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目的在大肠杆菌中重组表达犬钩虫抗凝肽AcaNAP8基因,并检测表达产物抗凝活性。方法设计引物,将AcaNAP8成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,构建重纽表达质粒;成功构建的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,SDS—PAGE分析表达情况;诱导表达的重组蛋白用Ni亲和层析进行纯化;用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTT)检测重组产物体外抗凝活性。结果成功构建了pET32a/AcaNAP8原核表达重组质粒,在大肠杆菌中成功表达并获得了重组AcaNAP8,表达产物能明显延长PT及aPTT。结论在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP8融合蛋白,表达产物具有显著抗凝活性。该实验为进一步探讨AcaNAP8的作用机制及应用奠定了基础。 相似文献
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目的 分析我国开展的新型冠状病毒肺炎(简称"新冠肺炎")临床试验的特点,发现可能存在的问题,为临床试验设计者及政策制定者提供一定的参考。方法 收集2020年2月23日24点之前在中国临床试验注册中心官网和美国ClinicalTrials.gov官网注册的新冠肺炎临床试验数据,使用DDA软件进行数据清洗,采用SPSS 18.0对临床试验各特征变量进行描述。结果 我国第1项新冠肺炎临床试验注册时间为2020年1月23日,截至2020年2月23日24点我国共注册240项新冠肺炎临床试验,其中多中心研究62项(25.83%)。共有157个机构参与临床试验,其中医疗机构最多(122个),参与机构地理分布前5名依次为北京、湖北、广东、浙江、上海。临床试验参与患者的年龄主要以成年人(15~64岁)/老年人(≥65岁)为主(63.75%),研究类型主要以干预性研究为主(75.42%),干预措施主要以药物为主(68.51%),经费来源主要以自筹为主(25.00%)。181项干预性研究所处阶段以0期(70项)和Ⅳ期(49项)为主。结论 目前我国开展的临床试验数量多,但机构合作较少,干预措施和试验药物种类不聚焦,招募人数不尽合理,参与机构及经费来源多样化。 相似文献