赖型钩体pCX7探针Southern杂交分析不同血清群型钩体DNA

用赖型０１７株钩体ＤＮＡ基因库中筛选出的重组克隆ｐＣＸ７制备重组质粒，再以￣（３２）Ｐ标记为探针，对１１个血清群的１８株问号钩体、双曲钩体ＰａｔｏｃＩ株和细螺旋体ｉｌｌｉｎｉ３０５５株ＤＮＡＳｏｕｔｈ－ｅｒｎ杂交。放射自显影结果显示：双曲钩体ＰａｔｏｃＩ株和细螺旋体ｉｌｌｉｎｉ３０５５株ＤＮＡ未获杂交阳性区带；ｊａｖａｎｉｃａ（爪哇）、ｍａｎｈａｏ２（曼耗２）和ｒａｎａｒｕｍ（蛙）三个低毒力血清型的问号状钩体ＤＮＡ亦为阴性；１５株问号状钩体ＤＮＡ均出现了杂交信号，而且不同群型钩体ＤＮＡ杂交带型明显不同，赖型钩体０１７株（强毒株）与６０１株（弱毒株）杂交带型也有细微差别。作者认为，以ｐＣＸ７探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交可望作为钩体分类和鉴定的工具或参考。     

半乳糖凝集素3 在膀胱癌组织中表达和临床意义及其对T24 细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的：探讨半乳糖凝集素3（galectin-3）在膀胱癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系及其对膀胱癌T24 细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法：收集2014 年5 月至2016 年6 月在川北医学院附属医院收治的、经病理切片确诊的104 例膀胱癌患者的癌和癌旁组织标本,用免疫组织化学法检测膀胱癌和癌旁组织中半乳糖凝集素3 蛋白的表达,分析其表达与患者临床病理特征的相关性。将siRNA-Gal3、siRNA-Control 分别转染至T24 细胞,用Weatern blotting 检测细胞的半乳糖凝集素3 蛋白表达水平,MTT法检测细胞的增殖,Transwell 实验检测细胞的侵袭,流式细胞术检测细胞的凋亡。结果：膀胱癌组织中半乳糖凝集素3 阳性表达率显著高于癌旁组织（73.1% vs 9.6%,P<0.05）,膀胱癌组织中半乳糖凝集素3 的表达与组织学分级、肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和TNM分期均有关（均P<0.05）,与性别和年龄无关（P>0.05）。siRNA-Gal3 显著下调半乳糖凝集素3 蛋白的表达水平（P<0.05）,干扰半乳糖凝集素3 表达后：T24 细胞的增殖能力和侵袭能力均明显降低（均P<0.05）;细胞的凋亡率明显增加（P<0.05）。结论：半乳糖凝集素3 在膀胱癌组织中呈高表达,并与膀胱癌患者临床病理特征存在密切关系。干扰半乳糖凝集素3 蛋白的表达可抑制膀胱癌T24 细胞的增殖与侵袭,促进细胞的凋亡。     

问号钩体(狭义)种特异探针重组质粒pCX7插入片段核苷酸序列分析

为了建立敏感和特异的鉴别致病性钩体菌株的方法，用ＡＢＩ自动测序仪对问号钩体（Ｌ．ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓｓｅｎｓｕｓｔｒｉｃｔｏ）种特异探针ＤＮＡ重组质粒ｐＣＸ７，１．７ｋｂＰｓｔⅠ部分插入片段进行了核苷酸序列测定。结果：该部分插入片段ｂｐ总数为１～５０１ｂｐ，其中可读框（ＯＲＦ）１个，序列为８７～３９３，共３０６ｂｐ。ＯＲＦ除去一些核苷酸不能确定外（图中以Ｎ表示），绝大多数在一个ＯＲＦ。计算机检索有关同源序列１８个，较高序列类似性５个，均在４１％以下。经查ＥＭＢＬＤＮＡ序列数据库未见类似序列。由此提示，以ｐＣＸ７作为探针可用于钩体菌株鉴定。     

“胃屏复”对大鼠应激性胃黏膜损伤保护作用的形态观察

目的 以透明质酸为基质，研制对胃黏膜屏障更具保护作用的新制剂，探索透明质酸对黏膜的保护作用，拓展透明质酸新的应用范围。方法 复制大鼠应激性胃黏膜急性出血性糜烂损伤的动物模型，制定胃黏膜损伤程度分级标准和研究制剂有效性判定标准。实验前对实验组动物灌饲研究制剂3ml，对照组以等量生理盐水灌胃。同时设立模型对照组验证模型。24h后处死动物观察胃黏膜外观形态变化；切片观察胃黏膜病理组织学改变。结果 实验组胃黏膜外观良好，未见明显黏膜糜烂和出血灶；对照组则可见散在出血点和黏膜完整性的破坏；模型对照组出现全胃广泛出血，黏膜表面覆盖大量凝血块。实验组有效率为90％；对照组有效率为22％。统计学检验，P〈0．05。结论 实验结果显示“胃屏复”对应激性胃黏膜损伤具有明显的保护作用。由此表明，透明质酸可替代胃黏膜屏障的糖蛋白基质而具有重要的应用开发价值。     

腹腔注射银杏达莫对糖尿病大鼠氧化应激及肾作用的研究

目的：研究银杏达莫对糖尿病大鼠肾功能的影响,并从抗氧化应激反应的角度探讨其可能的作用机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为正常组（10只）,糖尿病模型组（20只）及糖尿病模型加银杏达莫组（20只）。采用单次腹腔注射链脲佐菌素（55mg／kg）诱导糖尿病肾病（DN）大鼠模型,腹腔注射银杏达莫水溶液。生化法测定血糖,血、尿肌酐及尿白蛋白;尾静脉取血ELISA法检测血清血管内皮先长因子（VEGF）水平;肾脏匀浆后测肾脏丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的含量。结果：糖尿病模型组和银杏达莫组生化指标均高于正常组（P〈O．05）,银杏达莫组MDA、NO及VEGF的表达减少与模型组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：银杏达莫具有减轻糖尿病大鼠蛋白尿,提高尿肌酐排泄,减轻肾脏损害的作用,其机制可能与提高肾脏抗氧化系统功能有关。