经自身肿瘤细胞激活的脑胶质瘤特异性CTL免疫表型变化研究

近年来肿瘤的过继免疫治疗研究发展迅速，肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）在动物肿瘤模型和临床应用的初步研究也取得了令人鼓舞的成就，研究报道，与其它恶性肿瘤相比，胶质瘤浸润的淋巴细胞（GIL）数量较少[1]，为了获取GIL类似的抗肿瘤活性淋巴细胞，我们将经丝裂霉素C处理过的胶质瘤细胞与自体淋巴细胞进行混合培养，诱导产生胶质瘤特异性细胞毒T淋巴细胞（G－S－CTL），并对G－S－CTL的细胞表型进行了研究分析，结果报告如下：1材料和方法1.1自体胶质瘤细胞无菌取手术切除的脑胶质瘤组织，剔除表面血块，浸于含青霉素10OP／ml、链…     

颅脑损伤术后脑移位再次手术27例原因分析

重型闭合性颅脑损伤 ,手术治疗往往是治疗中极为重要的环节之一。有部分患者首次手术后仍出现或再出现脑移位 ,被迫再次手术。 1994年 1月～1999年 6月笔者共治 2 7例此类患者 ,现对其临床表现、发病机制及临床处理分析如下。临床资料一、一般资料　本组男 19例 ,女 8例 ,年龄 13～ 5 8岁 ,平均年龄 38.1岁。车祸伤 2 2例 ,坠落、打击伤各 2例 ,损伤原因不明 1例。 2 1例首次手术在外院进行 ,术前格斯拉哥 (ＧＣＳ)评分、临床资料等欠详 ;6例在本院首次手术 ,术前ＧＣＳ评分 :5～7分 4例 ,8～ 12分 2例。首次、再次手术血肿类型分别为 :硬膜…     

人肺癌细胞株A549自分泌抑制因子的初步研究

本文应用人肺癌细胞株A549,在无血清的萃取条件培养液中,37℃,5％CO_2,培养8天以后,收集培养上清,经12000rpm30分钟,去除沉淀,上清装入透析袋,用聚乙二醇包埋,快速浓缩而成粗提物,即称为该细胞的自分泌抑制因子(ACIF),并对它的作用进行初步探讨。我们利用人源5种传代肿瘤细胞株A549、K562、HL60、Smmc7721、BT325为靶细胞,以不同浓度的ACIF进行生长抑制试验,采用台酚兰染色计数法及~3H-TdR掺入法,两法结果基本一致,对亲源细胞A549,则随浓度升高抑制作用增强,而对其它ACIF的生物学特性及其体内作用,有待研究。     

反转录病毒载体G1NaCⅨ的构建及其在离体细胞中的表达

目的构建高效、安全、可用于基因治疗的反转录病毒载体G1NaCⅨ。方法用限制性内切酶Bg1Ⅱ和HindⅢ将CMV－FⅨcDNA从质粒pCMVⅨ－10上切下，将该片段与BamHⅠ和HindⅢ双酶切后的G1Na连接，连接后的载体经鉴定连接正确后即为新载体G1NacⅨ，将G1NaCⅨ通过包装细胞PA317导入小鼠成纤维细胞NIH3T3、小鼠成肌细胞C2C12和人纤维肉瘤细胞HT1080中，选择培养两周后分别测定G1NaCⅨ在上述细胞中的Ⅸ因子表达量。结果（1）经酶切电泳鉴定，G1NaCⅨ连接正确；（2）G1NaCⅨ在N1H3T3中的Ⅸ因子表达量为60ng/106细胞·天-1，在C2C12中的Ⅸ因子表达量为1580ng/106细胞·天-1，在HT1080中的Ⅸ因子表达量为3600ng／106细胞·天-1，其中80％～90％的Ⅸ因子具有凝血活性。结论构建成功的反转录病毒载体G1NaCⅨ在C2C12和HT1080细胞中均能高效表达。     

红细胞对LAK细胞增殖及其杀伤活性的增强作用

红细胞对ＬＡＫ细胞增殖及其杀伤活性的增强作用章红，江紫生，汪泱，袁铿，戴志芳，袁芳（江西省医学科学研究所抗肿瘤研究室南昌３３０００６）近年来，淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）联合重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）的过继性免疫治疗恶性肿瘤已在临床上广泛试用...     

穿梭质粒pCEPmB7的构建及其对小鼠宫颈癌U14细胞内生长的影响

目的：构建可有于肿瘤基因治疗研究的基因表达载体pCEPmB7,并研究该质粒转染小鼠宫颈癌U14细胞后的体内致瘤性变化。方法：（1）用限制性核酸内切酶HindⅢ和XboⅠ分别对质粒pCEP4和pLXSNmB7进行双酶切，分别回收10.4kb的线性pCEP4DNA片断和0.9kb的mB7cDNA片断，将上述两片断混合，在T4－DNA连接酶的作用下连接，连接液转化受体菌TG－1，琼脂糖凝胶电泳鉴定连接是否正确；（2）用电穿孔法将pCEPmB7转染U14细胞，转染后的细胞经HygromycinB(200μg/ml）选择培养2周后得到选择阳性混合克隆细胞U14／pCEPmB7，用流式细胞仪检测U14／pCEPmB7细胞中B7表达阳性细胞的百分率；（3）将U14和U14／pCEPmB7细胞分别以不同的剂量皮下接种昆明鼠，找出两种细胞的最小成瘤剂量（minimal tumorigenic doses,MiTD）。结果：（1）连接后的新质粒经双酶切和单酶切后，琼脂糖凝胶电泳鉴定连接正确，该质粒即为pCEPmB7;(2)流式细胞仪检测结果显示；U14细胞的B7表达阳性率为5．24％，U14/pCEPmB7细胞的B7表达阳性率为48．52％；（3）最小成瘤剂量结果显示U14细胞的MiTD为4×14^4细胞，U14／pCEPmB7细胞的MiTD为4×10^5细胞。结论：U14细胞被转染了pCEPmB7后，其细胞表面有共刺激分子B7阳性表达的百分率显提高，其在小鼠体内的最小成瘤剂量也明显增大，显示U14／pCEPmB7细胞在小鼠体内的致瘤性下降，免疫原性有增强。提示穿梭质粒pCEPmB7可用于肿瘤基因瘤苗的制备。     

小鼠TIL细胞体外实验性扩增及其抗肿瘤作用的研究

本研究通过在普通培养液中加入一定浓度的ＰＨＡ（植物凝集素）改善ＴＩＬ细胞的培养体系，延长其培养时间，使ＴＩＬ细胞在体外大量扩增，这种扩增后的ＴＩＬ细胞与常规培养的ＴＩＬ细胞在小鼠体内具有相同的抗肿瘤作用。这项研究为临床上更多获取ＴＩＬ细胞进行了有意义的探索。