闽东南地区特教学校听力障碍学生线粒体基因变异调查

目的调查福建省闽东南地区特教学校遗传性或者药物性耳聋患者的分子遗传学病因。方法调查对象为福建省闽东和闽南3所特教学校276例听力障碍患者,对照组为按照疾病组进行年龄、性别匹配的健康体检者120例,所有的受试者均采集外周血并抽提DNA,应用基因芯片筛查国人常见的线粒体DNA(mtDNA)中的两个位点的突变,对可疑的母系遗传或药物性听力障碍患者应用限制性内切酶酶切结合直接测序技术对mtDNA进行全长分析,同时收集患者的相关临床资料。结果在37位可疑遗传性耳聋的先证患者中有7个存在明显的母系遗传特征,另外52人有氨基糖甙类药物接触史。共发现8例患者(2.91%)携带12SrRNA基因A1555G突变,12SrRNA基因C832T、T874C、G1125A和A1128G的变异位点;mtDNA存在着多种频率不等的变异形式,而且倾向于单体型的连锁出现,畲族患者以COⅠ和ATP6基因上的变异较为集中,包括C7196A、T7319C、G8997C、C8995T和C8994T等。结论线粒体DNA在非综合征耳聋患者中可以呈现多种形式的变异,其中12SrRNA基因A1555G突变在闽东南耳聋患者中具有一定的比例,而COⅠ和ATP6基因变异可能和种族遗传相关。     

实时荧光定量PCR检测VAD1 mRNA评估新型隐球菌性脑膜炎的疗效

Objective To establish a new approach for quantitative detection of VAD1 mRNA in cryptococcus neoformans by RT-FQ-PCR, and evaluate the treatment efficacy of CNM. MethodsThe primers and TaqMan probe were designed according to the published sequence of VAD1 mRNA (GenBank),and RT-FQ-PCR method to detect VAD1 mRNA was established. Cerebrospinal fluid from 25 CNM patients and 30 controls were detected and sensitivity and specificity of the method were evaluated. VAD1 mRNA concentration in cerebrospinal fluid from both acute phase and recovery phase of 25 CNM patients were also detected and significance of CNM treatment efficacy with VAD1 mRNA analysis was evaluated. Results Correlation coefficient of standard curve was - 0. 997 9 in detection of VAD1 mRNA by RT-FQ-PCR, and the detection limit was 101 copies/μl. The intra CV of plasmid standard for high, medium and low concentrations were 0. 65% ,0. 89% and 1.23% respectively, the sensitivity of cryptococcus neoformans detection by RT-FQPCR was 96% (24/25) ,while specificity was 100% (30/30). VAD1 mRNA concentration in acute phase were significant higher than that in recovery phase (3. 042 ±0. 906 vs 2. 187 ±0. 665 ,t =4. 583 ,P ＜0. 01).Conclusions The established RT-FQ-PCR method for the detection of VAD1 mRNA is provided with sound sensitivity, specificity and reproducibility, which might be fit for the detection of VAD1 mRNA. The expression level of VAD1 mRNA is relevant with the treatment efficacy of CNM.     

遗传性胰腺炎胰蛋白酶原基因突变分析

目的:分析胰蛋白酶原基因(cationic tryp- sinogen,PRSS1)在遗传性胰腺炎(hereditary pancreatitis,HP)患者中突变的性质.方法:用基因产物直接测序法对1个遗传性胰腺炎家系中的胰腺炎患者(共有2例成员)的PRSS1基因5个外显子进行测序,并分析其临床特征.结果:在2例胰腺炎患者中均出现了PRSS1基因3号外显子纯合子突变(c.415 T>A),表达的氨基酸从胱氨酸(Cys)→丝氨酸(Ser),平均发病年龄为16岁,家系中胰腺炎患者的血清肿瘤标志物均正常.结论:PRSS1基因3号外显子c.415 T>A突变与遗传性胰腺炎有关.     

急诊检验结果复核制度实施4年回顾

目的建立切实可行的急诊检验结果复核制度,保障急诊检验质量和安全。方法通过调阅实验室信息系统(LIS)数据和急诊检验结果复核记录,回顾分析本科室2009~2012年间发现的145个不符合项的构成、分布和变化趋势。以"错误报告数"、"医疗事故数"、"临床投诉量"、"报告及时率"、"急诊检验临床满意率"等指标对比分析执行急诊检验结果复核制度的成效。采取完善急诊检验管理制度和流程、加强员工技能培训、改进实验室信息系统和优化急诊资源配置等措施对不符合项持续整改。结果 "错误报告"和"漏检和漏发报告"是最多见的不符合项,分别占72.41%(105/145)和12.41%(18/145)。工作5年以内的员工产生的不符合最多,占51.03%(74/145)。"错误报告"主要来自临检和血液专业,主要表现为"复检规则未执行"61.90%(65/105)和"结果输入/描述错误"21.90%(23/105)。通过不断整改,不符合项占当年总急诊量比例逐年下降,分别为0.024%(2009年)、0.023%(2010年)、0.018%(2011年)、0.014%(2012年),但差异无统计学意义;报告及时率、急诊检验临床满意率逐渐上升,未发生一起医疗事故。结论实施急诊检验结果复核制度、采取针对性持续性整改措施是保障急诊检验质量和安全的重要手段。     

5700份不合格标本原因分析和处理对策探讨

目的：探讨降低标本不合格率的方法。方法回顾性分析本院2011年10月至2012年7月5700份不合格标本的不合格原因、各临床科室送检标本的不合格率、急诊和非急诊标本的不合格率差异,以及不同抗凝管发生标本凝固的比率。结果导致标本不合格的主要原因为溶血、凝固和标本量不合要求,主要与护士采集标本方法不当有关。儿科、重症监护病房、急诊科送检标本的不合格率高于其他科室（P＜0．05）,急诊标本不合格率高于非急诊标本（P＜0．05）,枸橼酸钠（1∶9）抗凝管发生标本凝固的比率最高（P＜0．05）。结论检验科应建立完整的不合格标本识别和退回制度,并通过多种方式主动与临床沟通,共同探讨降低标本不合格率的措施,保证检验分析前质量。     

088 MHCⅡ类分子反式激活因子（CⅡTA）的研究进展

ＭＨＣⅡ分子反式激活蛋白（ＣＴＡ，ｃｌａｓｓⅡ 的发现是近年来国际免疫学研究的一项重大突破，ＣⅡＴＡ及其突变体在免疫调节和免疫治疗中具有诱人前景。本文对ＣⅡＴＡ的结构，功能及其反式激活ＭＨＣⅡ类分子的机制作一综述，并对ＣⅡＴＡ及其突一的应用前景作一简要介绍。     

四种尿特定蛋白在糖尿病肾病早期诊断中的应用

目的：探讨尿A1b、TRF、IgG、α-MG对于糖尿病肾病(DN)早期诊断的价值。方法：利用速率散射免疫比浊法测定了58例常规尿蛋白阴性的糖尿病患者4种尿微量蛋白的含量。结果：糖尿病患者4种微量蛋白的水平显著高于正常对照者水平(P值均＜0.05)，糖尿病患者尿A1b、TRF、IgG、α1-MG的阳性率分别为31．03％、32，76％、37，93％和50％。结论：联合测定尿A1b、TRF、IgG、α1-MG有助于DN的早期诊断，α1-MG是早期诊断DN的最敏感指标。     

血清高尔基体蛋白73在慢性肝病患者中的临床应用

高尔基体蛋白73（GP73）是细胞高尔基体上的一种跨膜蛋白,可被切割释放入血。近年来,越来越多的临床研究表明,血清GP73的升高与肝脏疾病密切相关,有望作为评估慢性肝脏疾病进展的新型血清学标志物。现围绕血清GP73对不同病因引起的慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌中的临床应用进行综述,并对未来研究进行展望。     

核苷酸衍生物相关技术在分子诊断中的应用与展望

近年来,一些人工合成的核苷酸衍生物,包括肽核酸（peptide nucleic acid,PNA）、锁核酸（locked nucleic acid,LNA）、己糖醇核酸（hexitol nucleic acid,HNA）等开始在分子诊断领域中得以应用.与普通的核苷酸（DNA、RNA）一样,这些衍生物由A、T、C、G四种碱基组成,可通过碱基配对原则与互补的核酸序列结合.这些人工合成的核苷酸衍生物有诸多自身优势,如较高的热稳定性、酶抵抗性等.籍此,其可以明显改善普通分子生物学技术的性能特点,包括灵敏度、特异性、重复性等.譬如,利用3’端LNA修饰的引物可显著提高单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）检测的特异性,利用PNA夹止技术的抑制作用,可选择性扩增高野生背景中的少量突变.     

重叠延伸PCR构建EB病毒BMRF1-BZLF1N融合基因

摘要：目的：构建EB病毒BMRF1-BZLF1N融合基因,并分析其克隆表达。 方法：用重叠延伸PCR将EB病毒的BMRF1基因和BZLF1N基因通过多肽接头(Gly4Ser)2的DNA序列进行连接,构建BMRF1-BZLF1N融合基因,并进行核苷酸序列测定。 结果：DNA序列分析结果表明,该融合基因BMRF1-Linker-BZLF1N的连接顺序、方向及序列完全正确。 结论：成功构建了EB病毒BMRF1-BZLF1N融合基因,为该融合基因克隆表达产物的应用研究提供了依据。