地塞米松影响结肠癌细胞对奥沙利铂与氟脲嘧啶化疗敏感性的实验研究*

目的:检测糖皮质激素受体在结肠癌组织及细胞株中的表达,探讨地塞米松共处理或预处理24h,结肠癌细胞株对奥沙利铂和氟脲嘧啶化疗敏感性的变化。方法:采用免疫组化检测糖皮质激素受体在61例结肠癌组织标本及4 种结肠癌细胞株中的表达;Hoechst33342 染色、流式细胞仪检测体外地塞米松对结肠癌细胞株的凋亡诱导作用;以MTT 法检测地塞米松共处理或预处理24h 后,结肠癌Lovo 细胞株对奥沙利铂和氟脲嘧啶化疗敏感性的变化。结果:在57.3% 的结肠癌组织标本中糖皮质激素受体呈阳性表达,在四种结肠癌细胞株中仅Lovo 和HCT-116表达糖皮质激素受体,HT- 29和SW- 480 细胞不表达。单独应用地塞米松后,对糖皮质激素受体阳性的Lovo 和HCT-116 细胞有较强的促凋亡作用,对不表达糖皮质激素受体的HT- 29和SW- 480 细胞作用则不明显。以1 ×10-4 mol/L的地塞米松处理Lovo 细胞24h,或与奥沙利铂共处理可使奥沙利铂的 IC 50从（13.7 ± 1.3）μ g/mL 降低至（5.9 ± 0.6）μ g/mL 和（4.8 ± 0.7）μ g/mL;同样处理可使氟脲嘧啶的IC 50从（72.2 ± 8.1）μ g/mL 降低至（21.1 ± 4.1）μ g/mL 和（18.6 ± 4.0）μ g/mL。结论:部分结肠癌组织及细胞株表达糖皮质激素受体。地塞米松体外作用能够促进糖皮质激素受体阳性的结肠癌细胞发生凋亡,与奥沙利铂和氟脲嘧啶预处理或共处理后可以增加结肠癌细胞的化疗敏感性。      

吉非替尼联合AG1024抑制结肠癌细胞生长的体外研究

目的:探讨抑制表皮生长因子受体(EGFR)、胰岛素样生长因子1型受体(IGFR-1)活性对不同结肠癌细胞下游信号通路的影响及其产生的细胞生长抑制效应.方法:选择对EGFR抑制剂吉非替尼敏感性不同的结肠癌细胞,给予IGFR-1酪氨酸激酶抑制荆AGl024和吉非替尼单独或联合作用,以蛋白质印迹法检测EGFR、IGFR-1β及其下游信号蛋白AKT、MAPK表达和活性,以MTT法检测细胞增殖率.结果:LOVO细胞(吉非替尼敏感型)在吉非替尼作用下AKT、MAPK活性被抑制,P＜0.05,而不论是否与AG1024联合;HT29细胞(吉非替尼中度敏感型)在吉非替尼和AG1024单独作用下AKT、MAPK活性均抑制不明显,而联合作用则其活性显著被抑制,P＜0.05;HCT116细胞在AG1024作用下AKT、MAPK活性被抑制,P＜0.05,而不论是否与吉非替尼联合.细胞增殖率显著降低见于吉非替尼作用下的LOVO细胞、吉非替尼联合AG1024作用下的HT29细胞以及AG1024作用下的HCT116细胞(P＜0.05).结论:吉非替尼联合AG1024可阻断下游信号通路的持续活化,在一定程度上可以改善结肠癌细胞对吉非替尼生长抑制作用的耐受.     

青蒿不同溶剂萃取粗提物对结肠癌HT-29、LoVo细胞NF-KB活性的影响

目的：通过比较不同溶剂萃取青蒿的粗提物对结肠癌HT-29和LoVo细胞的核因子KB（NF—KB）活性的影响，寻找青蒿中对结肠癌细胞NF-KB活性有作用的萃取相。方法：分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇对青蒿水煎液进行萃取，并将萃取得到的粗提物分别处理结肠癌Hn29细胞和LoVo细胞，提取核蛋白后采用凝胶阻滞分析（EMSA）方法对NF-KB活性进行测定。结果：青蒿水煎液氯仿萃取相对HT-29细胞和LoVo细胞的NF-KB活性表达均有明显的抑制作用（P〈0．05），其它各萃取相对两种细胞NF-KB活性的影响与对照组比较无明显差异。结论：在不同溶剂萃取青蒿水煎液中，氯仿萃取相粗提物对结肠癌HT-29细胞和LoVo细胞的NF-KB活性具有抑制作用。     

美罗培南在新生儿重症监护室严重感染中的应用

目的探讨美罗培南在新生儿重症监护室(NICU)治疗新生儿严重感染的疗效。方法对72例新生儿严重感染患儿采用常规治疗无效时应用美罗培南静脉治疗,50-60mg／(kg·d),2次/d,静脉滴注。临床疗效评价分为痊愈、显效、进步和无效。痊愈和显效作为有效统计。结果痊愈54例,显效6例,进步3例,无效9例。总有效率为83．3％。无不良反应发生。结论美罗培南适合用于NICU的新生儿严重感染的治疗。     

不同分离方法所得青蒿粗提物对结肠癌细胞活力的影响

目的:探讨采用不同分离方法所得青蒿粗提物应用后对结肠癌HT-29细胞活力的影响.方法:对青蒿水煎液分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取及AB-8大孔树酯吸附后用蒸馏水、30乙%醇、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇进行洗脱柱层析,将分离得到的粗提物分别处理结肠癌HT-29细胞,采用MTT法对细胞活力进行检测.结果:每相粗提物浓度在200μg/mL范围内时,细胞活力下降程度较缓慢.在400μg/mL及600 μg/mL应用后细胞活力与其他浓度比较均有明显降低(P<0.01).结论:不同溶剂萃取及大孔树酯柱层析分离青蒿水煎液所得粗提物,应用浓度在200μg/mL内对HT-29细胞生长的抑制作用不明显,浓度大于400 μg/mL后,细胞生长受到明显抑制.     

LDHA及LDHB对胃癌组织中免疫微环境的影响及临床意义

目的 探讨LDHA及LDHB在胃癌组织中的表达、预后意义及对免疫微环境的影响。方法 从HPA和TCGA数据库中筛选出375例胃癌患者的免疫组化染色图片、临床信息和转录组数据,分析LDHA及LDHB表达与胃癌临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析探究LDHA及LDHB表达与胃癌患者总生存期(overall survival, OS)及无瘤生存期(disease-free survival, DFS)的关系;采用生物信息学ssGSEA算法分析LDHA及LDHB对胃癌组织中免疫微环境的影响。结果 与癌旁正常组织相比,胃癌组织中LDHA及LDHB的mRNA及蛋白均明显上调(P均<0.05)。LDHA高表达胃癌患者比低表达患者具有更短的OS,LDHB高表达胃癌患者比低表达患者具有更短的DFS(HR=1.36、1.65,P均<0.05)。多因素Cox回归分析显示,LDHA及LDHB的表达可影响包括Th2细胞、NK细胞在内的多种免疫细胞的含量(P均<0.05)。LDHA及LDHB均是胃癌患者预后的独立影响因素(HR=1.31、1.55,P均<0.0...     

长链非编码RNA NR2F2-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:研究lncRNA NR2F2-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法:运用qRT-PCR法检测细胞中 NR2F2-AS1、miR-425-5p的mRNA表达情况;将pcDNA组（转染pcDNA）、pcDNA-NR2F2-AS1组（转染pcDNA-NR2F2-AS1）、sh-NR2F2-AS1组(转染sh-NR2F2-AS1)、sh-NC组(转染sh-NC)、anti-miR-NC组（转染anti-miR-NC）、anti-miR-425-5p组（转染anti-miR-425-5p）、pcDNA-NR2F2-AS1+miR-NC组（共转染pcDNA-NR2F2-AS1和miR-NC）、pcDNA-NR2F2-AS1+miR-425-5p组（共转染pcDNA-NR2F2-AS1和miR-425-5p mimics）转染至MGC-803、MKN-45细胞;MTT法检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果:与正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞MGC-803、MKN-45中NR2F2-AS1的表达显著降低,miR-425-5p的表达显著升高;过表达NR2F2-AS1、抑制miR-425-5p均可抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡;miR-425-5p可抑制野生型NR2F2-AS1的MGC-803、MKN-45细胞的荧光活性;过表达miR-425-5p可逆转过表达NR2F2-AS1对MGC-803、MKN-45细胞增殖和凋亡的作用。结论:lncRNA NR2F2-AS1可抑制胃癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与靶向miR-425-5p有关,将可为胃癌的治疗提供新靶点。     

头孢哌酮钠与硫酸依替米星存在配伍禁忌

临床输液过程中发现输完头孢哌酮钠 (以下称赛福必 )配置的药液后接输硫酸依替米星 (以下称爱大 )配置的药液时 ,输液管茂菲氏滴管中出现白色混浊 ,且有越来越多的白色沉淀沉积在输液管中。当调换输入药物顺序 ,即输完赛福必配置的药液后先输入少量生理盐水 ,再接输爱大配置的药液 ,就不会出现上述现象。此现象说明赛福必与爱大之间存在配伍禁忌。提示护士 ,随着新药在临床的不断应用 ,在联合用药时 ,若不了解配伍禁忌 ,应在两组液体之间换输其他液体 ,如生理盐水 ,以便将输液管内原药液冲净后再输下一组液体 ,避免两种药物直接作用而产生混…     

孟鲁司特钠联合丙酸氟替卡松治疗儿童咳嗽变异性哮喘的临床研究

目的探讨孟鲁司特钠联合丙酸氟替卡松对治疗儿童咳嗽变异性哮喘（CVA）的临床疗效及安全性。方法收集2013年2月至2015年1月于重庆医科大学附属儿童医院哮喘科门诊明确诊断的CVA患儿共240例,采用随机数字表法平均分为3组,分别予以口服孟鲁司特钠＋吸入丙酸氟替卡松（Mon＋Flu组）、单用吸入丙酸氟替卡松（Flu组）、单用口服孟鲁斯特钠（Mon组）。观察用药8、12周后3组患儿的咳嗽症状、肺功能变化及不良反应情况,并于治疗结束后24周随访患儿咳嗽症状的复发情况。结果①治疗8周后,Mon＋Flu组咳嗽评分（1．1±0．7）明显低于Flu组（1．7±0．8）、Mon组（1．6±0．8）（t值分别为4．973、4．353,均P〈0．05）,后两组比较差异无统计学意义（t=0．560,P〉0．05）;Mon＋Flu组第1秒钟用力呼气量（FEV,）占预计值的百分比（93．4±15．8）明显高于Flu组（87．4±11．0）和Mon组（86．5±9．8）（t值分别为2．804、3．315,P〈0．05）,最大呼气流速（PEF）占预计值的百分比（89．8±15．4）明显高于Flu组（84．9±13．4）和Mon组（85．1±12．3）（t值分别为2．126、2．124,P〈0．05）,后两组间FEV,％、PEF％比较差异无统计学意义（t值分别为0．525、0．082,P〉0．05）。②治疗12周后,3组患儿咳嗽评分、FEV,及PEF占预计值的百分比差异均无统计学（均P〉0．05）。③3组患儿治疗期间不良反应发生率差异无统计学意义（x。=1．026,P〉0．05）;④3组患儿复发率不全相同（x。=10．445,P〈0．05）,即Mon＋Flu组（3．85％）和Flu组（5．26％）随访期间复发率明显低于Mon组（17．33％）（X。=7．428、5．505,均P〈0．05）,而前两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论孟鲁司特钠联合丙酸氟替卡松治疗儿童咳嗽变异性哮喘8周时疗效优于单用,但在用药12周后联合用药不再具有优势。联合用药与单用丙酸氟替卡松复发率相当,均低于单用孟鲁司特钠。     

晚期大肠癌ERCC5基因启动子-763A〉G多态性与铂类药物疗效相关性的研究

目的：探讨ERCC5基因启动子区单核苷酸多态性与中国汉族晚期大肠癌奥沙利铂疗效的相关性。方法：收集以奥沙利铂为主化疗的105例晚期大肠癌患者化疗开始前静脉血,提取基因组DNA,应用PCR-LDR方法检测ERCC5基因3个SNP位点-1415C〉T（rs2094258）-7、63A〉G（rs2016073）及-413C〉T（rs943245）多态性,分析不同基因型与疾病控制率、无进展生存期（PFS）的相关性。结果：携带ERCC5-763GG-、763AG和-763AA基因型的患者化疗疾病控制率分别为86.7%、69.2%和52.6%,其中携带-763GG基因型的患者疾病控制率显著高于携带-763AA基因型的患者,P=0.028。携带-763AA基因型的患者中位PFS（36/95例,6个月）低于携带-763AG基因型（48/95例,8个月）及携带-763GG基因型（11/95例,10个月）的患者,差异有统计学意义,χ^2=9.205,P=0.002。-1415C〉T多态性与化疗疾病控制率和PFS之间均无显著相关性。-413C〉T位点未发现遗传多态。结论：ERCC5启动子区-763A〉G单核苷酸多态性与晚期大肠癌奥沙利铂临床疗效相关。