定量PCR检测体外扩增脐带血造血干细胞HOXB4基因的表达

目的:通过检测HOXB4基因表达,评价体外扩增的脐带血干细胞(CBSC)自我更新的能力。方法:CBSC在含造血细胞因子(TPO SCF FL G鄄CSF)的无血清培养基体外扩增7天和14天,抽提细胞总RNA,采用定量PCR检测HOXB4基因的表达。结果:CBSC体外培养后,细胞总数可以增加近100倍,但HOXB4的表达较扩增前下降。培养7天HOXB4的水平为扩增前的18%,培养14天,HOXB4表达仅为扩增前的3%左右。结论:CBSC体外扩增细胞数量增加的同时,自我更新能力逐渐下降,甚至消失。     

γ射线诱导人结肠癌细胞株P^53和WAF—1／CIP1表达分析

ＷＡＦ－１／ＣＩＰ１是近年 新发现的由Ｐ＾５３激活的肿瘤抑制基因。本文以γ射线自理人结肠癌细胞株，分析ＤＮＡ损伤诱导Ｐ＾５３和ＷＡＦ－１／ＣＩＰ１在ｍＲＮＡ水平表达情况。结果表明，ＤＮＡ损伤不能诱导ｍｕｐ＾５３表达，也不能提高ｍｕｐ＾５３ｘ细胞株ＷＡＦ－１／ＣＩＰ１的表达。     

胰岛细胞抗体与糖尿病关系的研究

用间接免疫荧光法检测45例胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)和120例非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)血清中胰岛细胞抗体(ICA)及其滴度。IDDM 患者ICA 阳性率为42.2%(19/45),平均滴度1:8;NIDDM 患者ICA 阳性率为5%(6/120)。两者有显著性差异。ICA 的出现率随病程延长而逐渐降低。ICA 阳性和阴性的IDDM 患者平均血糖水平无显著差异。ICA 阳性的IDDM 胰岛素使用量显著低于ICA 阴性的IDDM。IDDM 患者胰岛素使用量同病程呈正相关。本文结果显示,ICA 是IDDM 自身免疫反应的血清学标志;IDDM 和NIDDM 有不同的病因和发病机制,在IDDM 临床发作时,尚有一定的胰岛素分泌能力,随着自身免疫反应的持续进展,胰岛β细胞不断减少乃至破坏殆尽。     

恶性肿瘤病人血浆TXB_2与6-酮-PGF_(1α)含量的初探

用放射免疫方法测定60例正常人、40例良性肿瘤和137例恶性肿瘤病人的血浆TXB_2和6-酮-PGF_1α的含量。TXB_2/6-酮-PGF_1α测定值正常人和良性肿瘤病人分别为154.5±81.4/17.2±5.7和136.4±60.9/16.7±4.7;而Ⅲ～Ⅳ期恶性肿瘤病人中,乳癌为237.2±116.6/23.2±7.0、肺癌398.9±211.0/25.8±7.5、直肠癌271.7 ±223.0/23.1±8.9、食道癌223.2±71.3/21.5±7.4和胃癌228.9±143.6/24.3±7.0,均明显高于对照组。本文还对TXB_2和6-酮-PGF_1α值升高与恶性肿瘤转移之间的关系进行了探讨。     

靶向干预多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞的实验研究

目的:间充质干细胞(MSCs)对维持多发性骨髓瘤(MM)骨髓微环境的稳定有重要作用,靶向干预MSCs有望成为MM治疗新的途径,本实验通过分析沙利度胺(Thalidomide,Thal)和地塞米松(dexamethasone,Dex)对MM患者MSCs凋亡及其IL-6、IL-1β、SCF表达的影响,探讨上述药物可能新的作用机制和MSCs作为治疗靶点的可行性。方法:含10?S的1640培养液培养MSCs,以终浓度分别为0μmol/L、1.0μmol/L、3.0μmol/L、5.0μmol/L、7.0μmol/L的Thal,0μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L的Dex作用MSCs8h,倒置光学显微镜和AnnexinV/FITC-PI双染法荧光显微镜下观察细胞凋亡,RT-PCR检测分析IL-6、IL-1β和SCF细胞因子表达的变化。结果:Thal、Dex均以浓度依赖方式诱导MM患者MSCs凋亡;Thal下调MSCs三种细胞因子的表达(P<0.05),对IL-6的抑制随药物浓度增加而加重,对IL-1β和SCF表达的下调与药物浓度无明显关系(P>0.05);Dex明显抑制MSCsIL-6、IL-1β、SCF的表达(P<0.05),对3种细胞因子的抑制呈药物浓度依赖性。结论:Thal、Dex能诱导MM患者MSCs的凋亡,抑制其IL-6、IL-1β、SCF的表达,是有效治疗MM的靶点和机制之一。     

孕妇感染弓形虫后细胞因子水平的变化

弓形虫是人类和动物体内的专性细胞内机会寄生原虫,呈世界性分布。孕妇感染弓形虫后可影响胎儿生长发育、严重的可致畸或引起胎儿死亡。我院进行的孕妇感染弓形虫后胎儿生长发育的跟踪研究,提示随访孕妇感染弓形虫后的妊娠结局,与正常孕妇比较弓形虫感染胎儿致畸率及低...     

脐血CD34+细胞体外扩增时HOXB4基因表达的变化

同源盒基因家族成员HOXIM反映原始造血干／祖细胞（PHSC／PHPC）的自我更新和增殖能力。本研究采用实时定量RT—PCR的方法在mRNA水平上检测HOXIM基因的表达，以观察体外扩增脐血CD34^＋细胞自我更新的水平。结果显示：随着体外培养时间的延长，虽然CD34^＋细胞数增加，但HOXB4表达下降；周后，HOXB4几乎检测不到，与成熟外周血淋巴细胞表达HOXIM的水平相同；CD34^＋细胞与骨髓间充质干细胞（BM—MSC）共培养可以减缓CD34^＋细胞HOXIM表达的下降。结论：脐血CD34^＋细胞体外扩增过程中自我更新能力逐渐下降。CD34^＋与BM—MSC共培养有助于减缓体外扩增的CD34^＋细胞自我更新能力的丧失。     

江苏地区骨髓库志愿者HLA-B*15组基因多态性研究及临床意义

目的:调查江苏骨髓库志愿者HLA-B*15等位基因的分布特征,研究其可能对临床供体选择的影响以及相关疾病.方法:利用聚合酶链反应-碱基序列直接测序(PCR-SBT)方法对3 238例江苏人群HLA-B位点的2、3、4外显子序列进行分型,计算HLA-B*15等位基因频率,并与不同人群进行比较.结果:本研究中检出的21种H...