组织工程心肌研究中心肌肌钙蛋白T及细胞间隙连接蛋白43免疫组化检测结果的观察与分析

目的 建立组织工程心肌研究中系统观察免疫组化检测结果的程序与方法.方法 取新生大鼠心脏制作石蜡组织切片;用0.25%胰酶消化法分离原代新生大鼠心肌细胞,一部分进行细胞爬片培养,一部分与液态胶原混合构建组织工程心肌并施加力学拉伸刺激,制作组织工程心肌石蜡组织切片.对三者分别进行心肌肌钙蛋白T(cTnT)及细胞间隙连接蛋白43(Cx43)抗体的免疫组化染色.比较观察天然心肌组织、体外培养心肌细胞及组织工程心肌组织免疫组化的检测结果,对其形态结构的变化进行综合分析.分别选取5个不同视野对细胞总数和cTnT阳性细胞进行计数,计算百分比.在细胞和再造心肌组织培养过程中观察自发收缩的细胞区域与cTnT着色区域的关系.结果 天然心肌和组织工程心肌切片分别反映了天然在体心肌和体外构建心肌的细胞形态和组织结构特征;心肌细胞爬片显示了体外心肌细胞与非心肌细胞的形态,以及随体外培养时间的延长其形态和数量比例的改变.细胞在体外培养时间越长,成纤维细胞比例越高.尽早将分离的原代新生大鼠心肌细胞与液态胶原混合体外再造心肌组织进行三维拉伸培养有助于抑制其中的成纤维细胞的增殖速度.将分离细胞爬片培养4h后可相继观察到能自发收缩的细胞,其收缩区域与染色片中cTnT的着色区域基本相符;再造的组织工程心肌的收缩自拉伸后48h开始,逐渐从单个细胞到肌柬再到整条再造心肌,频率逐渐加快,从1～2/min到5～10/min.结论 建立了观察与分析组织工程心肌免疫组化结果的程序和方法,为优化实验设计与条件提供了客观参数,也为构建其他组织的形态学观察与分析方法提供了有利借鉴.     

老年无症状caroli病1例

病人,男,72岁.体检时B超检查发现"肝脏多发性囊性占位".查体:营养较差,巩膜皮肤无黄染,未见蜘蛛痣及肝掌,胸腹壁未见曲张静脉,心肺未见异常,肝脾肋下未及,肝区无叩痛,腹水征(-).     

力学刺激在工程化心肌组织结构和功能改建中的作用研究

目的 探索力学刺激在工程化心肌组织结构和功能改建中的作用.方法 将分离并培养的新生大鼠心肌细胞与添加了Matrigel的液态Ⅰ型胶原混合,在环形槽中铸成环状心肌细胞/胶原条带.构建的条带在环形槽中培养7天后取出,在对其施加10%的静态拉伸力的情况下,再培养7天.通过光学显微镜、常规HE染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察等对构建的组织工程化心肌组织进行评价.结果 工程化心肌组织在力学刺激组的第2天可观察到局部跳动的区域,随时间的延长跳动的区域逐渐增多,强度逐渐增大,并最终形成一致跳动.而对照组未经力学拉伸刺激的工程化心肌组织则未能形成一致跳动.组织学和免疫组织化学染色研究结果显示,构建的工程化心肌组织经力学刺激,心肌细胞比较均匀地分布在整个条带中,且多数沿拉伸方向伸展,胞核呈长梭形,其形态类似于天然成熟心肌组织.透射电镜观察显示,条带中心肌细胞含有排列整齐的肌原纤维,并沿着细胞的长轴方向伸展,肌小节结构和Z带清晰可见.结论 力学刺激可以更好地促进工程化心肌组织的结构和功能改建,使其更接近正常心肌组织.     

CYFRA21—1，CA125和LPA联合检测诊断卵巢恶性肿瘤

【目的】探讨肿瘤标志物联检与卵巢恶性肿瘤诊断的关系,提高卵巢恶性肿瘤的诊断率。【方法】采用电化学发光法检测CYFRA21-1和CA125,化学比色法测定LPA,将卵巢恶性肿瘤组的测定结果与正常女性时照组及卵巢良性肿瘤组进行比较。【结果】卵巢恶性肿瘤患者血清CYFRA21-1、CA125和血浆LPA水平及阳性率均明显高于正常女性对照组及卵巢良性肿瘤对照组（P〈0．05）;三项标志物组合检测的敏感性和诊断准确性均比单项检测高。【结论】联合检测血清中的CYFRA21—1、CA125和血浆LPA,可显著提高卵巢恶性肿瘤的诊断率。     

汶川大地震境外医疗队救援模式及流程分析

目的回顾性分析汶川大地震期间赴四川省11支境外医疗队医疗救援总体情况、工作模式及流程,以期为我国医务工作者应对未来重大突发事件的医疗救治工作提供参考。方法收集国务院和四川省抗震救灾指挥部关于国外医疗救援的信息统计数据,以及笔者直接参与境外救援医疗队的工作统计。对收集到的资料进行归纳、分析、汇总,采用EXCEL软件建立数据库,运用SPSS11.0对数据进行处理,作描述性统计分析。结果11支境外医疗队根据具体情况采取不同的工作模式,严格按照科学、规范的工作流程开展医疗救治,取得了良好的效果。结论境外医疗队严谨的工作态度,耐心细致的服务和科学的工作方法值得中国医务工作者认真学习和借鉴。     

实施整体护理中护士应具备的素质

整体护理的推行与实施,对护理工作者的业务素质、工作技能及思想观念提出了更高的要求。重视和加强临床护士整体素质和能力的提高及再教育,是整体护理顺利实施的重要保证,也是医院管理的当务之急。     

胰岛素对糖尿病大鼠肝线粒体氧自由基和氧化磷酸化的影响(英文)

目的:研究胰岛素对糖尿病大鼠肝线粒体功能,质子ATP酶活力及超氧阴离子的影响。方法:大鼠尾静脉注射四氧嘧啶,造成糖尿病动物模型。离心制备线粒体,测氧仪测定态3呼吸率、态4呼吸率、呼吸控制率和磷氧比。用化学发光法测定超氧阴离子生成量,质子ATP酶合成与水解活力分别采用荧光素-荧光素酶法和无机磷法测定。结果:(1)糖尿病大鼠超氧阴离子生成增多,皮下注射胰岛素治疗9周后,Q_2~(·-)生成量减少。(2)在糖尿病状态下,胰岛素治疗能提高质子ATP合成酶活力,降低质子ATP水解酶活力。(3)胰岛素通过改善态3呼吸率调节呼吸控制率和磷氧比。结论:胰岛素能抑制O_2~(·-)生成,提高ATP的合成,改善肝线粒体氧化磷酸化功能。     

幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达

目的 构建幽门螺杆菌（Hp)vac A基因片段原核表达载体并进行表达。方法 采用PCR技术,扩增Hp vac A基因的1个片段B,并克隆入pGEM－3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSETA-B。结果 经过转化E.coli BL21 DE3(plysS)后,诱导表达出相对分子质量（Mr)为33000的蛋白。SDS－PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的47．8％。清中目的蛋白占全菌总蛋白的10．9％。ELISA和Western blot分析表明,表达蛋白能与免抗Vac A多抗结合。结论 成功地构建原核表达载体pRSETA-B,为进一步探讨该片段的生物学活性,以及临床上通过检测患者血清预测Hp的感染提供了实验依据。     

食管鳞状上皮细胞癌及癌旁组织中HPV11 L1基因克隆及序列比较

目的 克隆食管癌组织和癌旁组织中HPV11型主要衣壳蛋白L1基因,并比较两个序列间的同源性。方法 以食管癌组织和癌旁组织纯化的总DNA为模板,根据HPV11型L1基因的保守区分段设计引物。分两段扩增HPV L1基因,克隆入质粒载体中,pGEM-3Zf(-)以双脱氧法双向测定目的片段的序列,并按接出该片段的全序列,比较两个序列间的同源性,以及与已知基因序列的差异性。结果 从4例食管癌患者食管癌组织和癌旁组织中,分别克隆到1株HPV11型L1的编码序列M1和M2,两序列间的同源性极高,仅在个别位点存在差异。与GenBank中登录的HPV序列NC001525．1（HPV－11）、M14119．1（HPV－11）和AF217526．1（HPV－11）相比较大部分相同。结论 成功地构建了HPV11型L1基因上游片段pGEM－3Gf(-)和下游片段pGEM-3Zf(-)的重组克隆,为深入研究HPV的感染与食管癌发病机制的关系奠定了基础。     

低分子肝素钙对老年慢性肺心病患者血液流变学的影响

目的观察低分子肝素钙对老年慢性肺心病患者血液流变学的影响.方法根据肺心病的诊断标准选择30例老年慢性肺心病患者进行低分子肝素钙治疗,并进行治疗前后血液流变学各项指标的检验和分析.结果30例老年慢性肺心病患者用药前后血液流变学对比,各项指标均有非常显著差异(P＜0.01).结论低分子肝素钙可改善老年慢性肺心病血液流变学的各项指标,且安全.