c-kit蛋白在恶性黑素瘤中的表达

目的　探讨c kit蛋白在人恶性黑素瘤中的表达及临床意义 ,分析它和临床病理参数的关系。方法　采用免疫组化S P法检测 44例原发性皮肤恶性黑素瘤、9例转移性恶性黑素瘤及 2 0例良性痣中c kit蛋白的表达。结果　3 4例原发性皮肤恶性黑素瘤、4例转移性恶性黑素瘤、5例良性痣表达c kit蛋白 ,阳性率分别为 77.3 %、44 .4%、2 5 .0 % ,前者的阳性表达率显著高于后两者 (P均 <0 .0 5 ) ;原发性皮肤恶性黑素瘤中浅表扩散性恶性黑素瘤 (SSM )的c kit蛋白阳性表达率显著高于其它类型 (P均 <0 .0 1) ;c kit蛋白的表达与年龄 性别 发病部位 是否淋巴结转移等临床病理因素均无关 (P均 >0 .0 5 )。结论　c kit蛋白的表达可能与人恶性黑素瘤的发生发展有关 ,其有望成为治疗黑素瘤的有效靶向分子之一     

MIA基因-RNAi对人黑素瘤A375细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375MIA基因表达后,对A375细胞增殖的影响。方法构建针对人黑素瘤A375细胞(MIA)基因3个不同靶序列的RNAi真核表达载体pLTE-hMIA-RNAi,用磷酸钙细胞转染法把构建的载体分别转染HEK293细胞,采用Western技术和RT-PCR技术分别检测MIA基因蛋白的表达和mRNA水平。选择对MIA基因表达抑制作用最强的RNAi载体转染A375细胞后,用细胞计数检测细胞增殖的变化。结果构建的3个RNAi质粒和对照组相比,pLTE-hMIA-RNAi352质粒对MIA的表达减少量>80%,hMIA的mRNA水平下降约83%,与对照组比较差异有显著性意义。而pLTE-hMIA-RNAi203、pLTE-hMIA-RNAi343质粒对MIA的表达及mRNA水平的影响,与对照组比较差异无显著性意义。转染pLTE-hMIA-RNAi352质粒的A375细胞增殖能力较对照组显著下降。结论构建的针对人MIA基因352位靶序列的RNAi质粒pLTE-hMIA-RNAi352可显著抑制MIA的表达及A375细胞增殖。     

不同病程尖锐湿疣患者血清γ干扰素、白介素-2水平的研究

目的 :研究不同病程尖锐湿疣 (CA)患者血清γ干扰素 (IFN -γ)、白介素 - 2 (IL - 2 )水平的变化在CA免疫发病机制中的作用。方法 :采用双抗体夹心ELISA法 ,检测了 6 0例不同病程CA患者血清IFN -γ、IL - 2水平。结果 :CA患者组血清IFN -γ、IL - 2水平明显低于健康对照组 (P <0 0 1) ,而CA长病程组血清IFN -γ、IL- 2水平明显低于CA短病程组 (P <0 0 1)。结论 :CA患者有TH1型细胞因子 (如 :IFN -γ、IL - 2 )表达低下 ,长病程患者更明显 ,患者TH1型细胞因子表达低下在CA的免疫发病机制中可能起重要作用。     

白细胞介素-23与相关皮肤病

白细胞介素-23(IL-23)是新近发现的一种主要来源于活化的树突状细胞和巨噬细胞的细胞因子。它具有多种生物学功能,广泛参与体内免疫过程,与多种皮肤病相关。本文就IL-23的生物学特性及与相关皮肤病的关系作一简要综述。     

皮肤肿瘤及正常皮肤组织中端粒酶活性的表达

目的 检测皮肤肿瘤及正常皮肤组织中端粒酶活性的表达。方法 采用端粒重复扩增TRAP及PCR方法，检测28例皮肤肿瘤(包括良性、癌前病变及恶性肿瘤)及15例正常皮肤组织中端粒酶活性。结果 15例正常皮肤中端粒酶表达仅为13．3％。28例皮肤肿瘤中有端粒酶表达的为82．1％，其中恶性肿瘤的端粒酶活性明显高于良性、癌前病变者。结论 端粒酶可能是皮肤肿瘤癌变中的一个早期事件，与皮肤癌变的发生发展过程有一定关系，可以反映组织的增生程度。     

不同病程尖锐湿疣IFN—γ、lL—2及lL—4水平的研究

目的 研究不同病程尖锐湿疣(CA)患者血清γ干扰素(IFN—γ)、白细胞介素-2(IL-2)及白细胞介素-4(IL-4)水平的变化在CA免疫发病机制中的作用。方法 采用双抗体夹心ELISA法，检测了60例不同病程CA患者血清IFN—γ、IL-2及IL-4水平。结果 CA患者组血清IFN—γ、IL-2水平明显低于健康对照组(P＜0．01)，而CA长病程组血清IFN—γ、IL-2水平明显低于CA短病程组(P＜0．01)；CA患者组血清IL-4水平明显高于健康对照组(P＜0．01)，而CA长病程组血清IL-4水平明显高于CA短病程组(P＜0．01)。结论 CA患者有Thl型细胞因子表达低下和Th2型细胞因子表达亢进，长病程患者更明显，患者Thl型细胞因子表达低下和Th2型细胞因子表达亢进在CA的免疫发病机制中可能起重要作用。     

TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白在恶性黑素瘤细胞系中的表达

目的 探讨pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP转入恶性黑素瘤细胞株后TAP表达的变化,观察TAP在A375中表达后的业细胞定位.方法 在恶性黑素瘤细胞株A375中转入pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP,G418筛选稳定转染细胞株,检测转染后TAP1和TAP2表达水平的变化.将pDsRed2-ER和pTAP1-EGFP或pTAP2-EGFP共转染入A375细胞内,激光共聚焦显微镜下观察TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白的亚细胞定位.流式细胞仪检测转染前后细胞表面HIA-Ⅰ的表达.结果 将pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP转染A375细胞株后筛选出稳定克隆.转染pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP后能明显增加A375细胞TAP1和TAP2在蛋白水平的表达,并能增加细胞表面HLA-Ⅰ的表达.共转染pDsRed2-ER和pTAP1-EGFP或pTAP2-EGFP后,在激光共聚焦显微镜下观察,发现TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白的绿色荧光能够与pDsRed2-ER的红色荧光重叠.结论 构建的pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP质粒在A375细胞系中表达成为TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白后,能准确定位在内质网上,为研究TAP诱导的后续免疫效应提供基础.     

尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞凋亡调控蛋白的表达和血清中白细胞介素2水平的研究

为研究尖锐湿疣（CA）患者外周血淋巴细胞（PBLC）凋亡调控蛋白表达水平和血清中白介素2（IL－2）水平在CA免疫发病机制中的作用。采用流式细胞仪及间接免疫荧光素标记法和ELISA法，检测了60例不同病程CA患者PBLC凋亡调控蛋白Fas/Fas-L的表达水平和血清中IL－2水平。发现CA短病程组PBLC的Fas、Fas-L表达水平均明显高于健康对照组（P＜0.05)，而CA长病程组PBLC的Fas、Fas-L表达水平明显高于CA短病程组（P＜0.05)和健康对照组（P＜0.01)，短、长病程组CA患者血清IL－2的水平明显低于健康对照组（P＜0.01)，CA患者PBLC Fas/Fas-L表达水平与血清中IL－2的水平呈负相关（P＜0.01)。结果表明：CA患者PBLC有凋亡异常，并且与血清中IL－2的水平呈负相关，患者PBLC凋亡异常在CA的病程中可能起重要作用。     

尖锐湿疣患者PBLC Fas、Bcl-2的表达与血清IFN-γ、IL-4的相关性研究

目的　研究尖锐湿疣 (CA)患者外周血淋巴细胞 (PBLC)凋亡调控蛋白表达和血清IFN γ、IL 4水平的相关性。方法　采用流式细胞仪的间接免疫荧光素标记法和双抗体夹心ELISA法 ,分别检测了 60例CA患者PBLC凋亡调控蛋白Fas、Bcl 2的表达水平和血清IFN γ、IL 4水平。结果　CA患者PBLC的Fas表达水平明显高于健康对照组 ,Bcl 2则明显低于健康对照组 (P均 <0 .0 1) ;CA患者血清IFN γ水平明显低于健康对照组 ,IL 4水平明显高于健康对照组 (P均 <0 .0 1) ;CA患者PBLCFas表达水平与血清IFN γ水平呈负相关 ,而与血清IL 4水平呈正相关 ;Bcl 2表达水平与血清IFN γ水平呈正相关 ,而与血清IL 4水平呈负相关。相关系数经t检验差异均有极显著性 (P <0 .0 1)。结论　CA患者PBLC有凋亡异常 ,凋亡异常与TH1型细胞因子分泌低下及TH2 型细胞因子分泌增加之间有一定的相关性 ,在CA的免疫发病机制中可能起重要作用。     

127例老年疣患者皮损中人类乳头瘤病毒DNA的检测

老年疣又称脂溢性角化病或基底细胞乳头瘤, 是老年人最常见的良性表皮增生性肿瘤,多见于躯干和面部.由于病理检查中容易将几种老年疣与寻常疣等人类乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）感染疾病混淆,我们采用PCR技术对老年疣皮损进行了病理检查和HPV的检测,以探讨老年疣与HPV感染的关系.