5-氮杂-2’-脱氧胞苷诱导CDX2基因表达对人胃癌细胞株MKN45增殖和凋亡的影响

背景：DNA甲基化导致基因表达沉默是胃癌发生的重要步骤。近年发现肠表型调节因子CDX2在胃癌中具有抑癌基因的作用。目的：探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-aza—CdR）对人胃癌细胞株MKN45中CDX2基因表达的影响及其对细胞增殖和凋亡的作用。方法：以不同浓度5-aza—CdR（2．5、5、10μmo]／L）处理胃癌细胞株MKN45,甲基化特异性PCR（MSP）检测CDX2启动子区甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测CDX2mRNA和蛋白表达：CCK8法检测MKN45细胞增殖活性,AnnexinV．FITC／PI检测细胞凋亡和Hoechst33258染色观察其凋亡形态：比色法检测caspase-3活性。结果：MKN45细胞中CDX2基因启动子区高甲基化．CDX2mRNA表达极低且蛋白不表达：经3种浓度5-aza-CdR处理72h后．MKN45细胞CDX2基因启动子区高甲基化发生逆转．CDX2mRNA和蛋白表达均上调。与对照组相比,5-aza-CdR呈剂量依赖性地抑制MKN45细胞增殖和促进凋亡（P〈0．05）：Hoechst33258染色示细胞核致密浓染、细胞核碎裂;caspase-3活性随着5．aza．CdR浓度的增加而升高（P〈0．05）。结论：MKN45细胞中CDX2基因表达缺失可能与其启动子区CpG岛高甲基化有关;5-aza—CdR能有效逆转CDX2基因的异常甲基化．诱导其再表达．并抑制MKN45细胞增殖和促进凋亡．该作用可能与caspase-3活性有关．     

鸟苷酸环化酶C及尾型同源盒转录因子-2在胃腺癌中的研究进展

研究发现,鸟苷酸环化酶C(GC-C)与尾型同源盒转录因子-2(CDX-2)在胃黏膜异位表达,与胃腺癌及其发生的早期事件肠化生关系密切,这为我们在胃腺癌的早期发现、一级预防、治疗及预后研究方面提供了新思路.     

shRNA抑制GC-C基因表达对人胃癌SGC-7901细胞生物学功能的影响

目的 研究靶向鸟苷酸环化酶C(GC-C)的短发夹RNA(shRNA)对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的影响.方法 构建针对人GC-C基因的shRNA真核表达载体,将其转染人人胃癌SGC-7901细胞,采用半定量RT-PCR和Westem blotting法检测细胞中GC-C在mRNA和蛋白水平的变化.以CCK-8法、流式细胞术和原位末端标记法检测转染GC-CshRNA真核表达载体的SGC-7901细胞增殖、凋亡及细胞周期等生物学指标的变化.结果 经DNA测序鉴定,所得到的表达载体插入片段序列与GenBank中的序列一致.shRNA-GC-C真核表达载体转染能有效抑制GC-C基因的表达,以shRNA-GC-CⅢ序列的抑制效果最佳.转染GC-C shRNA真核表达载体后SGC-7901细胞的增殖能力受到抑制(P<0.05);细胞形态发生改变,细胞体积缩小,核固缩,染色质浓缩聚集于核膜;流式细胞术检测显示G7峰前出现亚二倍体峰,转染48、72h后凋亡率分别为5.47%和5.63%(P<0.05).结论 靶向GC-C基因的shRNA可有效抑制人胃癌SGC-7901细胞生长,并促进细胞凋亡,该作用与下调靶基因GC-C的表达有关;GC-C可能是胃癌治疗的一个潜在靶点.     

HS-AFP在肝癌早期诊断及鉴别诊断中的价值

目的：探讨肝癌特异性甲胎蛋白（HS—AFP）对肝细胞癌的诊断及鉴别诊断价值。方法：对105例肝癌患者及151例良性肝病血清HS—AFP及AFP进行检测，并对10例HS—AFP阳性的良性肝病患者进行15个月随访观察。HS—AFP采用不连续缓冲系统PAGE结合Westernblot分离检测，AFP采用化学发光法测定。结果：105例肝癌患者HS—AFP和AFP〉200μg／L阳性率分别为60．0％和50．5％（P〉0．05），良性肝病患者HS—AFP阳性率显著低于AFP〉200μg／L的阳性率（P〈0．05）。AFP处于50～400μg／L范围的肝癌组HS—AFP阳性率为77．1％，良性肝病组阳性率为13．6％（P〈0．01），151例良性肝病中有10例HS-AFP出现阳性，其中3例于随访期间检出肝癌。11例小体积肝癌HS—AFP阳性率（45．5％）高于AFP〉200μg／L的阳性率（18．2％）。结论：HS—AFP对肝癌的诊断价值优于AFP浓度。对肝癌高危人群监测HS—AFP有助于肝癌的早期诊断。对血清AFP中低浓度升高的良恶性肝病有较高的鉴别诊断价值、     

胃癌组织中GC-C和CDX2 mRNA的表达及临床意义

目的 通过检测鸟苷酸环化酶C信使核糖核酸(GC-C mRNA)和尾型同源盒转录因子mRNA(CDX2 mRNA)在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用RT-PCR检测GC-C和CDX2 mRNA在30例胃癌及相应远癌胃组织中的表达.结果 GC-C和CDX2 mRNA在胃癌组织中表达率分别为66.7%(20/30)和63.3%(19/30),而在远癌胃组织中均为阴性.两者在肠型胃癌中的表达高于弥漫型;但与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、淋巴结转移等因素无关.两者在胃癌中的表达呈正相关(γ=0.4277,P<0.01).结论 GC-C和CDX2 mRNA的异常表达与胃黏膜癌变有关,可能在肠型胃癌的发生上起着重要作用.     

鸟苷酸环化酶C和尾型同源盒转录因子2蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达

目的 检测鸟苷酸环化酶C(GC-C)和尾型同源盒转录因子2(CDX2)蛋白在胃癌及癌前病变中的表达,并探讨两者与胃癌生物学行为的关系.方法 免疫荧光检测GC-C和CDX2蛋白在23例肠上皮化生、9例异型增生、30例胃癌及相应远癌胃组织中的表达,Western印迹检测两者在30例胃癌及相应远癌胄组织中的表达.结果 GC-c和CDX2蛋白在肠上皮化生(均为9例阳性)、异型增生(均为5例阳性)和胃癌(分别为17例、18例阳性)组织中表达阳性率均显著高于远癌胃组织(均无表达);两者在肠型胃癌中的表达均高于弥漫型(均P＜0.05),与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、淋巴结转移等因素无关;GC-C和CDX2蛋白在肠上皮化生和胃癌中两者的表达呈正相关(Spearman秩相关系数r=0.4524、0.3845).结论 GC-C和CDX2蛋白的异常表达与肠型胃癌发生发展有关,检测其变化可能有助于胃癌早期诊断.     

shRNA沉默增殖诱导配体基因抑制胰腺癌细胞生长的研究

目的 研究靶向增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)在体内外对胰腺癌细胞生长的影响,探讨其对胰腺癌基因治疗的可行性.方法 将前期构建的LV-shAPRIL感染CFPAC1细胞,MTY法及流式细胞技术分别检测CFPAC1细胞生长和凋亡.用CFPAC1细胞建立裸鼠移植瘤模型,观察瘤内注射LV-shAPRIL对瘤生长的影响.结果 LV-shAPRIL感染CFPAC1细胞96 h后,CFPAC1细胞的生长明显受抑制,与对照组及空载体组相比有显著差异(P＜0.05);同时细胞凋亡率为(17.35±0.96)%,明显高于对照组和空载体组(P＜0.05).将LV-shAPRIL局部注射到裸鼠移植瘤内,LV-shAPRIL组肿瘤生长明显比同期对照组和空载体组减缓;第27天LV-shAPRIL组肿瘤体积和重量分别为(821.8±123.3)mm3和(2.16±0.18)g,明显小于其他两组(P＜0.05).结论 靶向APRIL基因的慢病毒表达载体LV-shAPRIL在体内外抑制胰腺癌CFPAC1细胞的生长,为胰腺癌基因治疗探索新的思路.     

超声内镜在急性胰腺炎中的应用进展

急性胰腺炎(AP)是临床上常见的胰腺疾病,早期诊断和正确治疗AP及其并发症对缓解患者的症状及改善预后十分重要.超声内镜(EUS)对胰腺实质、胰胆管的分辨率较高,近年来EUS在AP中的应用逐渐增多,其在病因诊断、重症急性胰腺炎(SAP)的早期预测和内镜下治疗,以及预后预测和随访等方面发挥着重要的作用.该文就EUS在AP中...