但黑衣壮族人群未检出HVE56和58,汉族人群未发现HVE48和62。黑衣壮族人群以HVE32的频率最高(25.9%),而汉族人群则以HVE34最常见(27.2%)。黑衣壮族人群HVE26、30、46、杂合子和小等位基因(HVE<38,S)的频率明显高于汉族人群,而HVE34、38、40、纯合子和大等位基因(HVE≥38,L)的频率则明显低于汉族人群。黑衣壮族人群带VNTR-LS基因型者的总胆固醇、高密度脂蛋白-胆固醇和载脂蛋白B水平明显高于VNTR-LL者。黑衣壮族人群纯合子者总胆固醇、高密度脂蛋白-胆固醇和载脂蛋白B水平也明显高于杂合子者。两民族组VNTR-SS基因型者的血脂水平与VNTR-LS或VNTR-LL基因型者比较差异无统计学意义。结论本研究结果显示广西黑衣壮族人群3′APOB-VNTR多态性的分布与汉族人群之间存在差异,黑衣壮族人群3′APOB-VNTR多态性与血脂水平有关联。     

广西红水河流域长寿人群MTHFR C677T 基因多态性与血脂水平的相关性

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点的多态性与广西红水河流域长寿人群的血脂水平及长寿的关系.方法 应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对505例该流域90岁以上壮族长寿老人(长寿组)、普通健康壮族中老年人468例(非长寿组)进行基因分型,并检测血压、体质指数、血脂(TC、TG、HDL、LDL)等指标.结果 长寿组和对照组C、T等位基因频率分别为80.2％、19.8％和85.0％、15.0％;两组3种基因型(CC、CT、TT)频率分别为65.5％、29.3％、5.2％和73.9％、22.2％、3.8％;等位基因及基因型频率在两组间差异显著,且有T等位基因在长寿组女性中富集现象,而男性中无此趋势.在血脂水平上除HDL外,长寿组的TC、TG、LDL水平显著高于非长寿组(P＜0.01).进一步按MTHFR C677T基因型和性别分层后发现,长寿组中女性突变基因型(CT/TT)的TC、TG及LDL水平明显高于非突变基因型(CC);而男性各血脂水平分别在两组3种基因型间未发现有明显差异.结论 MTHFR基因C677T位点的多态性与血脂水平及长寿有一定的关系,并呈性别特异性,可能是红水河流域长寿现象的分子遗传学基础之一.     

广西壮族HLA-DRB1基因的多态性及其与主要周边民族的比较

目的通过比较壮族和主要周边民族HLA-DRB1座位的等位基因多态性，探讨壮族的起源、迁徙及其与周围民族的关系。方法应用PCR-序列特异引物(PCR-SSP)对广西壮族265名健康、无血缘关系、随机抽样的广西籍壮族成年人(17～32岁)进行HLA-DRB1等位基因分型并进行相应等位基因频率的比较。结果在所设计的23对引物中共检出13个HLA-DRB1等位基因，未检出的等位基因亦为13个。频率最高的等位基因依次是HLA-DRB1*1501、-DRB1*1601／2和-DRB1*1401／4．分别为0．291、0．198和0．106；HLA-DRB1*0701／2、-DRB1*08和-DRB1*1306／1406虽检出，但数量很少；壮族人HLA-DRB1座位等位基因总的分布格局与布依族最接近，其次是泰国东北部群体、中国南方汉族及新加坡华人，与北方汉族和越南河内京族则相差较远。另外，HLA-DRB1*1502等位基因的空白是壮族异于东南亚群体的特征性之一。结论极为相似的HLA-DRB1背景提示壮族和布依族之间密切的遗传学关系。