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51.
 目的:通过观察瓦勒变性坐骨神经段对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)增殖、分泌功能以及向施万细胞(Schwann cells, SCs)分化的影响,探讨其在BMSCs向SCs分化中的作用及可能的机制。方法:采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,并采用免疫荧光法鉴定。应用Transwell建立坐骨神经段与BMSCs双层培养体系,将实验分为瓦勒变性坐骨神经段与BMSCs联合培养组(A组)、正常坐骨神经段与BMSCs联合培养组(B组)和BMSCs单独培养组(C组)。倒置相差显微镜观察联合培养过程中BMSCs 形态变化;免疫荧光染色检测联合培养第7天各组BMSCs表达S-100情况;联合培养第0、1、4、7、11、14天,利用细胞计数法绘制各组BMSCs生长曲线,ELISA法检测各组培养液上清中神经生长因子(nerve growth factor, NGF)含量,实时荧光定量PCR检测各组BMSCs中S-100 mRNA表达情况。结果:成功分离培养BMSCs,免疫荧光鉴定BMSCs呈CD29、CD44和CD90表达阳性。联合培养第7天倒置相差显微镜观察可见,A组BMSCs胞体回缩,呈梭形,并带有突起,形态类似SCs;B、C 组大部分BMSCs 形态无明显变化。联合培养第7天免疫荧光染色示,A、B、C 组 BMSCs S-100阳性表达率分别为31.1%±2.9%、16.2%±1.7%和0.42%±0.07%,A组阳性表达率明显增高(P<0.05)。各组BMSCs生长曲线均近似“S”形,从第4天开始,A组BMSCs增殖速度明显快于B、C组(P<0.05);ELISA 法检测示,A 组NGF含量呈时间依赖性增加,于联合培养第7天达高峰,随后呈下降趋势。B、C 组NGF含量随共培养时间延长有所增加,但显著低于A组(P<0.05);实时荧光定量PCR检测示,联合培养第4、7、11、14天,A组S-100 mRNA表达明显高于B、C组(P<0.05)。结论: 瓦勒变性坐骨神经段能有效促进大鼠BMSCs增殖并诱导BMSCs向SCs样细胞分化,联合培养过程中NGF可能参与BMSCs向SCs分化的调控。  相似文献   
52.
目的 观察硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)对β-淀粉样前体蛋白/早老素1(amyloid precursor protein/presenilin1,APP/PS1)阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)模型小鼠认知功能的影响,并探讨其可能的机制。方法 选取24只8月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠,随机分为APP/PS1组(腹腔注射生理盐水)和APP/PS1+NaHS(H2S供体)组(腹腔注射NaHS溶液);将24只8月龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为WT组(腹腔注射生理盐水)和WT+NaHS组(腹腔注射NaHS溶液)。采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力,尼氏染色观察神经元形态学变化,免疫荧光染色检测NOD样受体3(nod-like receptor protein3,NLRP3)分布及表达情况,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,Western blot检测神经元特异性核蛋白(neuron-speci...  相似文献   
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