靶向小鼠Abcb11基因CRISPR/Cas9系统的构建及效率检测

目的：ABCB11基因突变是肝内胆汁淤积症2型(PFIC-2)的主要病因,本研究试图构建特异性靶向小鼠Abcb11基因的CRISPR/Cas9系统,并检测该系统的基因编辑效率。方法：根据小鼠Abcb11基因的DNA序列,设计3条sgRNA导向序列,通过构建sgRNA表达载体,将sgRNA质粒和Cas9质粒一起转入N2a细胞,药物筛选,阳性细胞DNA的PCR产物测序以及TA克隆测序等实验,完成基因编辑系统构建及效率检测。结果：sgRNA3导向序列可用于编辑小鼠Abcb11基因,编辑效率为61.54%。结论：靶向小鼠Abcb11基因的编辑系统构建成功,且有较高的编辑效率,为后续建立精准模拟人类PFIC-2疾病的小鼠模型以及临床治疗奠定了基础。     

间充质干细胞调节LXA4对糖尿病肾病大鼠的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)大鼠肾损伤的影响及其可能的作用机制。方法 8周龄雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为DN组(n=30)和正常对照组(n=6)。DN组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导DN模型,进一步将其分为DN组、DN+MSC组、DN+LXA4(脂氧素A4)组、DN+LXA4+WRW4(LXA4拮抗剂)组、DN+MSC+WRW4组,每组6只大鼠;正常对照组大鼠则给予等量枸橼酸钠溶液。大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)加入高糖培养72h后,对细胞进行分组,即正常对照组、高糖组、高糖+MSC组、高糖+LXA4组、高糖+LXA4+WRW4组、高糖+MSC+WRW4组。使用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunoadsordent assay, ELISA)和Western blot法检测炎症和纤维化相关指标[转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8、干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)]。结果 利用大鼠肾小球系膜细胞和大鼠DN模型,本研究证实了MSC和LXA4均能够减低高糖组细胞中炎症和纤维化指标(TGF-β1、IL-6、IL-8、IFN-γ)的表达;经WRW4处理后,上述作用被抑制。同时本研究还证实了经MSC和LXA4处理后,高糖组细胞和DN组大鼠模型中p-Smad2、p-Smad3、CXCL1和CXCR2的表达减低;经WRW4抑制后,p-Smad2、p-Smad3、CXCL1、CXCR2表达均减少。结论 MSC干预可抑制DN中肾脏的纤维化和炎性因子表达,MSC对DN的这种肾脏保护作用可能是通过提高DN肾组织中LXA4的表达而实现的。     

中西药治疗带状疱疹后神经痛的研究进展

带状疱疹后神经痛是带状疱疹最常见的并发症之一,常表现为中重度疼痛,长期疼痛可诱发其他脏器病变,给患者身体和心理带来巨大伤害。目前,带状疱疹后神经痛的治疗手段多样,药物治疗仍是其主要治疗方式之一,西药主要有钙离子通道调节剂、抗抑郁药、非甾体抗炎药、外用贴剂、阿片类药物及其他类型药物;传统中药认为带状疱疹后神经痛的发生由脏腑功能失调,治疗应从调和气血、恢复肝脾功能入手,治疗目的在于缓解疼痛,改善睡眠,提高生活质量。本文归纳总结了国内外治疗带状疱疹后神经痛的相关文献,介绍了中西药治疗带状疱疹后神经痛的现状及进展。     

依达拉奉对过氧化氢刺激神经细胞的保护作用及机制研究

目的 探讨依达拉奉对神经元的保护作用及其保护机制.方法 提取胎龄16 ～ 18 d的孕大鼠皮层组织,消化、离心后培养,鉴定神经元细胞纯度90％以上.实验共分为3组:空白对照组、过氧化氢(H2O2)处理组(300 μmol/L刺激0.5、2、6及12 h),依达拉奉预处理组(刺激前预防性应用500 μmol/L保护30 min,分组同H2O2处理组).电镜观察线粒体形态的变化,流式细胞仪检测凋亡细胞的比率,免疫印迹及免疫沉淀检测凋亡关键蛋白的活性及蛋白间的关系.结果 相比依达拉奉预处理组,H2O2处理组相同时间点的线粒体明显呈水泡样肿胀变及空泡样变.H2O2处理组刺激后0.5、2、6及12h细胞凋亡比率分别为14.40％±1.23％、45.50％±2.81％、56.40％±3.53％、62.50％±4.23％;与空白对照组比较神经元凋亡明显增加(F=274.8,P＜0.01).依达拉奉预处理组相应时间点的细胞凋亡比率分别为0.90％±0.07％、1.10％±0.08％、3.50％±1.90％、12.60％±1.10％;与H2 02处理组比较明显降低(F=362.7,P＜0.01).刺激0.5h后,磷酸化c-Jun氨基端激酶(p-JNK)、细胞质中细胞色素C、线粒体膜上B细胞白血病-淋巴瘤-2相关X蛋白(BAX)表达水平开始明显升高,直至12 h时达到顶峰;与此同时,细胞质中B细胞白血病-淋巴瘤-2关联死亡蛋白(BAD)、磷酸化BAD、BAX和14-3-3水平表现为持续性降低,而这些改变在依达拉奉预处理组均被抑制.结论 作为一种自由基清除剂,依达拉奉可能通过抑制JNK的活性、抑制BAD与14-3-3分离及抑制BAX选择性地由细胞质向线粒体移位来保护神经细胞.     

下肢康复机器人用于脑卒中患者康复训练疗效观察

目的提高脑卒中偏瘫患者步行功能及日常生活能力。方法对16例脑卒中偏瘫患者,在常规康复的基础上加用下肢康复机器人进行步行训练;训练8周后评价康复效果。结果患者的步态功能、平衡功能、ADL评分较治疗前显著好转(均P<0.05)。结论脑卒中偏瘫患者康复训练中加用下肢康复机器人训练,可促进患者步行功能的改善,提高患者的日常生活能力。     

综合护理联合健康教育对直肠癌肠造口患者自护能力的影响

目的 探讨以综合护理、健康教育为联合的护理模式在直肠癌肠造口患者中的应用价值。方法 选取我院2020年1月-2022年9月收治的直肠癌肠造口治疗患者61例作为研究对象,采用随机数字表法分为 对照组30例和试验组31例。对照组实施基础护理,试验组实施综合护理联合健康教育护理。比较两组自我 护理能力、造口护理知识掌握程度以及造口局部皮肤DET评分情况。结果 两组护理后自护能力评分均高 于护理前,且试验组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;试验组造口护理各项知识掌握度高于对 照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;试验组造口局部皮肤颜色性状、溃疡状态以及T-组织增生评分均 低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 综合护理联合健康教育护理模式可提高直肠癌肠造口 治疗患者的自护能力,且能够提升患者对造口护理知识的掌握水平,进而改善造口附近皮肤情况,值得临 床应用。     

早期应用虎杖甙治疗重症急性胰腺炎的机制探讨

目的 探讨早期应用虎杖甙(polydatin,PD)在治疗重症急性胰腺炎(severe aeute pancreatitis,SAP)大鼠中的作用及其可能的机制.方法 将SD大鼠随机分成对照组、SAP模型组和PD治疗组各组模型制备成功后6 h,分别采集各组大鼠静脉血液标本和胰腺组织,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法分别检测血液中内皮素-1(ET-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达量,并检测血淀粉酶(AMY),光镜下观察胰腺组织病理改变,透射电镜观测胰腺细胞内超微结构的病理变化.结果 与对照组比较,SAP模型组和PD治疗组血中AMY、ET-1、1CAM-1浓度均有明显升高(P<0.01);而PD治疗组的血中AMY、ET-1浓度与SAP组比较有明显下降(P<0.01)胰腺组织的病理变化:相对于对照组,PD治疗组和SAP模型组光镜下可见胰腺细胞坏死、微血管出血等病理改变,电镜下胰腺细胞内各细胞器均有不同程度结构、功能改变:而PD治疗组胰腺病理变化比SAP模型组明显减轻.结论 早期应用PD对治疗急性胰腺炎具有一定的作用.其作用机制可能是:PD通过抑制SAP大鼠血液中ET-1的表达,阻止微血栓形成;进而改善胰腺微循环,减轻胰腺组织病理损伤.     

心不停跳先吻合桥血管近端与心停跳常规吻合冠状动脉搭桥术研究

我们将2001年6月至2005年6月进行冠状动脉搭桥手术(CABG)的80例患者进行对照研究,探讨非体外循环心脏不停跳先吻合桥血管近端"顺行序贯式"吻合法与常规方法的利与弊. 一、对象与方法     

超声造影在小肾癌诊断中的价值探讨

目的：探讨超声造影在小肾癌诊断中的价值,提高小肾癌的诊断和治疗水平。方法：回顾性分析了2005年6月-2007年12月间我院收治的35例小肾癌患者B超、CT、IVP、MRI的影像学特征,并对35例小肾癌患者进行了超声造影检查,将超声造影对小肾癌的诊断与病理检查结果进行对比,与增强CT扫描结果进行对比,以探讨超声造影对小肾癌的诊断价值。结果：B超诊断小肾癌的准确率为82．9％,CT诊断小肾癌的准确率为91．7％,MRI诊断小肾癌的准确率为90．4％。超声造影检查35例小肾癌患者共发现36个病灶（有1例患者为左侧多发）。超声造影诊断小肾癌的灵敏度为97．1％,特异度为100％,阳性预测值为100％,阴性预测值为50％,准确率为97．2％。结论：小肾癌的早期诊断主要依赖B超和CT等影像学检查。B超是筛选小肾癌的首选方法;螺旋增强CT可为小肾癌定性、定位诊断提供重要参考价值。超声造影对小肾癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值和诊断准确率均较高,对小肾癌的诊断具有较高的价值。     

运用马克思主义哲学浅析新时代医患关系和解决途径

新时代医患关系具有新的特点和新的矛盾。新特点表现在患者对医疗产品和技术的更高需求,而人民对健康生活的需要与医疗资源不平衡不充分的发展之间的矛盾则是新的矛盾。新时代医患关系日益紧张,急需改善。通过运用马克思主哲学中科技是最高意义上的革命力量、物质与意识的辩证关系和人生价值规律,分析导致医患冲突的影响因素,找到切实有效、能够改善和解决医患关系的方法,使医患双方和谐共处。主要以提高医疗服务质量、改善医务工作者的工作环境、推进提升医患间信任为目的,通过切实的方法促进医患间有效的沟通。