HBV-DNA与HBVPreS1 Ag、HBeAg应用价值的探讨

目的探讨HBV．DNA、HBVPreS1 Ag和HBeAg3指标在提示乙型肝炎病毒复制、病情转归以及疗效观察等方面的作用。方法采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA．以〈5．0×10^2拷贝／mL为阴性。采用ELISA法检测“乙肝两对半”和HBVPreS1 Ag。结果151例乙肝病人中有58例HBeAg阳性标本．HBV-DNA与HBeAg、HBVPreS1 Ag阳性符合率分别为96．6％、87．9％。71例接受抗病毒治疗和80例未接受抗病毒治疗病人HBV-DNA与HBV PreS1 Ag阳性一致率分别为84．5％和46．6％，差异有统计学意义（X^2=20．944，P〈0．01）。结论HBeAg阳性仍是现阶段乙型肝炎病毒复制监测的理想指标，HBVPreS1 Ag可作为HBV感染及既往或现症病毒复制的支持性指标，但不适于作为抗病毒治疗监测指标。     

虎杖水提液对非酒精性脂肪肝大鼠的干预效果

目的分析虎杖水提液对非酒精性脂肪肝大鼠进行干预的效果。方法以高脂饲料饲养Wistar大鼠12周,诱发NAFLD,然后转以基础饲料饲养4周,并对NAFLD大鼠进行虎杖水提液干预与对照实验。通过生化检测方法分析各组大鼠血清和肝组织甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖水平的变化。结果干预组大鼠的肝组织和血清的甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖含量均低于对照组,其中肝、血总胆固醇和血清甘油三酯含量的差异显著(P<0.05)。结论虎杖水提液能够调整和改善NAFLD大鼠的脂肪和糖代谢,降低肝组织和血清甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖水平。     

瘦素与非酒精性脂肪肝的关系

目的：探讨非酒精性脂肪肝患者（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）皮下、大网膜脂肪组织瘦素mRNA表达水平与血浆瘦素、三酰甘油、体重指数、腰臀比（WHR）的相关性。方法：用SYBR Green I实时定量RT—PCR方法检测NAFLD患者脂肪组织瘦素mRNA的表达水平，用ELISA方法测定血浆瘦素水平。结果：NAFLD各组皮下及网膜脂肪组织瘦素基因表达和血浆瘦素浓度较对照各组显著升高（P〈0.05），瘦素基因表达和血浆瘦素浓度（r=0.69，P〈0．05）与三酰甘油（r=0.32，P〈0．05）、体重指数（r=0.57，P〈0．05）、腰臀比（r=0.50，P〈0.05）相关。结论：肥胖和非肥胖的NAFLD患者存在高瘦素血症及脂肪组织瘦素mRNA高表达，提示NAFLD患者存在瘦素抵抗。     

虎杖提取液对非酒精性脂肪肝大鼠肿瘤坏死因子α基因表达的影响

应用RT qPCR方法检测分析非酒精性脂肪肝动物模型药物干预效果.经过4周的干预试验,干预组大鼠脂肪组织的TNF-αt mRNA相对水平比对照组显著下降(t=2.452,P=0.022).干预组的肝组织甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖含量均低于对照组,其中总胆固醇含量的差异显著(t=2.555,P=0.019).研究表明,虎杖水提液可以显著地降低NAFLD大鼠脂肪组织的TNF-α mRNA水平,也可以降低大鼠肝组织甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖的含量,在调节肝脂、肝糖代谢和改善肝细胞脂肪变性具有一定效果.     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和基因型分布

目的了解广州地区腹腔感染产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型分布。方法采用纸片扩散法(K-B法)对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行抗菌药物的敏感性试验,通过PCR法分析其所产生基因型。结果产ESBLs菌株对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶和哌拉西林-三唑巴坦的敏感率为42.1%～76.3%,而对其他抗菌药物敏感率较低,对头孢噻肟的敏感率仅为0%～2.6%;基因型分析显示有35株产TEM型酶,14株产SHV型酶,29株产CTX-M型酶。结论腹腔感染产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药严重,CTX-M型ESBLs多见。     

虎杖复方提取液对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织瘦素mRNA水平的影响

以虎杖复方提取液干预NAFLD大鼠，为期4周，通过RT—qPCR方法检测干预组和对照组大鼠脂肪组织的瘦素mRNA相对水平变化，并以生物化学方法检测血脂和血糖的变化。实验结果显示，干预组大鼠脂肪组织的瘦素mRNA相对水平显著增加（P〈0．05）、血清的甘油三酯和总胆固醇水平则显著下降（P〈0．05），虎杖复方提取液能够显著提高脂肪组织瘦素的mRNA水平和改善血脂代谢状况，但会使得干预组大鼠的血清葡萄糖水平稍有上升（P〉0．05）。     

两种荧光定量法检测HCV RNA结果的比较

目的建立双探针荧光定量HCV RNA检测方法,分析其定量检测HCV RNA的灵敏度和特异性以及HCV RNA含量与患者病情的相关性。方法选取100例抗HCV抗体阳性患者,包括慢性肝炎患者45例、肝硬化患者30例、肝癌患者25例的样本,用双探针荧光定量法和两种商品荧光定量试剂方法进行HCV RNA检测,另观察近期196例抗HCV抗体阳性和48例抗HCV抗体阴性样本荧光定量PCR HCV RNA含量与肝功能的相关关系。结果荧光定量双探针法阳性率为93％（93／100）;两种商品荧光定量试剂方法阳性率分别为84％（84／100）和79％（79／100）,经卡方检验差异有统计学意义（P〈0．05）。196例中抗HCV与HCV RNA阳性一致率为57．1％（116／196）,其中伴肝功能改变49．0％（96／196）。HCV RNA含量与AST和ALT异常程度无显著相关性（P〉0．05）,相关系数分别为0．4293及0．3899。HCV RNA高拷贝数患者肝功能异常率为85．2％（69／81）,低拷贝数者肝功能异常率为40．9％（47／115）,经卡方检验,X^2=38．63,差异有统计学意义（P〈0．001）。结论双探针荧光定量提高了HCV RNA检测的灵敏度和特异性,HCV RNA含量与患者肝功能损伤程度无明显相关性。     

检测粪便c-ki-ras2基因点突变筛查大肠癌

目的：研究大肠癌患者粪便c-ki-ras2基因外显子1第12位密码子点突变情况,探讨检测粪便c-ki-ras2基因点突变对筛查大肠癌的价值.方法：提取2005年于广州市第一人民医院就诊的25例大肠癌患者粪便、肿瘤组织和癌旁组织黏膜的DNA,结合限制性内切酶Mva Ⅰ,用普通聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）及突变富集型聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（mutant-enriched PCR-RFLP）,分析c-ki-ras2基因外显子1的12位密码子第一、二位碱基是否存在点突变;用同样方法分析正常对照组17例.特异性分析采用经克隆测序已知突变型（12GGT→AGT）及野生型（12GGT）的c-ki-ras2外显子1片段.取同期住院的166例胃肠道疾病患者大便潜血试验（FOBT）检查结果作对照.结果：25例大肠癌患者粪便中,突变富集型PCR-RFLP检出7例k-ras基因点突变（28%）,其中6例在相应组织中也检出突变,粪便与组织DNA检测结果高度一致（Kappa=0.896,P＜0.01）.正常人粪便未检出突变,两组相比差异有显著性（P＜0.05）.癌旁黏膜均未发现突变.普通PCR-RFLP只检出其中3例（12%）.c-ki-ras2点突变更多见于左半结肠癌,与结肠其他部位相比差异有显著性（P＜0.05）.肠癌患者与其它胃肠道疾病者FOBT阳性率无差异,分别为58%、46%（P＞0.05）.结论：粪便c-ki-ras2基因点突变检测特异性达100%,比FOBT（50.6%）高,但单个基因的检测敏感性较FOBT低（28% vs 51.2%,P＜0.05）,粪检基因诊断大肠癌有一定应用前景;突变富集型PCR-RFLP较普通PCR-RFLP有更高的检出率.     

盐酸二甲双胍对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子α基因表达的影响

 [目的]以逆转录（RT）和实时定量聚合酶链式反应（real-time qPCR）方法检测和分析非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠模型的药物干预效果.[方法]以高脂饲料饲喂雄性Wistar大鼠12周诱发NAFLD,然后转以基础饲料饲养,并分别进行盐酸二甲双胍干预与蒸馏水灌喂对照,每组8只,为期4周.从大鼠脂肪组织提取总RNA并逆转录成为cDNA,通过real-time qPCR检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA的相对水平,以t检验分析两组间数据的差异.[结果]干预组大鼠脂肪组织的TNF-α mRNA相对水平平均值（0.063±0.006）比对照组（0.126±0.015）下降,其差异显著（t=4.662,P=0.001）.[结论]盐酸二甲双胍可以显著地降低NAFLD大鼠脂肪组织TNF-α基因的表达水平,能够调节肝脏脂肪代谢和改善肝细胞脂肪变性.     

虎杖复方对非酒精性脂肪肝大鼠的干预与脂肪组织相关基因表达的变化

目的 在基因表达水平上分析虎杖复方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型的干预效果及其作用机制.方法 以高脂饲料饲养Wistar大鼠诱发NAFLD并进行虎杖复方提取液干预,通过RT-qPCR方法检测干预组和对照组大鼠脂肪组织瘦素、脂联素、肿瘤坏死因子α、抵抗素和解偶联蛋白2的mRNA相对水平,以t检验分析两组间数据的差异.结果 对比于对照组,干预组大鼠脂肪组织的瘦素mRNA显著增加(P<0.05)、脂联素mRNA显著下降(P<0.05)、解偶联蛋白2mRNA有所下降(P>0.05).与此同时,干预组和对照组样品的瘤坏死因子α和抵抗素的mRNA均未被检测到.结论 虎杖是TNF-α的抑制药物,可有效改善肝组织的脂肪变性和炎症的状况.有助于增加脂肪组织瘦素mRNA水平和改善血脂水平.