毛细管区带电泳法拆分氨甲蝶呤手性对映体

目的建立一种快速拆分氨甲蝶呤手性对映体的方法。方法用毛细管区带电泳技术，以中性环糊精作为氨甲蝶呤拆分选择剂，对环糊精浓度、缓冲液浓度、pH值、电泳温度和改性剂浓度等分离条件进行优化。结果用含25mmol／L的羟丙基-8-环糊精、10％的异丙醇、80mmol／L(pH7．4)的磷酸盐缓冲液，在18kV分离电压，毛细管温度25℃时，可使氨甲蝶呤对映体在25min内达到基线分离，分离度为1．51。结论高效毛细管区带电泳法拆分氨甲蝶呤手性对映体简单、快速、经济。     

双表型急性白血病的免疫分型

双表型急性白血病(biphenotypic acute leukemi-a,BAL)指急性白血病(acute leukemia,AL)中髓系和淋巴系均受累的一个亚型。常分为双表型、双系列、双克隆型,其中双表型、双系列较为常见。双表型指同一白血病细胞群同时表达髓系和淋巴系标记,双系列指存在两种或两种以上的细胞亚     

异质性胞核核糖核蛋白A2/B1与肺癌的早期诊断

198 8年 ,Tockman[3 ] 等对肺癌高危人群痰标本进行免疫染色研究时发现 ,绝大多数肺癌早期患者和癌前病变患者痰标本呈IgG70 3D4抗原阳性 ,研究后发现该抗原为异质性胞核核糖核蛋白 (hnRNP)A2 /B1,这为肺癌早期诊断带来了一道曙光。1　hnRNPA2 /B1的概述异质性胞核核糖核蛋白 (     

氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株的建立及其生物学特征

 目的 诱导并建立耐氨甲蝶呤对映体的A549细胞株并观察耐药细胞系（L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549）的生物学特性。 方法 以MTX对映体为诱导剂,采用浓度递增结合低剂量持续诱导方法诱导A549细胞株,建立MTX不同对映体耐药细胞系;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法绘制细胞生长曲线;MTT法检测耐药细胞株的耐药指数;流式细胞仪检测细胞周期和细胞的分裂增殖能力。 结果 L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为6.0的和20.2。倒置相差显微镜观察细胞形态发生了改变;细胞生长曲线显示D-(-)-MTX/A549的增殖略慢于亲本细胞,而L-(+)-MTX/A549的增殖最慢;流式细胞仪检测细胞周期结果显示L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药细胞株S期细胞数量减少(P<0.05),G₀/G₁期细胞增多(P<0.05);CFSE检测A549、L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549的MFI分别为(6.08±0.55)、(7.72±0.30)、(6.90±0.18)。两对映体细胞株间有明显手性差异。 结论 本研究建立了MTX两种对映体耐药细胞株,为进一步研究其耐药机制提供了一种实验模型。     

液基薄层细胞学技术筛查宫颈癌研究进展

传统巴氏染色为女性宫颈癌筛查提供了一种廉价、方便的方法,但存在敏感性低,即大量假阴性病例的报道.应用液基薄层细胞学技术筛查宫颈癌已广泛用于临床,获得了较为满意的临床效果.因此大多数学者推荐液基薄层细胞学技术替代巴氏涂片筛选宫颈癌,尤其是液基薄层细胞学技术联合人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)检测,可达到宫颈癌筛查的理想效果.     

中国临床实验室标本可接受性质量指标室间质量调查研究

目的分析中国临床实验室标本可接受性质量指标(QI)的现状并制定初步质量规范。方法使用基于Web的室间质量评价软件,收集从2015年~2017年(截至6月15日)参加"临床检验专业医疗质量控制指标"室间质评的实验室数据,包括2015年1次,2016年2次和2017年1次的标本类型错误率、标本容器错误率、标本采集量错误率和抗凝标本凝集率。用率和西格玛两种方式度量评价。采用各指标总体分布的P25和P75制定初步的高、中等和低性能规范。结果分别有5 346,7 593,5 950和6 874家实验室回报了有效数据。生化(除标本采集量错误率外)、免疫和微生物专业4项指标的P50达到6σ水平。临检专业除标本容器错误率外,其它指标的P50为4σ~6σ水平不等。连续3年的QI数据没有明显变化。以2017年第一次结果为依据制定初步质量规范,标本类型错误率的P25为0,P75为0.084 4%;标本容器错误率的P25为0,P75为0.047 6%;标本采集量错误率的P25为0,P75为0.114 2%;抗凝标本凝集率的P25为0,P75为0.0784%。结论大部分实验室生化、免疫和微生物4项指标表现良好,临检专业有待加强。实验室应加强信息系统建设,保证采集数据真实可靠,从而长期纵向监控实现质量改进。     

毛细管电泳-激光诱导荧光检测大鼠脑组织多巴胺含量

目的: 采用毛细管电泳-激光诱导荧光法建立检测大鼠脑组织多巴胺含量的方法。方法: 低温匀浆大鼠脑组织离心后,取上清用pH11.010mmol/L硼砂缓冲液,在室温下衍生反应10h连接上FITC荧光基团;毛细管电泳分离条件为pH10.3100mmol/L硼酸-Tris缓冲液。结果: 在选定的实验条件下,方法检测限(S/N=3)达2.1nmol/L水平,批内相对标准差(RSD)为3.4%,回收率达96.05%,在10-8~10-10mol/L范围内呈良好线性关系。结论: 应用毛细管电泳-激光诱导荧光法可检测鼠脑组织多巴胺含量。     

检测HBV YMDD变异的方法学进展

乙型病毒性肝炎是世界上最常见的感染性疾病之一。我国是慢性乙型肝炎的高发区,拉米夫定是目前普遍使用的治疗慢性乙型肝炎的核苷类似药物。但长期使用该药易引起HBV基因组突变而使HBV产生耐药性,降低疗效。酪氨酸-甲硫氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）功能区变异是HBV拉米夫定耐药的主要原因。临床上很有必要在拉米夫定治疗过程中对患者的HBV进行监测,现综述近年来YMDD变异检测的有关研究。     

非涂渍毛细管无胶筛分电泳诊断Y染色体AZF区域微缺失

目的建立一种快速毛细管电泳检测Y染色体AZF区域微缺失诊断男性不育症的方法。方法利用聚乙烯吡咯烷酮（PVP）作为筛分介质及其兼有的“动态”涂渍作用，采用毛细管非涂渍无胶筛分电泳与多重聚合酶链反应（PCR）相结合技术，配以高灵敏度的激光诱导荧光检测器，对Y染色体AZF（azoospermia factor）区域微缺失病人15个序列标签位点进行直接基因诊断。结果检测38例严重少精或无精症患者，发现10例存在缺失，缺失率为26．3％。对15例已婚有子女的正常人进行了对照检测，其中缺失率为0％，经，检验P〈0．01，提示严重少精和无精与正常对照组的AZF区域微缺失率差异有统计学意义，明显高于正常对照组。同时，对AZF四个亚区STS微缺失率进行比较，分别将10例AZF微缺失群体中确定AZFc区的缺失率与另三个区域的缺失率进行分别统计分析，发现AZFc占63．4％，AZFa占4．0％，AZFb占15．2％，AZFd占17．4％,X^2检验P〈0．05，提示AZFc区的缺失率与另三个区域差异有统计学意义，AZFc区缺失率明显高于AZFa、AZFb及AZFd区。结论毛细管非涂渍无胶筛分电泳与传统的凝胶琼脂糖电泳相比，本方法在分离速度、分辨率及实验成本方面均有较大改善，其与多重PCR相结合使对严重少精和无精症的诊断更加准确、可靠。     

低密度脂蛋白研究进展

近年来 ,血脂增高、动脉粥样硬化 ( AS)、冠心病 ( CHD)的发病率明显上升 ,已成为危害城镇居民健康的重要原因。血脂的临床和实验室研究成为热点。血脂是一个总称 ,包括血浆中的甘油三酯( TG)、磷脂 ( PL)、游离胆固醇 ( Fc)和胆固醇酯( CE)。这些不溶于水的脂类在血浆中与水溶性的蛋白质 (载脂蛋白 )相结合而运输 ,形成血浆脂蛋白系统。应用密度梯度超速离心法 ,人们将血浆脂蛋白分离为乳糜微粒 ( CM)、极低密度脂蛋白( VLDL)、低密度脂蛋白 ( LDL)和高密度脂蛋白( HDL)。大量的临床研究和一、二级预防试验显示降低血清总胆固醇 …