荧光PCR检测CYP2C19基因分型分析性能验证程序研究

目的探讨荧光聚合酶链反应(PCR)检测CYP2C19基因分型分析性能验证程序。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》对荧光PCR方法检测CYP2C19基因分型进行准确性、精密度、灵敏度、特异度、临界值和最低检测限等的相关性能验证。结果荧光PCR与测序法检测CYP2C19基因分型结果符合率为100%;荧光PCR检测CYP2C19基因分型精密度用CV表示,2G、2A、3G和3A反应体系FAM和ROX荧光通道结果CV均小于10%;以测序法结果为标准,诊断灵敏度和特异度结果均为100%;验证cut off值2G反应体系△Ct为0.95,2A反应体系△Ct为0.84,均小于设定的cut off值5;验证的cut off值3G反应体系△Ct为1.47,3A反应体系△Ct为1.43,均小于设定的cut off值7;最低检测限为10ng/μL。结论荧光PCR检测CYP2C19基因分型各项性能验证指标符合要求,可以在实验室内开展。     

临床基因扩增实验室的质量控制

本中心临床聚合酶链式反应(PCR)实验室是通过了ISO15189的实验室,而且一直在临床检测工作中差错率也非常低,作者依据ISO15189质量体系和PCR实验室特殊的《医疗机构临床扩增实验室管理办法》的要求,结合自己的工作进     

距离法综合评价医院临床科室工作

本文拟用距离法综合评价我院五个病区的医疗统计指标完成情况 ,并进行排序。资料及方法本文资料来源于我院 1999年各病区医疗统计指标。评价指标包括年床位周转次数 (Ｘ1)、实际病床使用率 (Ｘ2 )、治愈好转率 (Ｘ3)、病房抢救成功率 (Ｘ4)、出院者平均住院日 (Ｘ5)。表1为 1999年各病区五个指标完成情况 :表 1　各病区统计指标完成情况 ( ｙｉｊ)指标病区一病区二病区三病区四病区五Ｘ1 (高优 ) 7 4 4 3 1 2 6 4 4 9 1Ｘ2 (偏高优 ) 77 2 93 2 1 1 2 81 0 1 883 7Ｘ3(高优 ) 86 4 81 1 87 3 79 784 6Ｘ4 (高优 ) 84 2 75 975 0 92 5 9…     

中段尿培养1 348份标本病原菌分布及其耐药性分析

目的分析了解尿路感染患者中段尿培养标本中病原菌分布及其耐药性,为临床用药提供参考和依据。 方法对2015年6月至2016年5月期间,南京金域医学检验所收集的来自江苏全省13个地市州的500多家基层医院送检的尿路感染患者1 348份标本,采用血琼脂平皿和麦康凯平皿35℃培养箱培养方法进行中段尿培养;然后,用VITEK COMPACT全自动微生物分析系统和API鉴定板条对菌落计数>10⁵ cfu/ml的革兰阴性菌和菌落计数>10⁴ cfu/ml革兰阳性菌进行菌种鉴定,并根据2015年美国临床实验室标准化协会标准判断药敏结果。 结果从1 348份中段尿培养标本的450份标本中分离出病原菌,阳性率为33.38%。其中革兰阴性菌358株,占79.56%;革兰阳性菌76株,占16.89%;真菌16株,占3.56%。选取全部菌种中6类主要菌(大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌)进行药敏分析,其中大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、头孢呋辛的耐药率分别为84.16%、80.37%、87.12%、93.98%;粪肠球菌对四环素、利福平、奎奴普汀-达福普汀、米诺环素的耐药分别为81.40%、86.67%、100%、83.33%。 结论大肠埃希菌和粪肠球菌是尿路感染的主要致病菌。病原菌对青霉素、头孢类、四环素类和利福霉素类耐药严重。分析尿路感染病原菌抗菌药物敏感性试验结果对指导临床合理使用抗菌药物有着重要意义。     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA假阴性结果原因分析

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus, HBV-DNA)产生假阴性结果的原因,以控制和减少假阴性结果。 方法依据第三版《临床检验操作规程》和2013版中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)-CL36《医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明》,对当天送检的79份HBV DNA定量项目出现HBV-DNA假阴性的临床标本进行复查,并通过试验研究对试剂、仪器、操作过程和环境等原因分别进行确认。首先,分析2015年5月13日检测的79份临床送检的HBV-DNA定量检测血清标本和质控品的仪器原始结果,排除试剂、仪器和人员问题;其次,5次重复实验验证HBV-DNA定量结果为10⁷ IU/ml的临床血清样本是否因主要操作步骤不规范导致HBV-DNA定量检测结果下降(偏倚>7.5%)。选择第一次检测结果在6次方以上的血清标本2份,平行做5个复孔,其中1份标本做5个复孔,即用取上清液时所弃沉淀分别以不弃掉沉淀、弃掉1/4沉淀、2/4沉淀、3/4沉淀和全部沉淀分为A0、A1、A2、A3、A4组,比较弃上清液中沉淀量对HBV DNA定量检测结果的影响。另1份标本5个复孔在加模板量时,以正常加2 μl为对照组A0,其他4孔分别加1.5、1、0.5、0.1 μl模板为A1、A2、A3、A4组,分析模板加样量的不同对HBV DNA定量检测结果的影响;第三,挑选第一次HBV DNA定量检测结果为不同次方的10份血清标本,其中5份分别加入1 μl除胶剂,另5份分别加入1 μl含氯消毒液,验证是否因除胶剂或含氯消毒液导致HBV-DNA定量检测出现假阴性结果(偏倚>7.5%)。 结果操作过程中弃上清液时,A1~A4组与A0比较,各孔的偏倚均<7.5%,无差异。加入不同量的模板,A1和A2与A0比较,无差异(偏倚均<7.5%),随着模板加入HBV DNA量的减少,A3和A4孔HBV DNA值逐渐降低,偏倚均>7.5%。加入商用除胶剂1 μl后的检测结果与初次检测结果比较,5份标本中,有3份标本检测结果偏倚>7.5%。加入含氯消毒液1 μl后的检测结果与初次检测结果比较,5份标本中有3份标本检测结果偏倚>7.5%,其中有1份标本结果由阳性(10⁷ IU/ml)变为阴性。 结论除胶剂和次氯酸气溶胶对荧光定量PCR的DNA模板扩增环节的抑制作用是产生荧光定量PCR检测HBV-DNA假阴性的主要原因,临床基因实验室应当注意使用除胶剂和次氯酸消毒液后通风与降低次氯酸在空气中浓度过高问题。     

安徽省1224例儿童微量元素检测结果分析

目的：分析安徽省儿童微量元素水平及异常率,并探讨其影响因素。方法：应用ICP-MS对1224例儿童的指尖末梢血做微量元素检测,分析检测结果。结果：不同年龄段儿童微量元素Ca、Mg、Mn、Pb、Fe、Cu、Zn的水平有所差异。随着年龄的增长,儿童对微量元素Ca、Cu的需求有所减少,对微量元素Mg、Fe、Zn的需求有所增加。1224例儿童中,微量元素检测结果异常者447例,总异常率为36.52%;其中缺乏者373例(30.47%),超标者74例(6.05%)。结论：安徽省儿童Fe、Cu、Zn的缺乏率较高,应关注儿童微量元素均衡补充,定期监测儿童微量元素水平。