颈淋巴结靶向葫芦素BE聚乳酸纳米微粒的急性毒性和局部刺激实验研究

目的:观察颈淋巴结靶向性葫芦素BE聚乳酸纳米微粒(CuBE-PLA-NP)冻干针剂的急性毒性作用和对局部组织的刺激反应,为动物实验和临床实验提供依据。方法:用不同剂量的CuBE-PLA-NP冻干针剂和葫芦素BE(CuBE) 行小鼠皮下和尾静脉注射,观察小鼠用药后的毒副反应,并计算半数致死量(LD50);用CuBE-PLA-NP冻干针剂和 CuBE行兔股四头肌注射,观察药物对局部组织的刺激性。结果:CuBE-PLA-NP冻干针剂皮下和静脉注射的LD50值分别为16.74 mg/kg±1.83 mg/kg和5.60 mg/kg±0.83 mg/kg,CuBE皮下和静脉注射的LD50值分别为8.63 mg/kg±1.00 mg/kg和2.50 mg/kg±0.30 mg/kg。CuBE-PLA-NP冻干针剂局部肌肉注射的反应数均为0级,CuBE的反应数为 0~1级。结论:CuBE-PLA-NP冻干针剂对机体的毒副作用和局部刺激性小于CuBE,CuBE-PLA-NP和CuBE都可用作局部注射。     

口腔癌血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的初步观察

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)与口腔癌癌灶微血管密度改变的关系及其在口腔癌发生发展中的作用。方法:化学研究选择抗VEGF单克隆抗体及抗CD34单克隆抗体为第一抗体,对60例口腔癌组织切片标本行免疫组织化学研究。VEGF及CD34的免疫组化方法采用S-P组化染色法。结果:在60例口腔癌中Ñ、Ò、Ó、Ô期 VEGF阳性表达率无显著性差异。颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组的VEGF表达,经统计学分析有显著性差异。Ô期病例的微血管密度(IMVD)与Ñ、Ò期病例有显著性差异。随着IMVD的提高,其VEGF阳性级别也随之升高,IMVDÑ级与IMVDÔ级的VEGF阳性表达程度有显著性差异(P<0105)。结论:口腔癌中血管内皮细胞生长因子的改变是导致口腔癌癌灶内微血管密度改变的原因之一。     

nm23—h1基因导入对腺样囊性癌分化的影响

目的 探讨nm23h1基因对腺样囊性癌细胞分化的影响。方法 体外用了子脂质体介导nm23－h1质粒转染人口腔涎腺样囊性癌（ACC）细胞株,筛选出转染阳性细胞克隆,并植入4只裸鼠颌面部,3w后获取标本,石蜡包埋后进行常规组织学及免疫组织化学检查,实验以未转染的阴性细胞克隆植入4只裸鼠作对照。结果 nm23－h1阳性ACC植入裸鼠体内后肿瘤细胞有向原代细胞回归的倾向,即由实体型向筛状型或管状型转变,肿瘤细胞周围的肿瘤间质增多,巢状的肿瘤细胞外围有基底膜样结构;肿瘤细胞在体内增殖的过程中,表达nm23－h1的细胞数量有逐渐减少、表达强度减弱的趋势。结论 以nm23-h1为靶基因的治疗同时具有抑制转移和促进分化的作用,具有较大的研究价值和临床应用前景。     

口腔恶性肿瘤的二次放疗

目的对无手术条件的口腔恶性肿瘤患者应用大剂量二次放疗作回顾性分析,并对治疗效果和应用前景进行评估.方法对118例无手术条件但未发生转移,已经过首次放疗的口腔恶性肿瘤患者进行第二次照射.采用单纯放疗患者18例,2GY×30天;放化疗结合76例,2GY×30天;24例化疗与分次放疗结合,2×1.5GY×20天.结果采用大剂量二次放疗患者生存率明显高于单独化疗者.放疗晚期并发症包括颈部瘢痕36%,粘膜坏死19%,放射性骨坏死18%,张口受限14%.二次放疗的体积是与死亡危险度相关的唯一因素,相关度为1.75.结论对没有手术指征的口腔恶性肿瘤患者采用大剂量放疗与化疗手段相结合是可行的.虽然后期并发症的发病率和严重程度与第一次放疗相比明显增加,但平均存活时间较单独化疗病人长.     

新鲜自体骨移植界面愈合过程中钙，磷，硫元素含量的动态分析研究

目的：通过在日本大耳白兔下颌骨体形成的人工缺损中进行新鲜处体骨移植,研究移植骨－－宿主骨皮质界面骨性愈合过程中钙,磷,硫三种元素的浓度变化,以揭示移植界面愈合的基本规律。方法 利用X射线能量衍射微区分析法,改进的断面冷冻抛光和峰背比计量技术,进行移植界面三种元素24周动态定量检测,结果 移植界面钙,磷含量在术后2－3周时明显低于正常对照（P＜0．01）,但随后逐渐增加,而同期硫含量则显著高于正常水平,其后迅速下降,在5周时,界面骨质中的钙,硫,硫元素含量已接近正常状态（P＞0．05）,但各微区数值差异较大;8－12周后,界面骨质钙,磷元素均匀分布,元素含量变化趋于稳定。结论 骨移植初期,界面骨质有明显的吸收过程,在移植5周时,移植骨与宿主骨界面就可形成较高钙化程度的骨性连接,但矿化不尽完善;随后通过不断的应力改建,在移植8－12周后,可望形成矿化程度更高的稳定界面结合。钙,磷元素含量在移植界面愈合中的变化高度相关,其动态变化基本可反映出骨移植界面全中的基本进程。     

颈神经丛深支对斜方肌运动功能的影响

目的　探讨颈神经丛深支在斜方肌运动功能中的作用。方法　采用电生理方法 ,测定切断副神经后的不同时期 ,刺激颈神经丛深支在大鼠斜方肌得到的肌电大小 ,并作统计学分析。结果　保留颈神经丛深支 ,术后不同时期 ,在大鼠斜方肌上均能测到肌电且肌电值差异有显著性。结论　颈神经丛深支是支配斜方肌的另一运动神经来源 ,根治性颈清扫术中对该神经的保护能有效地预防肩综合征的发生。     

血管内皮生长因子-C表达载体的构建和原核表达

目的　探讨从人舌癌组织中克隆到的血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor,VEGF-C) 片段cDNA表达载体在原核细胞中的功能表达,为进一步研究VEGF-C在口腔鳞癌中表达的意义及与淋巴转移的关系打下基础。方法　以RT-PCR法从舌鳞癌组织中克隆的VEGF-C基因功能片段cDNA与表达载体pBK-CMV构建表达质粒,转化并诱导其在大肠杆菌中的表达,并通过SDS-PAGE及Western-blotting进行检测。结果　从人舌癌组织总RNA中克隆到约1·1 kb大小的VEGF-C基因cDNA,与Genbank公布的人VEGF-C基因cDNA序列有99·6% 同源性,以之构建出的重组质粒pBK-VEGF-C转染大肠杆菌经IPTG诱导后,检测到稳定表达的相对分子质量约 56 000的融合蛋白,该融合蛋白与VEGF-C多抗具有强阳性免疫印迹反应。结论　证实克隆得到VEGF-C基因功能片段cDNA可在原核细胞中成功表达,为进一步研究VEGF-C在口腔癌颈淋巴结转移中的功能效应提供了物质基础。     

隐形顺铂聚乳酸纳米微粒对口腔鳞癌原发灶的靶向性研究

目的　研究隐形顺铂聚乳酸纳米微粒(CDDP-PLA-PEG-NP)的物理特性及对口腔鳞癌原发灶的靶向性。方 法　用乳化溶剂蒸发法制备CDDP-PLA-PEG-NP;建立地鼠口腔颊鳞癌模型,并随机将64只动物分为实验组和对照 组,每组各32只。实验组和对照组分别静脉注射CDDP-PLA-PEG-NP(6·6 mg/kg)和CDDP(1 mg/kg),每组于给药后 0·083、0·5、1、2、4、6、12、24 h各处死4只动物。用高效液相色谱仪测定两组各时间点血浆和癌组织中药物浓度,求 出CDDP-PLA-PEG-NP对口腔鳞癌原发灶的靶向指数、选择性指数和口腔鳞癌原发灶对CDDP-PLA-PEG-NP的相对摄 取率。结果　CDDP-PLA-PEG-NP的平均粒径为(143·2±1·8)nm,粒径分布范围为103·5 ~175·8 nm,载药量和包封 率分别为(15·2±0·9)%、(89.0±0·8)%;在8个时间点的靶向指数和选择性指数均远大于1,口腔癌组织对CDDP- PLA-PEG-NP的摄取量是CDDP的10·36倍。结论　CDDP-PLA-PEG-NP在动物体内对口腔鳞癌原发灶具有良好的靶 向性,是具有发展前途的口腔癌纳米靶向给药系统。     

口腔癌根治性颈淋巴清扫术的合理术式

转移是恶性肿瘤最基本的生物学特性之一。淋巴道转移是上皮源性恶性肿瘤最常见、最重要的转移播散途径之一。口腔癌是头颈部常见的恶性肿瘤,约90％以上为上皮源性癌肿,具有较高的区域性淋巴结转移率。根据国内大宗病例的分析报道,我国颊癌和舌癌在口腔癌构成比中一直位居前位,其颈部区域性淋巴结的转移率分别高达39．9％和38．07％,     

组织工程化口腔黏膜载体材料聚乳酸羟基乙酸膜的制作及物理特性

目的 制作组织工程化口腔黏膜载体材料,研究其物理特性。方法 不同比例的聚乳酸(PLA)和聚乙醇酸(PLG)按常规成膜技术制备聚乳酸羟基乙酸(PLGA)。测定其孔隙率,倒置相差显微镜和电子扫描显微镜(SEM)观察其物理特性。结果 PIGAⅠ、Ⅱ、Ⅲ为平滑透明膜,孔隙率10.56％、18.24％、8.64％,SEM观察呈现数目不等微孔和纤维交织样结构;PIGAⅠV及改性膜不透明,较脆,孔隙率为56.39％左右,SEM观察为泡孔网海绵状。结论 PLGA Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ具较好的透明度及孔隙率,可被用作组织工程化口腔黏膜载体材料。