中药诱导肝癌细胞凋亡的实验研究进展

原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率呈上升趋势,全世界每年新增30万-100万病例,且已居我国癌症的第二位,在城市仅次于肺癌,在农村次于胃癌,年病死率为1.46-4.60／万,平均2.04／万。我国每年因肝癌而死亡的人数约20余万,约占世界肝癌死亡人数45％^[1]。     

STAT3反义寡核苷酸对HepG2肝癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的 探讨STAT3反义寡核苷酸对HepG2细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的诱导作用。方法： HepG2细胞体外培养，人工合成并硫代修饰STAT3 ASODN，通过脂质体转染进入HepG2细胞，倒置显微镜下观察细胞形态学变化、 MTT法检测细胞增殖抑制程度，原位末端标记（Tunel）法检测细胞凋亡指数（AI）， RT-PCR检测细胞中STAT3 mRNA 的表达水平，流式细胞仪检测细胞周期的变化和细胞凋亡率。结果： STAT3 ASODN各浓度组对HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用，能明显诱导细胞凋亡。结论： STAT3 ASODN能够诱导HepG2细胞凋亡。     

Survivin microRNA对人肝癌细胞间通讯功能影响的实验观察

目的 观察survivin的microRNA对HepG2细胞间通讯功能主要环节的影响作用.方法 人工设计合成特异性靶向survivin的microRNA的序列.肝癌细胞株HepG2接种于细胞培养板内并分为5组.作用后收集各组细胞.流式细胞术检测各组细胞增殖率和凋亡指数.划痕染料示踪技术检测转染前后HepG2的细胞间隙连...     

端粒酶活性与慢性粒细胞白血病病程关系的研究

目的:通过对慢性粒细胞白血病(CML)各期患者骨髓单个核细胞端粒酶活性的检测,以了解端粒酶活性与CML病程的关系。方法:采用聚合酶链反应-酶标记免疫吸附分析法(PCR-ELISA)测定端粒酶活性。结果:正常骨髓组端粒酶活性为9.85±0.68,CML慢性期为24.48±12.73,明显高于正常骨髓组(P＜0.05),加速期为76.76±21.84,急变期为90.62±25.41,两者均明显高于慢性期组(P＜0.001,P＜0.001)且本身两组间无显著差异(P＞0.05),慢性期治疗后为18.12±6.27,仍高于正常骨髓组(P＜0.05)。结论:CML各期端粒酶活性均显著高于正常骨髓组,端粒酶的异常激活表明CML患者进入了加速期,端粒酶活性可作为CML检测和预后的一个有用的新指标。     

生物化学理论课教学方法探讨

生物化学作为医学院校的基础课程,与其他医学基础课程相比,其具有理论抽象、概念模糊、代谢途径复杂、内容枯燥乏味等特点,这使其成为众多医学课程中较难掌握的课程之一.所以采用好的教学方法进行生物化学教学至关重要.好的教学方法能够把抽象的理论变得具体化,把繁杂的代谢途径变得条理清晰、层次分明,把枯燥乏味的内容变得有声有色,有利于提高生物化学教学质量.     

高血压病血清巨噬细胞集落刺激因子受体的变化及其意义

目的：探讨高血压病巨噬细胞集落刺激因子受体（M-CSFR）的改变及其临床意义。方法：用多克隆双抗体夹心ABC-ELISA法测定58例高血压病患者和30例正常对照组的血清M-CSFR。结果：高血压病组血清M-CSFR水平明显高于对照组（P<0.01）、1级高血压组M-CSFR明显低于3级高血压组（P<0.01）。相关分析发现：血清M-CSFR浓度与收缩压、舒张压和平均动脉压呈正相关（r=0.65、r=0.68、r=0.73，P均<0.01）。结论：高血压病患者M-CSFR水平升高在血管内膜损伤和动脉粥样硬化过程中起重要作用。     

银耳多糖抑制肝癌HepG-2细胞体外增殖机制的实验研究

[目的]探讨银耳多糖抑制肝癌HepG-2细胞体外增殖的作用机理。[方法]体外培养肝癌HepG-2细胞,分别用不同浓度的银耳多糖（0、5、10、20和40μmol／L）处理培养2d,采用MTT法测定各浓度银耳多糖对细胞增殖的抑制率：收集20μmol／L银耳多糖作用24h和48h后的HepG-2细胞和对照细胞．抽提DNA电泳检测：收集20μmol／L银耳多糖作用48h后的HepG-2细胞和对照细胞．抽提总RNA．半定量RT-PCR检测抗凋亡基因survivin的mRNA表达水平。[结果]银耳多糖对体外培养的肝癌HepG-2细胞的IC50值为10μg／ml,且随银耳多糖浓度不同其对细胞增殖的抑制率明显不同（P〈0．05）,最高抑制率可达77．5％。经银耳多糖作用后的细胞出现明显的DNA ladder现象。而银耳多糖干预组细胞的survivin转录水平显著低于对照组（P〈0．05）。[结论]银耳多糖对肝癌HepG-2细胞体外增殖具有抑制作用,并可通过下调survivin基因的转录而诱导HepG．2细胞凋亡。     

Survivin联用bcl-2反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨survivin、bcl-2反义寡核苷酸(ASODN)联用对白血病细胞凋亡的诱导作用。方法:设计并合成靶向survivin ASODN和bcl-2的ASODN,应用脂质体Lipofectamine TM2000作为载体,转染寡核苷酸入白血病K562细胞。实验分为空白对照组、脂质体空转染组、无关序列寡核苷酸组、survivin ASODN组、bcl-2ASODN组和survivin、bcl-2ASODN半量联用组。转染48h后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR半定量检测K562细胞survivin mRNA表达。结果:survivin ASODN和bcl-2ASODN对K562细胞均有一定的增殖抑制作用,抑制率分别为48.78%、40.24%。而survivin、bcl-2ASODN半量联用组的细胞增殖抑制率为60.98%,明显高于单用组(P<0.01)。与非ASODN组相比,survivin ASODN和bcl-2ASODN均可诱导K562细胞凋亡,凋亡率分别为(13.36±4.03)%、(10.40±1.71)%,两者联用凋亡率提高到(26.14±4.39)%(P<0.01)。Survivin、bcl-2ASODN半量联用组survivin mRNA水平明显低于survivin ASODN组和bcl-2ASODN组。结论:survivin、bcl-2ASODN联用可协同抑制K562细胞的增殖,增强凋亡诱导作用,可为白血病基因治疗提供一项新策略。