毛细管电泳测定微量氨基酸柱上样品堆积法研究

目的建立一种柱上样品堆积法测定微量氨基酸的方法。方法分别用运行缓冲液或用水和乙腈重组经萃取吹干的样品 ,压力法进样 5、2 5和 5 0s,高效毛细管电泳法定量分析 ,观察用不同溶剂重组对柱上样品堆积效果的影响。结果该法提高微量氨基酸检测灵敏度 10 0倍并保持柱效不变。结论用水和乙腈 (1∶1)作溶剂重组残留样品的方法获得最佳的柱上堆积效果。     

高效毛细管电泳分离手性氨基酸及D-氨基酸与老年前期痴呆关系的研究(综述)

高效毛细管电泳分离手性氨基酸及Ｄ－氨基酸与老年前期痴呆关系的研究（综述）沈佐君，孙曾培，杨树德（卫生部临床检验中心，卫生部北京医院，北京１００７３０）１高效毛细管电泳简介高效毛细管电泳（ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐ...     

上柱前样品萃取与浓缩技术在毛细管电泳法测定微量氨基酸中的应用

目的　建立一种上柱前样品萃取与浓缩技术测定生物样品中微量氨基酸的方法。方法　氨基酸与2 ,4 二硝基氟苯衍生化反应完成后 ,用 10ml叔丁基甲醚抽提 2次 ,每次 5ml,以除去多余衍生化试剂。然后用 6mol/L盐酸 2滴酸化 ,再用 6ml乙酸乙酯萃取两次 ,每次 3ml。最后合并上层萃取液 ,5 0°C水浴吹干 ,剩下含氨基酸的残留物用水和乙腈重组 ,用毛细管电泳法分析定量。结果　本法具有操作简单、萃取效率高的特点 ,平均萃取产率可达 99.3%。若用水和乙腈重组残留物至原来体积的十分之一 ,则柱前浓缩效果可达 10倍。结论　柱前萃取和浓缩技术操作简单 ,是一种可用于提高毛细管电泳法测定微量氨基酸灵敏度的方法     

高效毛细管电泳法在血清氨甲蝶呤浓度检测中的应用

目的建立快速检测人血清中氨甲蝶呤药物浓度的方法。方法用高效毛细管电泳技术，选用直径75μm，总长60cm，有效长度50．5cm熔融石英毛细管，以75mmoL／L，pH7．4的磷酸盐为电泳缓冲液，检测波长为306nm，在25kV电压下的快速分离检测氨甲蝶呤，并对此方法进行方法学评价。结果氨甲蝶呤的出峰时间在10min内，线性范围在1.1—1100．0μmol／L间，最低检出浓度为0．55μmoL／L，回收率为88．2％-98．2％，批间精密度为5．4％，批内精密度为4．2％。结论高效毛细管电泳方法具有快速、准确且成本低的特点，为临床和科研中测定血清氨甲蝶呤提供了一种有效的手段。     

高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质

目的建立测定大鼠海马组织和人脑脊液中氨基酸类神经递质的高效毛细管电泳分析方法。方法用高效毛细管电泳技术,选用总长60 cm、有效长度50.5 cm、直径75μm熔融石英毛细管,在20 kV电压下快速分离4种氨基酸。以100 mmol/L硼酸-三羟甲基氨基甲烷（Tris）（1∶1,含1%异丙醇）为电泳缓冲液（pH值为10.35）,激光诱导荧光检测器进行检测,并对此方法进行方法学评价。同时检测45例患者脑脊液的氨基酸含量。结果谷氨酸（GLU）、天冬氨酸（ASP）、γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸（GLY）4种氨基酸能在15 min内分离,线性范围为1.0~100.0μmol/L,GLU、ASP、GABA、GLY最低检出限分别为10、23、18、15 nmol/L,4种氨基酸的批内精密度范围4.44%~9.72%,批间精密度范围6.96%~10.50%。4种氨基酸的回收率不低于88.1%。全面性大发作癫痫患者GLU、GLY、ASP含量显著高于对照组（P〈0.05）,而GABA较对照组差异无统计学意义;复杂部分性发作癫痫患者4种氨基酸含量较对照组显著增加（P〈0.05）。结论高效毛细管电泳具有快速、灵敏、准确的特点,为临床和科研提供了一种有效的方法。     

表皮生长因子受体介导的信号转导与肿瘤侵袭、转移的关系研究进展

表皮生长因子受体（EGFR）属受体酪氨酸蛋白激酶，在多种肿瘤中表达或高表达。与配体结合后传递信号至细胞核内，调节基因的表达。参与生长、分化、增殖、血管发生和凋亡等多种细胞功能的调节。肿瘤的侵袭、转移是一个复杂的过程，也是导致肿瘤患者死亡的主要原因。本文就EGFR的结构、信号转导及其在肿瘤的侵袭和转移中的作用作一综述，为肿瘤的靶向治疗提供新思路。     

高危型人乳头瘤病毒分子生物学检测的研究进展

人类乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）是一种具有种属特异性的嗜上皮病毒,属双链闭环的DNA病毒。近些年的大量研究表明,高危型人乳头瘤病毒（high risk—human papillomavirus,hr—HPV）感染是宫颈癌发生的必要条件。hr-HPV的检测和分型对了解和筛查宫颈病变、指导治疗及判断预后具有重要价值;同时对评价hr—HPV疫苗的有效性和hr—HPV感染的流行病学研究也有一定价值。     

MTX治疗急性淋巴细胞白血病的研究进展

MTX为抗叶酸类抗代谢药,是临床上治疗各种恶性肿瘤常用化疗药物之一,有很强的免疫抑制作用.它选择性作用于急性淋巴细胞白血病细胞阻止免疫母细胞分裂增殖,同时对体液免疫和细胞免疫均有抑制作用.急性淋巴细胞白血病患者接受MTX治疗后肿瘤细胞易产生耐药与转移复发.本文就MTX治疗急性淋巴细胞白血病作用机制、剂量和作用时间选择、DNA甲基化水平变化、EGFR基因和侵袭转移的关系进行综述.     

肿瘤细胞对氨甲蝶呤产生耐药生化机制的研究进展

氨甲蝶呤(MTX)作为一种广泛使用的抗肿瘤药物,几十年来人们一直在不断探讨其耐药的具体机制。随着相关检测技术的发展,最近几年对其耐药的理解更加深入,涉及谷氨酰合成酶(分胞浆型cFPGS和线粒体型mFPGS两种异构体)与MTX耐药机制、多药耐药相关蛋白与耐药、二氢叶酸还原酶与耐药间作用的机制。现从药物转运、谷氨酸化以及合成代谢途径认识引起MTX耐药的生化机制,并探讨其在临床的应用前景和意义。