基于TCGA数据库的肾透明细胞癌miRNA预后模型的构建及蛋白互作网络分析

目的：通过微小RNA(microRNA,miRNA)预后模型筛选肾癌高危人群并进行早期干预治疗,以提高患者的生存率。方法：基于癌症基因图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库,通过风险生存曲线、受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线及生存状态图对模型进行评价并对风险评分进行独立预后分析,筛选肾透明细胞癌预后相关的miRNA,建立预后风险模型。结果：(1)从TCGA数据库初步筛选3 613个差异性表达的m RNA和49个差异表达的miRNA。(2)通过单、多因素Cox回归分析筛选出3个与预后相关的miRNA构建风险预后模型,并且Train组、Test组和所有样品的高低风险组存在明显生存差异;3组样本1、3、5年生存分析的ROC曲线下面积均接近或大于0.70,风险评分可以作为独立预后因子。(3)在GO富集分析中,主要富集在肾单位的发育、突触后密度及离子跨膜转运蛋白活性等;而在KEGG富集分析中,主要参与其他类型的O-聚糖生物合成、N-聚糖生物合成等通路。结论：基于TCGA数据库构建的3个miRNA风险预...     

稳定表达EGFP-LC3蛋白SH-SY5Y细胞系的构建

目的:建立稳定表达微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)与绿色荧光蛋白(EGFP)形成的融合蛋白(EGFP-LC3)的人神经母细胞瘤株SH-SY5 Y细胞系,验证EGFP-LC3点状聚集物能够实时直观地反映自噬小体和自噬流.方法:以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)的cDNA为模板,克隆LC3,并连接EGFP绿色荧光蛋白.将EGFP-LC3连接入慢病毒载体GV348中,构建慢病毒表达载体EGFP-LC3-GV348.慢病毒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y细胞),使用3μg/mL嘌呤霉素筛选并处理细胞1月,筛选得到EGFP-LC3稳转系.诱导自噬后,用共聚焦显微镜观察LC3荧光斑点并定量分析.Western blot检测目的蛋白表达情况.结果:经酶切证实,EGFP-LC3-GV348慢病毒表达载体构建正确.在激光共聚焦显微镜下,可以观察到细胞内的绿色荧光EGFP代表的自噬小体,活体染料LysoTracker Red DND-99将溶酶体染成红色荧光,红色荧光与绿色荧光重叠代表自噬溶酶体.无血清诱导自噬后,自噬小体(绿色荧光斑点)明显增加,差异有统计学意义(P<0.001).Western Blot免疫印迹可见EGFP-LC3融合蛋白表达条带.结论:成功构建了稳定表达EGFP-LC3的SH-SY5 Y细胞系,EGFP-LC3荧光斑点可以直观实时反映自噬囊泡,为进一步探讨神经退行性疾病的自噬机制提供了实验基础.     

胫骨远端外侧解剖板内固定治疗胫腓骨下段粉碎性骨折

目的:探讨应用胫骨远端外侧解剖形接骨板内固定治疗胫腓骨下段粉碎性骨折的治疗价值。方法:应用胫骨远端外侧解剖形接骨板内固定治疗20例胫腓骨下段严重粉碎性骨折,对治疗结果进行评价。结果:所有病例均获随访,随访时间8个月-2年的,平均为18个月,肢体无明显短缩、无骨髓炎、筋膜间隙综合征等并发症发生,骨折全部愈合,患肢功能满意,优良率为95%。结论:胫骨远端外侧解剖形接骨板是治疗腓腓骨下段粉碎性骨折的有效方法,同时采用尽早期切开复位内固定手术是可行的,酌情作植骨,减少骨不连,减少感染、筋膜间隙综合征等并发症的发生,改善患者生活质量。     

IKs 复极储备下调对心肌肥厚豚鼠室性心律失常发生的影响

目的：观察心肌肥厚时快激活延迟整流钾电流(rapidly activated delayed rectifier potassium channel,IKr)和慢 激活延迟整流钾电流(slowly activated delayed rectifier potassium channel,IKs)的变化,并探讨IKr和IKs阻断剂对心肌肥厚豚 鼠室性心律失常发生的影响。方法：豚鼠分为假手术组和左心室肥厚(left ventricular hypertrophy,LVH)组,制备LVH 模型。采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞IKr和IKs电流,观察IKr和IKs电流的变化;给予豚鼠分别静脉注射IKr阻断 剂多非利特(0.04 mg/kg)和IKs阻断剂chromanol 293B(0.1 mg/kg),观察其对LVH豚鼠QTc及室性心律失常发生的影响。 结果：豚鼠胸主动脉缩窄6周后,与假手术组相比,室间隔厚度,左室后壁厚度,QTc间期和细胞电容显著增加 (P<0.05或P<0.01);LVH心室肌细胞IKs明显减少[+60 mV：(0.36±0.03) pA/pF vs (0.58±0.05) pA/pF,P<0.01];LVH对IKr无 明显影响。IKr阻断剂可显著延长LVH豚鼠QTc间期(P<0.01),并增加室性心律失常的发生。IKs阻断剂对LVH豚鼠QTc间 期及室性心律失常的发生无明显影响。结论：IKs复极储备下调是心肌肥厚诱发室性心律失常的重要机制之一。     

心肺复苏技能操作培训在临床医学实习生岗前培训中的开展及质控价值

目的　探讨心肺复苏操作技能培训在教学医院临床医学实习生岗前培训中的开展及其质控价值。方法　分别收集黔江中心医院2015年6月至2017年6月之间来自重庆医科大学、吉首大学、湖北民族学院等院校实习生数据136例,包括其在岗前培训3个月后心肺复苏技能考试成绩、合格率、补考合格率的数据,以未引入心肺复苏技能操作组（2015届）实习生为对照组,比较岗前培训引入心肺复苏操作技能培训考核组（2016届）与对照组（2015届）的差异,并分析心肺复苏操作技能再培训考核与岗前培训成绩的相关性以及对岗前培训效能的预测价值。结果　纳入研究136名实习生,2016届临床医学实习生65名,2015届临床医学实习生71名。岗前培训引入心肺复苏操作技能培训组与对照组3个月后心肺复苏操作技能考核成绩比较,再培训组评分显著高于对照组（t=15.594,P＝0.00０）。3个月后心肺复苏操作技能考核及格率,培训组显著高于对照组（χ2=22.859,P<0.01）;3个月后心肺复苏操作技能考核补考后及格率,再培训组显著高对照组（χ2=6.179,P=0.018）。结论　教学医院临床医学实习生岗前培训引入心肺复苏技能培训教学,可能提高岗前培训的效能和临床医学生的心肺复苏技能,有助于改进临床医学实习生岗前培训的质量,并可作为一种有效的临床实习教学质量控制策略。     

桑菊饮加减联合阿奇霉素治疗小儿肺炎支原体感染风热咳嗽临床观察

目的 观察桑菊饮加减联合阿奇霉素治疗小儿肺炎支原体感染风热咳嗽的临床疗效。方法 将60例肺炎支原体感染风热咳嗽患儿随机分为对照组和治疗组,每组30例,对照组给予阿奇霉素治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用桑菊饮加减。观察两组患儿体征改善时间及临床疗效。结果 与对照组比较,治疗组平均退热时间、啰音消失时间以及咳嗽缓解时间均显著缩短,差异有统计学意义（P＜0.05）。两组临床疗效的分布比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,治疗组临床疗效优于对照组。结论 桑菊饮加减联合阿奇霉素治疗小儿肺炎支原体感染风热咳嗽疗效确切。     

上肢骨干天鹅型记忆接骨器的设计与临床应用

目的：研究应用于上肢骨干骨折与骨不连内固定的新型记忆合金接骨器。方法：利用镍钛合金与上肢骨干解剖生理的特性和特征,采用光弹,电测及三维有限元法研制天鹅型记忆接骨器（SMC）,临床应用于锁骨、肱骨、尺桡骨干骨折与骨不连188例243根,平均随访2．25年。结果：SMC在轴向多点位抗剪、折、旋、持骨力98．40－125．05N;在纵向,将152－196N的记忆应力作用于骨断端。骨不连92例106例,平均术后3．8个月,不连处为类骨板样骨替代,骨折93例134根,平均术后2．6个月骨折处为骨板样愈合,全部病例无感染,无取出本器后再骨折和因本器所致的关节功能障碍,优良率98．76％,结论：SMC多点位轴向持骨,纵向加压、是治疗上肢骨干骨折与骨不连新而有效的技术与方法。     

胫骨平台骨折的手术治疗

目的：探讨胫骨平台骨折的最佳治疗方法。方法：回顾性分析我院1997年1月至2000年12月收治的69例胫骨平台骨折手术患,骨折类型按Schatzker分型,其中Ⅰ型12、Ⅱ型19例、Ⅲ组10例、Ⅳ6例、Ⅴ8例、Ⅵ14例。除Ⅰ型采用经皮穿刺空心螺钉内固定外,其余各型采用切开复位支持钢板内固定,原则上塌陷＞0．5cm一律采用自体髂骨植骨。结果：58例患随访,平均随访15个月（6－37个月）,功能评价采用Hohl膝关节功能评分法,优良率达87．93％,结论：胫骨平台骨折宜手术治疗,手术方法根据不同的骨折类型而异。     

Richard钉与Gamma钉治疗股骨粗隆周围骨折的比较

随着社会老龄化 ,骨质疏松患者日益增多 ,股骨粗隆周围骨折的发病率也明显上升。早期手术内固定已被广泛接受 ,不仅可以降低死亡率 ,而且患者可早期下床活动 ,减少因长期卧床引起的并发症。股骨粗隆周围骨折的内固定方法比较常用的有 Richard钉和 Gam ma钉等 ,近年来多数人认为Gamma钉效果优于 Richard钉 [1 ] ,但作者并不赞同这一观点 ,故将我院用该两种方法治疗的患者作一比较。1　临床资料1.1　一般资料　自 1998年以来 ,我院共收治股骨粗隆间、粗隆下骨折 12 3例 ,其中行 Richard钉内固定 79例 ,Gamm a钉内固定 2 3例 ,其余 2 1例有…