2′,5′-寡腺苷酸合成酶的表达及其单克隆抗体的制备与应用

目的用基因工程技术表达2′，5′腺苷酸酶（2-5AS）蛋白为抗原制备单克隆抗体，供荧光素标记抗体流式细胞术检测细胞内2-5AS应用。方法将2-5AS基因片段插入到带有His．Tag的pET-30a（＋）质粒，并转化到宿主菌E．coli．BL21（DE3），ITPG诱导表达，Ni柱纯化，获得2-5AS蛋白后制备单克隆抗体。结果插入片段酶切测序证实，插入的片段与目的片段序列相符；Ni柱纯化过程中可见目的蛋白的洗脱峰；经Trieine-SDS-PAGE电泳，Western Blotting鉴定，得到表达蛋白；用该蛋白制备了2-5AS单克隆抗体。结论基因工程技术表达2-5AS获得成功，制备了单克隆抗体，为进一步应用流式细胞术检测细胞内2-5AS提供保证。     

HBcAg与前S1抗原部分基因的融合表达及其抗原性分析

我国是慢性乙型肝炎 (ＣＨＢ)高发区 ,虽然目前有多种抗ＨＢＶ药物用于ＣＨＢ的临床治疗 ,但疗效不尽人意 ,且价格昂贵。寻找治疗ＣＨＢ和慢性乙型肝炎病毒携带者的有效方法仍是当前急需解决的问题。研究表明 ,ＨＢＶ核心抗原和前Ｓ1抗原在ＨＢＶ感染清除方面具有重要的作用[1 4 ] 。本实验将ＨＢＶ核心抗原与前Ｓ1抗原部分基因融合表达 ,并对其抗原性进行分析。材料和方法一、表达载体和菌株表达载体 ｐＥＴ 11ｄ和工程菌ＢＬ2 1为Ｎｏｖａｇｅｎ公司产品。二、试剂Ｋｌｅｎｏｗ酶、Ｔ4ＤＮＡ连接酶为Ｐｒｏｍｅｇａ公司产品 ,内切酶Ｂａｍ…     

广州口岸出入境人员非典型肺炎抗体检测结果分析

[目的]对目前已研究出的严重急性呼吸系统综合征(SARS)检测方法的敏感性、特异性进行比较。[方法]用2种原理酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒对无SARS体征的出入境人员进行SARS—CoV抗体检测。[结果]对随机抽取的276份无任何SARS体征的出入境人员血清采用间接ELISA方法，阳性率为7．6％(7／92)；采用双抗原夹心ELISA方法检测，阳性率为0。[结论]此次SARS爆发前SARS—CoV未曾在人类中发生过广泛传播。     

新疆和田地区2016年甲型肝炎病毒流行株基因特征

目的了解新疆和田地区甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)流行株基因特征。方法收集新疆和田地区2016年甲型肝炎病例急性期血清标本,经核酸提取、逆转录、套式PCR、序列测定,进行HAV基因分型、主要中和抗原位点氨基酸序列分析,并与GenBank中HAV基因型和亚型代表株构建系统进化树,分析核苷酸和氨基酸序列差异或同源性。结果获得和田地区43株2016年IA基因亚型HAV流行株和2株减毒活疫苗株序列。43株流行株在VP1-2A区的核苷酸、氨基酸序列差异分别为0.0%-2.9%、0.0%-1.9%,在VP3-VP1-2A区分别为0.0%-2.2%、0.0%-0.7%;与2株减毒活疫苗株的氨基酸序列差异为0.5%-0.9%。HAV流行株的主要中和抗原位点未发现氨基酸变异,处于负向选择压力;与GenBank中中国新疆、中国四川或日本HAV序列的同源性最高。结论2016年和田地区HAV流行株为基因IA亚型且分为不同基因簇;HAV流行株和减毒活疫苗株的主要中和抗原位点氨基酸序列保守。     

卵巢妊娠9例分析

卵巢妊娠属于异位妊娠的一种,是指受精卵在卵巢内着床和发育,临床少见.1997年1月～2005年12月,我院收治卵巢妊娠患者9例.现分析如下.     

不同消毒剂对HBV核酸和表面抗原的作用效果研究

目的 评价实验室常用的消毒剂对乙型肝炎病毒(HBV)的核酸和表面抗原的作用效果。方法 采用悬液法将不同消毒剂与HBV混合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)评价消毒剂对乙肝表面抗原(HBsAg)的作用效果,通过实时荧光定量PCR评价消毒剂对HBV DNA的作用效果。结果 对于高浓度的HBV核酸和HBsAg,1%卫可(Virkon)处理1h可使HBV DNA和HBsAg变为阴性,含氯消毒剂和75%乙醇仅对低浓度HBV血清有效,而过氧化氢对所有浓度的HBV核酸和HBsAg效果都不明显。结论 当实验室发生HBV阳性血清溅洒等生物安全事故时,采用20~40倍体积1%卫可处理1h较为适宜。     

电镜观察从非典型肺炎患者尸检标本中发现衣原体样和冠状病毒样颗粒(摘要)

目的　探索 2 0 0 2年末暴发于广东等地的非典型肺炎的病原。方法　对来自广东、山西、四川省和北京市的 7例非典型肺炎死亡病人的尸体解剖标本进行超薄切片电镜观察 ,将病人肺组织提取物接种于 2 93细胞 (人胚肾转化细胞系 ) ,分离病原 ,对病人组织中和分离的病原进行免疫学鉴定。结果　超薄切片电镜观察 ,在死亡患者的肺 (7例 )、脾 (2例 )、肝 (2例 )、肾 (3例 )和淋巴结 (1例 )中均观察到衣原体样包涵体和网质小体、中间体、原生小体颗粒的存在 ,并在 3例病人肺组织中同时见到了冠状病毒样颗粒和未知的基质样结构。用RT PCR方法从 2例病人肺组织中扩增出冠状病毒RNA聚合酶基因片段。将病人肺组织提取物接种于 2 93细胞进行培养 ,取第 2代细胞作电镜观察 ,也发现衣原体样颗粒和包涵体的存在。在病人组织和培养细胞中见到的衣原体样颗粒均不能与衣原体属特异性抗体和抗肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体抗体反应 ,提示可能为新的衣原体样因子。结论　在死亡病人组织和培养细胞中发现的衣原体样和冠状病毒样颗粒 ,可能是广东等地暴发的非典型肺炎的主要病原。     

胶体金免疫层析技术同步检测甲、戊型肝炎病毒IgM抗体的研究

目的 建立胶体金免疫层析(GICA)同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒的IgM抗体的方法。方法 采用胶体金标记鼠抗人IgM单克隆抗体，制成免疫层析测试条。血清中甲、戊型肝炎的特异性抗体与测试条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动与膜上固相包被的抗原(HAAg、HEAg)、抗体(羊抗鼠IgM)结合形成肉眼可见的红色线条。结果 自制的GICA试条与EIA对比检测血清标本188份，各单项指标IgM—抗HAV、IgM-抗HEV两法总符合率依次为97．9％、98．4％，检测灵敏度可达2ng／ml。结论 用于同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒特异性抗体的GICA试条的制备条件已基本建立；其检测结果特异性强、灵敏度高、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备。     

原发性肝癌患者流行病学与乙型肝炎病毒感染调查

目的了解不同乙型肝炎(乙肝)病毒(Hepatitis B virus,HBV)流行地区的原发性肝癌(Primary liver cancer,PLC)患病和HBV感染情况,为乙肝防控及乙肝疫苗(Hepatitis B vaccine,Hep B)免疫策略的优化提供依据。方法在全国6个省份各选择1个监测地区搜索PLC病例,开展随访调查,收集血清样本进行HBV表面抗原(HBs Ag)检测,分析PLC患病率和HBs Ag阳性率。结果 2012-2015年6个监测地区共收集PLC病例3 262例。PLC年均患病率各监测地区在8.71/10万-64.48/10万之间;男、女性分别为13.58/10万、4.25/10万;70岁人群随着年龄增长呈上升趋势(趋势x~2=4 451.26,P=0.000)。在PLC病例中,男、女性HBs Ag阳性率分别为71.18%、65.83%(x~2=6.31,P=0.012);年龄别HBs Ag阳性率为65.21%-72.59%(x~2=9.01,P=0.173);民族别HBs Ag阳性率为41.67%-83.90%(x~2=85.31,P=0.000);各监测地区HBs Ag阳性率为58.56%-85.40%(x~2=90.59,P=0.000)。结论监测地区PLC患病率随年龄增长而升高,且PLC病例的HBs Ag阳性率高。建议大年龄HBV感染者定期进行肝病筛查。     

广西隆安县2006-2014年原发性肝癌回顾性调查研究

目的 探讨广西隆安县原发性肝癌流行病学特征及危险因素.方法 回顾性调查隆安县2006-2014年发病的原发性肝癌患者共2 170例,通过查阅纸质报告表、病案、肿瘤直报系统等方法收集其基本人口学资料、诊断与报告情况、乙肝病毒和丙肝病毒感染以及免疫接种情况,并对上述资料进行统计分析.结果 病例以35岁以上中老年男性为主,平均年龄(57.22±14.61)岁,男女性别比为3.50:1,壮族占绝大多数.2 170名研究对象中,457例(21.06％)患者乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阳性,10例(0.46％)抗-丙肝病毒抗体(anti-hepatitis C virus IgG,anti-HCV IgG)阳性,3例HBsAg和抗-HCV IgG均为阳性.HBsAg感染率为65.76％(457/695),丙肝病毒(hepatitis C virus,HCV)感染率为1.79％ (10/558).除24例研究对象乙肝疫苗接种史不详以外,其余均无乙肝疫苗接种史.2006-2014年粗发病率为60.50/10万,中国人口标化发病率为32.11/10万,世界人口标化发病率为43.60/10万.2012-2014年发病率出现逐年上升趋势.结论 隆安县是肝癌高发区,且近年发病上升.乙肝病毒感染是隆安县肝癌发病主要危险因素之一.