FQ—PCR检测HPV基因型的临床应用分析

目的了解人乳头瘤病毒感染患者HPV6,11型和HPV16,18型的分布。探讨HPV—DNA分型检测的临床应用价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法检测1567例HPV感染者疣体组织或分泌物中的HPV6,11型和HPV16,18型。结果男女性均可感染HPV6,11和HPV16,18型,男性感染者以HPV6,11型为主,感染率为27．68％（157／567）。女性1000人次中,确诊感染HPV有659人,HPV阳性320人次,检出率为32％,其中低危型208例,即HPV6,11型阳性率为31．56％;高危型112例,即HPVl6,18型为16．99％。结论FQ—PCR具有灵敏度高、特异性强、简捷方便的特点,适于临床推广应用。HPVDNA分型检测技术可以快速区分高危型及低危型HPV感染,有助于对尖锐湿疣的复发和宫颈癌变作出可能性预测。     

利用EP5-A2文件的方法评价实时荧光定量PCR检测HBV DNA的精密度

目的评价本实验室荧光定量PCR方法(Real-time PCR)测定HBV DNA结果的精密度。方法按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP5-A2文件C1附录要求,对浓度约为107(copies/ml)(S7)、105(copies/ml)(S5)和103(copies/ml)(S3)样本,评价其精密度。结果 S7、S5、S3的批内精密度CV值分别为2.022%、3.682%、4.469%,总精密度的CV值分别为4.037%、4.452%、7.090%。结论本检测系统的精密度情况符合试剂厂商声明要求,可以满足临床需求。     

肿瘤基因启动子区异常甲基化与肿瘤的发生

肿瘤的发生和发展是一个与多基因、多步骤的致癌因素相关的复杂过程,包括了原癌基因及肿瘤抑制基因的改变、错配修复基因的突变、DNA甲基化和微卫星不稳定性。癌基因的低甲基化与抑癌基因的高甲基化在肿瘤发生、发展中的基因表达调控、基因结构的稳定等方面发挥重要作用。DNA甲基化是指生物体在DNA甲基转移酶的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,将甲基转移到特定碱基上的过程。甲基化异常被认为是肿瘤的一个特征,是基因组中一种重要的表观遗传修饰,与肿瘤的发生、浸润及转移相关。基因局部甲基化模式的改变已成为令人瞩目的研究领域。本文就DNA甲基化及肿瘤基因启动子区甲基化研究的相关进展作简要综述。     

构建hnRNP B1相对定量的FQ RT-PCR检测方法

目的 建立一种荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ RT-PCR)检测肺癌患者外周血hnRNP B1 mRNA表达的相对定量方法.方法 以hnRNP B1为待测基因,以β-actm为参照进行检测,建立标准曲线,确定实时RT-PCR的扩增效率;优化反应条件,使扩增效率接近100%,检测待检标本hnRNP B1和β-actin的循环阈值(Ct).结果 该法检测的最低拷贝数为103,线性范围为103～107拷贝,批内和批间变异系数(CV)分别为3.4%和11.3%.结论 该方法具有灵敏、特异、数据处理简便可靠等特点,为其他肿瘤患者外周血中肿瘤细胞的检测提供了方法学启示.     

安徽省部分医院室间质量评价样品现场检测结果分析

目的考核市级医院、县级医院及民营医院的临床常规化学、凝血试验、乙丙肝抗原抗体检测三个大常规专业项目的现场检测能力。方法利用安徽省临床检验中心2016年和2017年室间质评活动的同批次样本,设计各专业考核样本盘,开展现场监督检测,结果上传系统网络平台,以同批次全省分组大数据的允许范围为判定标准,按照国际通用的评价方案,分别考核各项目中各类医院的检测能力。结果临床常规化学、凝血试验、乙丙肝抗原抗体检测三个专业中,市级医院的平均PT得分为95.63、99.63、92.50,及格率情况分别为100%、100%、87.5%;县级医院平均PT得分94.46、99.50、82.66,及格率分别为96.97%、100%、68.75%;民营医院平均PT得分89.50、90.81、82.50,及格率分别为93.75%、93.75%、56.25%。结论三个常规专业的平均得分都在80分以上,按照评价标准,说明整体检测能力合格,其中市级医院高于县级,县级医院高于民营;三类医院中,临床常规化学、乙丙肝抗原抗体检测专业的检测能力较好,凝血试验检测能力有待进一步加强。     

Luminex液相芯片技术测定氨甲喋呤对映体耐药A549细胞株中磷酸化酪氨酸激酶受体

目的 探讨氨甲喋呤(MTX)对映体诱导的耐药A549细胞株中磷酸化酪氨酸激酶受体(RTKs)的表达差异及受体间的相关性.方法 用MTX对映体浓度递增结合低剂量持续诱导肺腺癌A549细胞株,用Luminex液相芯片技术检测L-(+)-MTX/A549细胞、D-(-)-MTX/A549细胞和亲本A549细胞3组细胞中7种磷...     

氨甲蝶呤对映体获得性耐药A549细胞株二氢叶酸还原酶基因表达分析

摘要：目的：研究氨甲蝶呤(MTX)对映体［L-(＋)-MTX和D-(-)-MTX］耐药与二氢叶酸还原酶(DHFR)基因表达的关系。 方法：用浓度递增结合低剂量持续诱导法获得A549细胞对不同构型及不同浓度的MTX对映体的耐药细胞株,荧光定量PCR检测耐药细胞株中DHFR基因的相对含量。 结果：对两种不同对映体的获得性耐药存在差异,D型耐药细胞耐药指数高于L型;对映体各浓度耐药细胞间耐药指数也有差异。15 μmol/L L型、D型MTX首次诱导耐药细胞的DHFR相对含量低于亲本细胞,对该浓度对映体耐药的各细胞组间没有差别（P＞0.05）。35~45 μmol/L浓度耐药细胞的DHFR相对含量增加,45 μmol/L D型耐药细胞DHFR相对含量高于对应浓度L型耐药细胞,差异有显著性(P<0.05)。 结论：首次诱导MTX耐药以抑制DHFR基因为主。DHFR基因表达具有手性差异。DHFR基因的检测有望作为肿瘤治疗监测的指标。     

检测细菌性阴道病干化学法的建立及评价

利用肉眼观察反应产物颜色的变化探讨研发试剂与酶标准品的最佳反应条件,在pH值6.2,37℃,15 min,MSTT为10μg时,研发干片与酶标准品达到最佳反应。临床实验中,将研发试剂、细菌性阴道病(BV)BLUE、国产试剂盒分别对临床标本进行对比检测,研发试剂与BV BLUE对BV的检测效果差异无统计学意义,符合率为97%。而国产A试剂盒与BV BLUE对BV的检测效果差异有统计学意义(P<0.01,χ2=0.390,r=0.42),符合率仅为67%。     

某三甲医院EB病毒感染的临床回顾性分析

目的 探讨某三甲医院一年来EB病毒（epstein-barr virus，EBV）感染的情况，分析常见病种的构成及临床特征，为EBV感染及相关疾病的防治提供科学的理论依据。方法 回顾分析该院2015年10月~2016年9月采用荧光PCR法检测EBV核酸载量，并对检测结果及患者的临床资料进行分析。结果 1 313例血浆标本中EBV脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）阳性标本314例，总体阳性检出率为23.91%，其中女性患者的阳性检出率为21.60%，男性为25.27%，男女不同性别的阳性检出率无差异（（口恶）2=2.26，P=0.133）。在不同年龄段的EBV-DNA阳性检出率出现两个高峰，分别为1~10岁和61~70岁。不同季节间的EBV阳性检出率也有不同，其中秋季最高为36.44%，冬季最低为13.00%。该院科室之间患者EBV的阳性检出率前五位的依次为:儿科（40.91%）、放疗科（39.30%）、血液科（18.50%）、感染科（16.98%）、重症加强护理病房（intensive care unit，ICU）（15.79%）。不同疾病的EBV阳性检出率不同。结论 EBV的阳性检出率与国内其他地区报道相似，有年龄、季节差异，无性别差异。EBV感染的临床表现复杂多样。