肿瘤细胞特异性适配子筛选技术及其应用的研究进展

指数富集的配基系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)应用人工合成的随机寡核苷酸文库,通过筛选、分离、富集获得能与各种配体特异结合的寡核苷酸适配子(aptamer)。适配子能特异性结合多肽、蛋白质等多种靶分子,且具有高亲和力。细胞-SELEX技术在SELEX基础上发展起来,它以活细胞为基础,可以在对肿瘤细胞分子标志物一无所知的情况下有效地筛选出肿瘤细胞特异性适配子,是一个潜在的发现肿瘤细胞新标志物的理想策略。肿瘤细胞特异性适配子作为分子探针,在肿瘤基础研究、早期诊断,以及靶向治疗方面展示了巨大的应用前景。目前已筛选出淋巴细胞白血病、肝癌等多种肿瘤细胞的适配子,这些适配子已应用在肿瘤细胞检测,肿瘤早期发现、诊断、游离肿瘤细胞的分选和富集,以及肿瘤细胞靶向药物递送等方面,并且由于适配子适用范围广泛、易于修饰等特点,显示出良好的敏感性、特异性和其他独特的优越性。适配子在肿瘤研究中受到越来越多的关注,在肿瘤检测、诊断和治疗等方面发挥重要作用。     

基质金属蛋白酶与肿瘤上皮间质转化的研究进展

越来越多的研究表明,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)与肿瘤细胞上皮间质转化(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)的关系密切。MMPs是间质细胞表型的特有蛋白之一,既可以作为EMT发生的一个重要标志物,又可以诱发EMT。MMPs诱导肿瘤细胞发生EMT的机制是一个复杂的网络,可能涉及多个信号通路,如介导Rac1b激活ROS释放通路、活化TGF-β通路、降解E-cadherin促使β-catenin入核通路等。鉴于MMPs是诱导EMT促进肿瘤转移的一个关键因素,靶向MMPs已成为临床防治肿瘤的一个新策略。因此MMPs抑制剂则是当前研究热点,目前,多达50多种MMPs抑制剂被列入临床治疗肿瘤的候选药物,但其中大部分的疗效并未得到肯定。缺乏特异性则是其主要原因,故靶向MMP-EMT途径的肿瘤治疗仍然面临着很大的挑战,不仅需要鉴定出涉及肿瘤进展、促进EMT的主要或单一MMP,而且需要开发出具有高度特异性、选择性的MMPs抑制剂。     

识别肿瘤血管内皮细胞的嵌合性T细胞受体的构建与鉴定

近年来发展了一种新的肿瘤免疫治疗策略 ,即将能够特异性识别并结合肿瘤细胞表面抗原、或受体的抗体或配体 ,与T细胞受体胞内成分融合成嵌合性 T细胞受体 (chimeric Tcell recepter,c TCR) ,赋予 T细胞持久的、预先决定的新配体识别特异性 ,转染 c TCR的细胞毒 T淋巴细胞 (cytotoxic Tlym phocyte,CTL )选择性地靶向和杀伤肿瘤细胞 [1 ] 。鉴于血管内皮生长因子受体在恶性肿瘤组织和正常组织中表达完全不同 [2 ,3] ,本研究采用重叠延伸技术构建一种能识别肿瘤血管内皮细胞的 c TCR,为进一步研究其功能提供实验基础。1　材料和方法1.…     

糖蛋白糖链异质性检测对肝病的临床意义

研究糖蛋白糖链的方法一般有糖链结构分析和糖链异质体测定两种。应用植物凝集素亲和交叉免疫电泳检测糖蛋白糖链异质体简便易行,被越来越多的实验室采用。α_1-酸性糖蛋白与ConA的反应性测定结果与肝病并发症的有无及多少有关,有助于临床上判断肝病的严重程度。甲胎蛋白及α_1-抗胰蛋白酶的糖链异质体测定不仅有助于良、恶性肝病的鉴别诊断,而且有助于肝癌的早期发现。     

原发性肝癌组织及血清中豌豆凝集素结合型甲胎蛋白含量对照研究

作者检测了25例原发性肝癌、非癌肝组织以及外周血中豌豆凝集素结合型甲胎蛋白(AFP-R-P)含量,分别为41±26％、30±27％和36±25％。≤3cm、包膜完整、没有向周围肝组织浸润性生长、无血管癌栓的肝癌组织中AFP-R-P含量较低,患者术后生存期较长。结果提示,AFP-R-P主要由恶性行为较高的肝癌细胞所分泌,它直接或经血路向周围肝组织弥散,同时进入外周血循环,使血清中AFP-R-P含量升高。     

肝癌切除术后甲胎蛋白异质体含量变化及其临床意义

作者同步观察了２６例肝癌患者在肿瘤切除术后初期血清ＡＦＰ和ＡＦＰ异质体含量变化，结果表明：１７例血清ＡＦＰ异质体随血清ＡＦＰ转阴而消失，６个月内无１例复发；３例ＡＦＰ虽未能转阴，但ＡＦＰ异质体含量明显下降，６个月内亦无１例复发；６例血清ＡＦＰ含量下降，ＡＦＰ异质体含量相对恒定，其中４例６个月内复发。我们初步认为，肝癌切除术后在观察ＡＦＰ含量变化的同时，比较ＡＦＰ异质体的变化，似能更真实地反映病情。     

甲胎蛋白异质体AFP-L3对肝癌切除术后复发的判断价值

目的通过分析肝癌患者术前、术后血清甲胎蛋白(AFP)及其糖链异质体AFP-L3含量的变化,了解和评价AFP-L3对肝癌切除术后复发判断的价值。方法 2007年1月至12月接受首次肝细胞癌切除术的患者67例,详细记录其临床资料,同步连续测定手术前后患者血清AFP和AFP-L3含量,并进行长期复查和随访。结果全组1、2、3年总体复发率分别为23.9%(16/67)、38.8%(26/67)和50.7%(34/67)。患者术前血清AFP-L3含量与血清AFP水平之间无相关性(rs=0.176,P=0.155)。患者术前血清AFP-L3含量与肿瘤复发之间呈正相关(rs=0.327,P=0.007),而AFP含量与肿瘤复发之间相关性尚不明确(rs=0.240,P=0.051)。结论 AFP-L3与肝癌的复发有关联,对肝癌的复发判断有较高的价值,可为临床医生判断肝癌疗效提供有用的信息。     

糖胺聚糖结合细胞因子与肿瘤

糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)是一类含有糖醛酸和氨基糖残基的重要生物大分子。在细胞表面和细胞外基质中存在着一些高亲和力的GAG结合细胞因子,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、中期因子(midkine,MK)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、肝素酶(heparanase,HPA)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)。它们除了具有多种生物学作用外,还与肿瘤发生、发展有着密切联系。GAG结合细胞因子在肿瘤分子诊断、靶向治疗方面的研究和应用已越来越受关注。