细胞因子实时定量PCR检测方法的建立和应用

目的 建立细胞因子mRNA实时定量PCR的检测方法,并探讨人单个核细胞(PBMC)在激发型CD3单克隆抗体作用下,细胞因子mRNA的表达.方法 分离健康个体的PBMC,体外与激发型CD3单克隆抗体共培养,应用实时定量PCR检测不同共培养时间点Th1型(IL-2,IFN-γ)和Th2型(IL-10)细胞因子mRNA的表达.结果 激发型CD3抗体能显著上调PBMC胞浆IL-2,IFN-γ和IL-10 mRNA的表达.在共培养的12 h,IL-2 mRNA的含量显著上升并达到峰值14 000 copies/ml,随着培养时间的延长快速下降.IFN-γ和IL-10 mRNA在共培养的24～48 h达到峰值,分别为110 000 copies/ml和15 000 copies/ml.不同细胞因子其胞浆mRNA水平的基础值有明显差异.结论 实时定量PCR能在基因转录水平敏感和特异地反映微量生物活性因子的表达和调节.因此,该技术在基础和临床免疫研究中,具有良好的应用价值.     

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的影响

目的 探讨阿德福韦酯对慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV特异性CTL的影响.方法 对HBV DNA阳性（HBV DNA≥1×104拷贝/ml）、ALT＞2×正常值上限（ULN）、人白细胞抗原（HLA）-A2阳性的CHB患者用阿德福韦酯（正大天睛药业公司生产）10 mg,口服,每日1次,3个月.用实时荧光定量PCR检测HBV DNA,流式细胞术检测HBV特异性CTL.结果 阿德福韦酯治疗3个月后,HBV特异性CTL（0.52±0.11）%高于治疗前（0.34±0.14）%,t=6.78 P＜0.01,HBV DNA阴转（＜1×103拷贝/ml）28例（62.22%）.17例未阴转的患者,HBV DNA水平治疗后3个月[（4.18±0.4）log10拷贝/ml]低于治疗前[（6.23±0.73）log10拷贝/ml]t=9.99,P＜0.01.结论 阿德福韦酯能提高CHB患者的HBV特异性细胞免疫功能.     

再生丝素蛋白对小鼠骨髓来源树突状细胞分化、成熟的影响

体外研究再生丝素蛋白材料对小鼠骨髓来源树突状细胞分化、成熟的影响,探讨丝素蛋白的免疫原性及作为生物材料的意义。体外分离培养小鼠骨髓来源树突状细胞,接种于铺有再生丝素蛋白生物材料的细胞培养板中培养,在光学显微镜下观察细胞形态;FCM分析细胞表面相关分子的表达。同时用 MTT 法测小鼠骨髓来源树突状细胞细胞株 DC2．4在所选各种材料表面的生长增殖情况。结果表明：（1）再生柞蚕丝素蛋白和家蚕丝素蛋白均可支持小鼠骨髓来源的 DCs 生长和聚集;（2）MTT 结果表明再生柞蚕丝素蛋白与再生家蚕丝素蛋白相比可促进小鼠 BM来源 DC2．4的增殖;（3）再生柞蚕丝素蛋白和再生家蚕丝素蛋白上的小鼠 BM来源 DCs 表面低表达 CD11c、CD40、CD80、CD86、MHC -Ⅱ分子,与空白对照组 DCs 的表达谱相比无明显差别。再生柞蚕丝素蛋白与再生家蚕丝素蛋白相比,可较好地支持小鼠 BM来源 DC2．4的生长和增殖;再生丝素蛋白无刺激小鼠 BM来源 DCs 成熟的生物学效应。     

铁调素在非小细胞肺癌组织和血清中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的:检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤组织及血清标本中铁调素的水平,并探讨两者与其临床病理特征之间的相关性.方法:免疫组织化学检测60例NSCLC标本中铁调素的表达,应用ELISA检测血清中铁调素的含量,统计两者与临床病理特征的相关性.结果:组织中铁调素表达及血清铁调素水平与NSCLC的年龄、性别、病理类型、分化程度以及是否有淋巴结转移无显著相关性,但均与肿瘤分期及是否有远处转移相关.组织中铁调素表达与血清中铁调素水平并无显著相关性.结论:组织和血清中铁调素水平与NSCLC肿瘤分期及是否有远处转移相关,具体机制需要进一步研究.     

Survivin和SIRT1 mRNA在非小细胞肺癌中的表达及两者相关性分析

目的检测survivin和SIRT1 mRNA在非小细胞肺癌中的表达,探讨其相互关系。方法用实时定量PCR的方法检测江苏省肿瘤医院42组非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织中survivin和SIRT1 mRNA的表达,统计survivin与SIRT1的相关性。观察EGFR酪氨酸酶抑制剂吉非替尼处理非小细胞肺癌细胞系HCC827后survivin和SIRT1的表达改变。结果 85.7%(36/42)肿瘤组织survivin mRNA表达明显高于对应的癌旁组织。61.9%(26/42)肿瘤组织SIRT1 mRNA的表达低于其癌旁组织,33.3%(14/42)肿瘤组织SIRT1 mRNA表达高于其癌旁组织。Survivin表达与SIRT1表达有统计学意义的相关性(P0.05)。吉非替尼能增加HCC827细胞中的SIRT1表达,降低survivin的表达水平,呈时间和剂量依赖性。结论 Survivin在非小细胞肺癌组织中高表达,而大部分SIRT1基因呈低表达状态。survivin与SIRT1表达呈负相关。在细胞水平上,吉非替尼能增加SIRT1的表达从而降低survivin的水平。提示两者在非小细胞肺癌的发生发展中可能发挥重要作用。     

血必净注射液对急诊重度脓毒症患者凝血功能影响

目的 探讨血必净注射液治疗急诊重度脓毒症患者的疗效,及其对机体凝血功能的影响。方法 采用随机数字表法将78例脓毒症患者分为对照组（n=39）和血必净组（n=39）,两组患者均按照《2016年脓毒症和感染性休克处理国际指南》给予常规抗脓毒症集束化治疗,血必净组在常规治疗基础上给予血必净注射液治疗,对照组给予等量氯化钠注射液治疗。检测并比较两组患者治疗前和治疗7 d后血小板计数（platelet count,PLT）、凝血功能、血栓弹力图数值结果,以及两组急性生理学和慢性健康状况评价系统Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ）评分、急诊重症监护室住院时间和28 d病死率。结果 治疗7 d后,血必净组患者PLT计数显著较前上升,纤维蛋白降解产物（fibrin/fibrinogen degradation products,FDP）较前明显下降（P均<0.05）;对照组患者PLT计数依旧下降（P <0.01）。治疗7 d后,血必净组患者FDP、D-二聚体低于对照组（P <0.01）,凝固时间明显缩短,...     

浅析质量控制在征兵体检检验中的重要性

向国防事业输送身体合格、政治合格的优秀青年是保障祖国繁荣昌盛的重要前提,而把好体检关是第一关口。自上世纪80年代起,我们单位一直承担本地区冬季征兵体检检验工作,工作中我们做到既能严格把握好检验标准,不放过一个不合格应征人员,又能结合各个检验项目的特殊性,在体检前宣教告知、事后总结提高,既不无辜打击每位应征青年报效祖国的积极性,又能克服外界干扰而引起不合格假阳性结果,保质保量地完成了每年度征兵检验工作,多次受到上级部门表彰。现将检验资料进行汇总与分析,以突出显示每个步骤中的质量控制在征兵工作中的重要性。     

糖化血红蛋白、尿微量白蛋白和餐后2小时血糖联合检测在健康体检中的价值

目的评价糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量白蛋白(m-Alb)和餐后2 h血糖(2hG)联合检测在健康体检中对糖尿病肾损伤早期诊断和治疗价值。方法以HbA1C水平分组来作相关性分析。结果健康人群中体检空腹血糖(FG)正常但HbA1C、2hG、m-Alb仍有一定阳性率。结论健康体检中联合检测以上项目可有效起到降低糖尿病的漏诊率。     

调节性T细胞在支气管哮喘发生机制中的研究

支气管哮喘患者外周血CD4+CD25+Treg表达明显减少,功能下降,所分泌免疫抑制作用的细胞因子IL-10也明显表达下降,二者呈正相关,说明调节性T细胞及其所分泌的细胞因子在支气管哮喘的发生机制中发挥着重要的作用.