急性髓系白血病患者T淋巴细胞内细胞因子表达特性

T淋巴细胞在抗肿瘤的免疫反应中起着重要作用，而大部分肿瘤患者往往存在免疫功能低下。本研究通过对急性髓系白血病（AML）患者T淋巴细胞胞内细胞因子特性的研究，以了解AML患者在不同状态下T淋巴细胞的功能。18例不同状态下初诊AML患者和10例健康成人外周血中的T淋巴细胞在莫能霉素存在的情况下，体外经PMA和离子霉素（ionomycin）刺激后，分别进行CD4-FITC、CD8-FITC荧光单克隆抗体染色和IFNγ-PE、IL4-PE荧光单克隆体胞内染色，最后进行流式细胞仪分析。结果表明：初诊AML患者中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞胞内IFNγ分泌水平均明显低于健康成人外周血T淋巴细胞，CD4^＋和CD8^＋T细胞胞内IL-4分泌水平与成人外周血细胞无显著差异。处于临床缓解状态的AML患者，CD8^＋T淋巴细胞刺激后胞内产生IFNγ的量明显高于初诊AML患者（P〈0、05）．但与健康成人无显著差异（P〉0、05）。复发的AML患者外周血中CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞刺激后胞内产生IFNγ量明显低于健康成人外周血T淋巴细胞以及处于完全缓解状态的AML患者CD8^＋T淋巴细胞（P〈0、05）．而IL-4的量明显高于健康成人和初诊AML患者CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞（p〈0．05）。结论：处于不同状态下的AML患者T细胞亚群分泌的细胞因子发生了改变，与之相应的是，初次诊断的AML患者外周血中CD4‘和CD8’T淋巴细胞刺激后Th1／Tcl细胞反应低下，Th2／Tc2细胞反应与健康成人T淋巴细胞无差异；完全缓解状态的AML患者T细胞Thl反应虽然仍低下，但Tcl反应明显增强，与健康成人无差异；复发的AML患者CD4^＋和CD8^＋T细胞Th2／Tc2样反应较Thl／Tcl样反应明显增强。     

供体犬移植段气管的最佳获取时间

目的 探讨热缺血对移植体存活的影响，寻求获取供体气管的可靠时间。方法 选用杂种犬进行同种异体气管移植。供犬处死后经过不同热缺血时间取出气管，TUNEL法检测软骨细胞凋亡。各移植体植入受犬的气管原位及腹腔大网膜内，4周后处死取材。行病理学检查。并比较各组移植体软骨细胞存活率。结果 随着热缺血时间的延长，移植体软骨细胞凋亡数逐渐增加，移植后软骨结构破坏加重。并且相同热缺血期移植体，异位移植较原位移植结构保持好。结论 气管移植体对热缺血有较好的耐受，但是长时间的热缺血仍会给气管移植体带来损害。     

白血病染色体制备方法的探讨

目的 进行白血病染色体制备方法的探讨。方法 通过对影响染色体培养结果的各种因素的比较。结果 与结论细胞在1．0～20×109／L浓度下．经3TU水浴箱培养24小时，收获前l～2小时加入终浓度为0．04ng／L的秋水仙素，就可获得满意的分裂相。189例患的染色体检查成功率为97％．异常核型检出率为87.5％。     

多种酶消化法分离培养气管上皮细胞方法的比较

目的比较4种不同的酶消化法在培养气管上皮细胞中的异同,改进气管上皮细胞的培养技术,为组织工程气管提供理论种子细胞。方法Dispase冷消化法(使用0.1%Dispase4℃消化18h后使用0.25%的胰酶37℃消化10min)、胰酶冷消化法(0.25%胰酶4℃消化18h)、Dispase温消化法(0.25%Dispase37℃消化10min后使用0.25%胰酶37℃消化5min)及胰酶温消化法(0.25%的胰酶37℃消化10min),用4种消化法分离、培养兔气管上皮细胞,测定分离细胞的数量、纯度及成活率。结果4种方法所得细胞数量分别为:(430600.00±628.49、430780.00±580.52、430900.00±200.00、430640.00±931.67),差异无统计学意义(P<0.05)。Dispase冷消化法较其他3种方法得到的气管上皮细胞纯度高,细胞状态好。结论Dispase冷消化法较其他3种方法所得细胞纯度高、细胞成活率高,是一种较好的气管上皮细胞体外分离培养方法。     

肠外营养导致大鼠肝细胞周期基因的变化及临床意义

目的 本研究利用实时定量PCR芯片技术,检测TPN后肝脏细胞周期基因表达的变化,探讨哪些基因在肝脏损害中发挥作用,为临床预防和治疗PNALD提供资料.方法 选择12只雄性SD大鼠,随机分为TPN组(6只)和生理盐水对照组(6只),7d后应用实时定量PCR芯片检测方法 ,比较两组大鼠间肝脏细胞周期基因的表达.结果 TPN组大鼠肝脏病理表现为肝细胞弥漫的脂肪空泡变性,小叶中央区较周边区更为明显;TPN组大鼠肝脏细胞周期表达上调基因有Atm、Brea1、CAkn1b、Dnajc2、G2a、Nfatc1、Notch2、Pkd1、Ppp2r3a等,表达下调基因有CAc25b、Ccnd1、E2f1、Mcm3、Nek2、Wee1等.结论 TPN组与生理盐水对照组大鼠比较,肝脏细胞周期基因表达存在差异,肝细胞周期基因ATM、BRCA1、Cdkn1b 等表达的改变,提示肝细胞增生减少和凋亡的增加,从而阻止肝细胞的修复,可能TPN与肝脏损伤的发生和发展相关.     

医学检验专业实习教学工作中的不利因素及对策

医学检验专业是现代实验室科学技术与临床医学在更高层次的结合,是一门发展迅速、多技术和多学科交叉的综合性很强的医学前沿学科,又是一门临床实践性很强的应用学科[1]。临床实习教学在医学检验专业学生综合素质培养方面发挥着重要作用,它是学生巩固和加强所学理论知识并运用于实践,培养独立能力的必要阶段。但在教学实践中,医学检验专业实习现状并不令人满意。拟就当前实习教学工作中的不利因素及应对做一探讨。1对象、方法和结果对2000、2001、2002三个年级医学检验本科专业的实习学生进行相关访问调查,实习生来自11家县级以上医院,其中…     

直流电场对肺癌细胞移行及Integrin β1的影响

背景与目的目前关于直流电场对细胞影响已引起广泛关注,并认为癌症的转移及转移能力可能与趋电性有关。本研究探讨肺癌A549细胞在体外直流电场中的趋电移行,及直流电场对Integrinβ1及其信号通路的影响。方法按A549细胞是否暴露于5V/cm直流电场及暴露时间分为A,B,C,D4组,显微摄像系统每5min连续记录各组细胞移行的变化图像,观察细胞在直流电场中的移行趋势;细胞免疫荧光法观察4组细胞内Integrinβ1位置的变化,Westernblot检测各组细胞中Integrinβ1下游的p-FAK及p-ERK的表达量变化。结果暴露于直流电场中的细胞胞体形态由扁平形逐渐转变为垂直于电场的纺锤形,观察期间细胞呈现朝阴极定向移行,而未暴露于直流电场的细胞则未发生胞体形态改变及定向移行运动。细胞免疫荧光示在直流电场中A549细胞膜表面上的Integrinβ1向阴极方向边集,Westernblot结果显示Integrinβ1下游信号转导通路中p-FAK及p-ERK的表达量增多。结论人肺癌细胞系A549细胞具有趋电性,体外直流电场可诱导其朝阴极定向移行,Integrinβ1在电场中定向重排并激活其通路下游转导信号可能在肺癌细胞趋电移行中起关键作用。     

表皮生长因子促进肺癌细胞在直流电场中定向移行的实验研究

目的:研究表皮生长因子(EGF)对人肺癌细胞系A549细胞在体外直流电场中定向移行的促进作用.方法:按A549肺癌细胞是否暴露于直流电场及是否给予EGF分为A、B、C、D 4组.显微摄像系统每15min连续记录2h内细胞移行的变化图像,测量细胞移行距离及细胞移行方向与电场方向问夹角cosine γ值,Image-Pro Plus 5.0软件处理结果;Western blot检测各组细胞中p-Akt及p-Stat3的表达量.结果:未暴露于直流电场中的A、B组细胞无序随意的布朗运动,暴露于直流电场中的C、D组细胞在观察期间呈现向阴极方向定向移行,D组细胞的定向移行cosine γ值最大0.83±0.03,P<0.05;2h后D组细胞定向移行距离更大(63±16.9)μm, P<0.05.Western blot检测提示电场及EGF均促进p-Akt及p-Stat3的表达,电场及EGF共同作用组其表达最强.结论:体外直流电场可诱导人肺癌细胞系A549细胞朝向阴极的定向移行,EGF可以促进这种定向移行,肺癌细胞在直流电场中定向移行可能与Akt及Stat通路有关.     

实验性败血症休克发生机制的研究——肺对血中微聚物的清除作用在败血症休克中的意义

本文对实验性败血症休克狗血中微聚物的形成和消失进行了动态的定量观察,对部分动物血中微聚物及肺组织作了电镜检查;再一次证实我组1980年关于微聚物在内毒素休克中的作用,井进一步揭示肺对血中微聚物的清除作用的重要意义。肺清除功能良好者,生存时间长;反之,迅速死亡。本研究为临床上积极采用保护、支持休克病人的肺功能等治疗措施,提供了实验根据和理论基础。     

肾病综合征、尿毒症患者血清生长激素水平检测及其意义

目的观察肾病综合征、尿毒症患者血清生长激素(GH)水平。方法采用放射免疫分析法测定30例肾病综合征患者、50例尿毒症患者、30例健康对照组血清GH浓度。结果肾病综合征患者血清GH浓度(2.63±1.00)ng/mL明显低于健康对照组(5.48±0.96)ng/mL(P<0.05);尿毒症患者血清GH浓度(17.92±5.81)ng/mL明显高于健康对照组(P<0.05)。结论肾病综合征患者血清GH浓度明显降低;尿毒症患者虽然GH水平明显升高,但机体对其产生抵抗,故其GH水平存在相对不足。