血吸虫病酶联免疫吸附试验(ELISA)操作规范化的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA),已被公认是具有高度敏感性和特异性的免疫诊断方法。目前已广泛应用于细菌、病毒和寄生虫等感染的实验诊断和流行病学调查,但各地所用的 ELISA 操作方法尚不很统一,其检测效果往往存在差异,影响结果的可比性。近年来,有关影响 ELISA 检测结果的     

2000-2007年浙江省人畜布鲁菌病疫情与控制措施

浙江省在20世纪50年代因从外地引进染病的奶牛而引起布鲁菌病局部流行.1964年对全省3176头奶牛、绵羊、种羊、奶山羊等家畜进行血清学监测,阳性率为3.02%(96/3176);1970-1982年监测阳性率为0.25%(126/50 274);1983-1995年畜间阳性率降为0.14%(326/238 403).1963年对从业人员作布鲁菌病试管凝集试验(SAT),阳性率为11.59%(19/164),并发现可疑临床病例.1985-1995年全省监测18 098人,皮内变态反应试验阳性率1.96%(355/18 098),进一步作试管凝集试验(SAT),阳性率为0.04%(7/18 098),确定1例慢性稳定型布鲁菌病患者.1995年全省达到布鲁菌病控制区标准.但进入21世纪以来,浙江省布鲁菌病疫情逐年升高,并发生人间布鲁菌病的局部暴发[1].现就浙江省近年布鲁菌病疫情作一分析.     

量化检测日本血吸虫循环抗原的初步研究

目的探索量化检测日本血吸虫循环抗原的方法。方法用AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA(S-ELISA)检测SEA-TCA抗原,并根据测得的OD490值和相应抗原浓度计算回归方程式,再用该法和fSjc26GST-PcAb双抗体夹心ELISA方法检测急慢性日本血吸虫病人的血清循环抗原。并初步应用于检测流行区和传播阻断地区的人群血清循环抗原。结果AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA测得SEA-TCA浓度(y)与OD490值(x)呈明显的正相关(r=0.981,y=128.08x-46.95);血清循环抗原的平均含量,急性血吸虫病人(206.27±36.62 ng/ml)显著高于慢性血吸虫病人(122.88±75.13 ng/ml)。两组双抗体S-ELISA检测急性血吸虫病人循环抗原的阳性率均为100%(34/34),慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率则分别为87.50%(70/80)和78.57%(63/80),特异性分别为90.74%(98/108)和92.59%(100/108)。用以上两法对流行区和传播阻断地区的人群血清进行循环抗原检测,其阳性率分别为34.52%(87/252)和9.72%(49/504),具有显著性差异。结论两组双抗体S-ELISA用于检测日本血吸虫循环抗原均有较好的效果,其中AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA能量化检测日本血吸虫循环抗原。     

滴金免疫渗滤法快速诊断肺吸虫病的研究

目的寻找一种快速诊断肺吸虫病的方法.方法以肺吸虫成虫浸出液为抗原,金标抗人IgG为显示剂检测肺吸虫抗体(DIGFA).结果检测肺吸虫病人血清41份,阳性符合率为100%;检测非流行区健康人血清51份,流行区健康人血清30份,阴性符合率100%;检测班氏丝虫病人血清20份,均为阴性;检测日本血吸虫病人血清20份,其中2例呈阳性.用DIGFA与ELISA同时检测肺吸虫病人血清41份,非流行区健康人血清51份及流行区健康人血清30份,两种方法的阳性与阴性符合率均为100%.结论DIGFA检测人体肺吸虫抗体敏感性高,特异性强,检测时无需特定的仪器,操作简便、快速,适于基层单位和现场应用.     

肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)的研制和应用

目的开发研制简易、快速、经济、准确的肺吸虫病诊断试剂盒。方法以肺吸虫成虫可溶性蛋白为检测用抗原,以胶体金标记羊抗人IgG为探针,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中肺吸虫特异性IgG抗体;用深圳康百得生物技术有限公司提供的肺吸虫抗体ELISA检测试剂盒作比较。结果用本试剂盒检测90人份肺吸虫病人血清和100人份健康人血清,其敏感性为98.9%(89/90),特异性为100%(100/100),Youden’s指数为0.989。用该试剂盒分别检测25人份血吸虫病和华支睾吸虫病患者血清,交叉反应率为24%(6/25)和4%(1/25);与姜片虫、囊虫、丝虫、肺结核病人血清均未见交叉反应。ELISA检测结果比较,符合率为93.5%,无显著性差异(χ2=0.7949,P>0.05)。结论肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)敏感性高、特异性强,可与ELISA相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,不需特殊仪器设备,非常适合临床检验和现场查病。     

日本血吸虫尾蚴及童虫可溶性抗原蛋白质组研究

应用免疫蛋白质组研究方法筛选、鉴定日本血吸虫尾蚴、童虫可溶性抗原蛋白质。方法日本血吸虫尾蚴可溶性粗抗原(SCAP)、童虫可溶性粗抗原(SLAP)分别用双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白质，每样本同时制3块胶，1块胶进行银染，2块胶通过电转印后再分别用感染兔和正常兔血清作Western印迹分析，确定特异性阳性反应点，再从相...     

浙江省布鲁氏菌病监测结果分析

<正>布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌引起的严重危害人民健康和畜牧业发展的人畜共患传染病。浙江省1995年达到布病控制标准,1996年转入监测巩固阶段,按照《全国布鲁氏菌病监测技术方案》开展人间布病监测,至2002年一直未发现病     

2004-2014年杭州市布鲁氏菌病病例流行病学分析

目的 对2004-2014年杭州市确诊的布鲁氏菌病(布病)病例流行病学特征进行分析,为制定防治措施提供依据。方法 收集杭州市2004-2014年确诊的布病病例个案调查表、各监测点防治年报表等资料,对收集的资料进行流行病学特征分析。结果 2004-2014年杭州市共确诊布病病例83例,年均发病率为0.114/10万,其中2014年发病率最高,为0.231/10万;职业以从事活羊屠宰、贩运及畜产品收购居多,占57.83%(48/83),非职业人群24例,占28.92%(24/83),且非职业人群在确诊病例中所占的比例近年有所升高;屠宰场聚集的余杭区是杭州市布病疫情的高发区,其发病人数占总人数的61.45%(51/83);1-5月是发病的高峰季节,发病人数占总发病人数的77.11%(64/83);97.59%(81/83)的患者有外地羊接触史,仅2.41%(2/83)的患者感染与本地饲养的牛有关,且自2006年以来已无感染病例。结论 控制外来传染源,加强对重点地区职业人员的健康教育和行为干预,同时在普通群众中大力宣传布病防护知识是今后防治工作的重点。     

谷胱甘肽-S-转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血吸虫循环抗原的研究

目的探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体力捕获并检测抗体，建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测定法和ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果３种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为１００％；对慢性血吸虫病的敏感性分别为７６．４％、９８．１％和９６．２％；特异性分别为９５．０％、９８．０％和９６．０％。结论ｒＳｊ２６ＧＳＴ抗原对日本血吸虫病具有诊断价值，可望有较好的应用前景。