胞外HMGB1调控SDF-1/CXCR-4轴介导脐血CD34＋细胞的迁移作用研究

本研究探究高迁移率族蛋白B1 （high mobility group boxl,HMGBl）和/或基质细胞衍化因子（SDF-1）对脐血CD34＋细胞的迁移作用,并进一步探讨HMGB1是否通过调控SDF-1/CXCR-4轴介导脐血CD34＋细胞的迁移.分离脐血单个核细胞,应用免疫磁珠分选CD34＋细胞,流式细胞仪检测脐血CD34＋细胞的纯度.利用趋化迁移实验（Transwell）测定HMGB1和/或SDF-1对脐血CD34＋细胞的迁移作用.1.0×105细胞/孔脐血CD34＋细胞加入上孔中,应用不同浓度梯度的HMGB1和/或SDF-1（0、10、25、50、100、200 ng/ml）检测HMGB1和/或SDF-1促进脐血CD34＋细胞迁移的最适作用浓度.新鲜分离的脐血CD34＋细胞表达SDF-1受体CXCR4和HMGB1受体TLR2TLR4和RAGE.为进一步探讨何种受体在HMGB1和SDF-1介导的细胞迁移中起作用,应用抗SDF-1抗体,抗CX-CR-4抗体,抗RAGE抗体,抗TLR2抗体和抗TLR4抗体阻断研究HMGB1和/或SDF-1对脐血CD34＋细胞的迁移作用.结果表明,磁珠分选脐血CD34＋细胞纯度为97.40±1.26％.25 ng/ml的SDF-1不能介导脐血CD34＋细胞的迁移,最佳作用浓度为100 ng/ml.HMGB1的最低作用浓度为100 ng/ml.通过剂量研究实验发现,细胞迁移最佳联合作用浓度为HMGB1 100 ng/ml＋ SDF-1 50 ng/ml.抗体阻断实验结果表明,抗SDF-1（4μg/ml）和抗CXCR-4（5 μg/ml）抗体均可以阻断HMGB1单独或联合SDF-1介导的细胞迁移运动,而抗RAGE抗体,抗TLR2抗体及抗TLR4抗体并不能阻断HMGB1和/或SDF-1对脐血CD34＋细胞的迁移作用.结论：HMGB1和SDF-1均可以促进脐血CD34＋细胞的迁移,HMGB1可能通过CXCR-4而非RAGE和TLR受体加强SDF-1诱导的细胞迁移作用.具体的作用机制还需进一步探讨.     

全胃肠外营养在新生儿消化道畸形中的应用

18例新生儿消化道畸形患儿经周围静脉接受TPN,常规监测血生化及肝肾功能,收集24h尿液测定氮平衡,同时测定胰岛素、肌红蛋白及CPK。结果表明,经周围静脉输注TPN安全、实用,溶液中可适当提高氨基酸浓度,以达到代谢支持的目的,系列测定CPK可作为短期TPN监测的指标。     

成年兔心耳组织体外培养扩增心肌细胞的生物学特性研究

目的探讨成年兔心耳组织体外培养扩增心肌细胞的生物学特性.方法选新西兰成年兔11只,分别取少量心耳组织,酶解法制成细胞悬液,体外培养.于培养0、12、26、40 d进行细胞计数;培养12、26 d测定细胞染色体含量;培养0、40 d,取部分细胞行免疫组化染色检查,计算心肌细胞百分比;培养26 d,电镜检查细胞的超微结构;培养12 d,取部分细胞置-80℃冷冻保存,8周后快速解冻,体外继续培养观察.结果细胞计数分别为(0.54±0.06)×107、(7.38±0.73)×107、(58.00±16.14)×107、(24.91±11.86)×107;DNA 含量测定S期细胞分别为22.2%、56.5%;免疫组化判定心肌细胞的比例分别为82%±11%、87%±18%;电镜下可见心肌细胞肌原纤维的横纹;冷冻的心肌细胞快速解冻后,体外培养可继续生长扩增.结论成年兔心耳组织来源的心肌细胞,在有限的体外传代培养过程中,数目可扩增,其亚显微结构和成分基本稳定.     

手术创伤对新生儿内分泌和代谢影响的研究

对15例行外科手术的新生儿进行内分泌及代谢方面的研究。发现术后所有患儿均有皮质醇和生长激素的升高，血清前白蛋白和白蛋白下降，表明机体处于分解代谢状态。前白蛋白可以作为监测应激反应严重程度及营养支持是否有效的指标。     

连续终池引流治疗良性颅内高压所致的顽固性头痛的临床研究

头痛是临床上最常见的症候,病因繁多,对于颅内高压引起的头痛,应做全面系统的检查,包括头部CT、MRI及脑脊液等检查以免误诊。在此基础上我院实施连续终池引流治疗良性颅内高压(benign intracranial hypertension,BIH)所致的头痛60例。现报告如下。     

三级甲等医院临床护士职业紧张度调查

[目的]了解三级甲等医院护士职业紧张度水平，探讨临床护士紧张的主要影响因素。[方法]采用一般情况调查表和职业紧张度量表（OSI—R）对北京市某三级甲等医院临床护士242名进行问卷调查。[结果]不同年龄、工龄、学历、职称、科室、婚姻及子女情况的临床护士之间OSI-R各项得分差异无统计学意义（P〉0．05）；患有神经衰弱的护士与未患护士得分差异显著（P〈0．01）；护士个体紧张反应的主要影响因素有工作环境、角色界限不清、休闲、社会支持、任务模糊、任务过重。[结论]盘床护士的职业紧张度水平处于中等。在不同年龄、层次、家庭情况的护士之间没有明显差异；患有神经衰弱的护士职业紧张度水平高于未患护士；改善护士工作环境。明确护士职责及护士角色。鼓励适当的休闲。增强社会支持是缓解护士职业紧张的有效措施。     

异体移植气管中骨形态发生蛋白诱导软骨再生的实验

目的：比较骨形态发生蛋白2在犬自体、异体、冷冻异体气管移植体内诱导软骨再生的作用。方法：实验于2004-03／10在第四军医大学唐都医院实验外科完成。21只杂种犬随机等分为3组，自体移植组、异体移植组、冷冻后的异体移植组。各组动物颈部切除4环气管段作为移植体，植入骨形态发生蛋白2后埋入腹腔大网膜中。骨形态发生蛋白2均以胶原溶液作为缓释载体，用注射器直接注入各软骨环间。术后5周处死实验动物，通过对标本组织学观察、碱性磷酸酶活性和钙含量测定，对各标本的新生软骨进行观察和定量分析。结果：各组实验犬均存活到预杀期。①定量组织学观察：各实验组骨形态发生蛋白2植入区均可见新生软骨细胞和软骨岛，HPLAS-1000病理图像分析系统计算各环间新生软骨的像素面积，自体移植组、异体移植组、冷冻后的异体移植组的新生软骨面积差异有显著性[2573．6&;#177;738．4，1691．3&;#177;743．6，2482．9&;#177;827．5，F=5．711，P〈0．05]，而自体移植组和深低温冷冻后的同种异体移植组差异无显著性。②碱性磷酸酶活性和钙含量测定：自体移植组、冷冻后的异体移植组与异体移植组均差异有显著性[自体移植组：（7．00&;#177;0．50）μkat／g，（5．48&;#177;1．15）mg／g；冷冻后的异体移植组：（7．00&;#177;0．83）μkat／g，（5．03&;#177;0．91）mg／g；异体移植组：（5．00&;#177;0．67）μkat／g，（3．57&;#177;0．98）mg／g，P〈0．05]，自体移植组与深低温冷冻后的同种异体移植组间无显著性差异（P〉0．05）。结论：骨形态发生蛋白2能在气管移植体内有效地诱导出新生软骨，在冷冻后的异体气管移植体内的作用效果与自体气管移植体内相似，明显优于异体气管移植体。     

脑卒中患者心境障碍的临床分析

<正>2006年1月—2007年1月在我科住院的脑卒中患者182例,均符合全国第四届脑血管病学术会议诊断标准,并经头颅CT或MRI证实,男98例,女84例;平均年龄(62.23±7.45)岁;住院时间(20.47±9.12)d;均意识清楚,无理解能力障碍。入院期间由精神科医师采用中国精神疾病分类方案与     

食管癌Ivor-Lewis术式与Sweet术式比较研究的Meta分析

目的：比较食管癌切除手术Ivor-Lewis术式与Sweet术式的有效性和安全性,探讨食管癌切除术的最佳手术方式。方法检索PubMed、EMbase、the Cochrane Library 、Google scholar、中国知网（CNKI）、中国生物医学文献总库（CBM）、维普数据库（VIP）及万方数据库公开发表的Ivor-Lewis术式与Sweet术式比较的研究,采用RevMan 5．2软件进行数据分析。结果15篇文献共4106例患者纳入研究,其中Ivor-Lewis组1454例,Sweet组2652例。 Meta分析结果显示,与Sweet组比较,Ivor-Lewis组手术时间明显较长（MD＝57．40,95％CI：42．43～72．38,P＝0．000）,手术出血量明显较高（MD＝28．39,95％CI：4．06～52．72,P＝0．02）,淋巴结清扫数目明显较多（MD＝4．19,95％CI：3．06～5．32,P＝0．000）;两组术后住院时间、喉返神经损伤、乳糜胸、肺部并发症和吻合口瘘等并发症的发生情况差异无统计学意义（均P＞0．05）;两组间5年生存率差异无统计学意义（P＝0．52）。结论两种术式远期疗效相当,Sweet术式较Ivor-Lewis术式操作方便,节省手术时间,患者耐受性较好;Ivor-Lewis术式比Sweet术式能够清扫更多的淋巴结,亦未增加术后并发症。     

胆道闭锁多中心综合诊断治疗方案研究

目的 探讨胆道闭锁综合诊疗方案应用的有效性和安全性.方法 根据具有地域代表性的四家儿童医院专家确定的胆道闭锁诊疗方案,2007年1月开始对胆道闭锁进行诊断及治疗.收集2004年1月至2006年12月四家医院经确诊为胆道闭锁并进行根治手术的病例作为对照组2007年1月至2009年12月病例作为观察组.使用标准化量表统计首次就诊年龄、手术年龄、术前及术后3个月,6个月和1年黄疸清除率,术后胆管炎发生率,2年自体肝生存率.结果 符合诊断标准498例,实施Kasai术456例,其中对照组184例,手术168例;观察组314例,手术288例.二组首次就诊年龄无明显差异[(33±27)d比(34±26)d,P＞0.05],使用标准化诊断方案后平均手术年龄由(64±24)d下降为(74±31)d,P＜0.05;观察组术后3个月、6个月及1年退黄率(53.9%、56.9%、58.0%)较对照组(38.9%、39.9%、43.4%)明显提高(P＜0.05);其术后胆管炎发生率亦显著降低(31.8%比47.8%,P＜0.05);对照组2年自体肝生存率39.3%,观察组56.1%(P＜0.05).结论 标准化胆道闭锁综合诊断治疗方案可降低手术年龄、提高术后黄疸清除率、减少术后反流性胆管炎,显著提高术后2年自体肝生存率.

Abstract：

Objective To evaluate the efficacy and safety of a standardized protocol for the diagnosis and treatment of biliary atresia (BA) in children.Methods This study enrolled 498 patients from 4 hospitals diagnosed with BA from January 2004 to December 2009.The BA patients of the standardized protocol group,who enrolled in this study after January 2007,were diagnosed and treated using the standardized protocol.The rest of the patients were taken as controls.The patients were followed up for 2 years.The age of the first diagnosis,the age at operation,jaundice clearance,the occurrence of cholangitis and two year survival rates with native liver were retrospectively reviewed and compared between the 2 groups.Results Among the 498 patients,456 patients underwent Kasai procedure.Age of the first diagnosis between the two groups showed no difference (33 ± 27 vs 34 ± 26 days,P＞0.05),but the patients of the standardized protocol group received surgeries at earlier ages (64 ± 24 vs 74 ± 31 days,P＜0.05).The jaundice clearance rates of 3,6 and 12 months after operation in the patients of the standardize protocol group were higher than those of controls (53.9%,56.9%,58.0% vs 38.9%,39.9%,43.4%,P＜0.05).Patients of the standard protocol group had lower occurrence of cholangitis (31.8% vs 47.8%,P＜0.05),and better two years survival rate (56.1% vs 39.3%,P＜0.05).Conclusions The standardized protocol for the diagnoses and treatment of BA improves the clinical outcomes of the children with BA.