骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的实验研究

目的探讨骨髓问充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是否能体外诱导分化为心肌样细胞。方法用浓度梯度法分离和纯化Wistar大鼠MSCs，贴壁法培养，培养的第2代细胞分别用终浓度为0、0．1、1．0、10．0、50．0、100．0μmol／L的5-氮杂胞苷（5-azacytidine，5-aza）诱导分化，用光学显微镜观察细胞的形态并用免疫细胞化学方法鉴定细胞内的心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）。结果以终浓度10．0μmol／L 5-aza为诱导组，细胞从原来的梭形变为排列趋向较为一致的长梭形，且体积增大，诱导10d后，细胞内cTnI蛋白染色阳性。终浓度为0、0．1、1．0μmol／L组细胞形态变化不明显，细胞内cTnI染色阴性。终浓度为50．0、100．0μmol／L组细胞死亡。结论大鼠MSCs细胞可经5-aza诱导分化为心肌样细胞，且5-aza的最佳诱导浓度为10．0μmol／L。     

组织学习知识竞赛对调动学生学习积极性的作用

<正> 多年的组织胚胎学教学实践使我们认识到:最大限度地调动学生学习的积极性和主动性是教好组织学与胚胎学课程的关键.教学过程中教师对学生智能和各项综合素质的影响,如果没有学生的主动参与是难以实施和得到发展的.因此,如何充分调动学生的学习积极性和学习主动性,培养学生科学的思维方式以及分析问题和解决问题的能力是在组织胚胎学教学中进行素质教育的一个重要研究课题.组织胚胎学不同与其它医学基础和医学临床课,其特征是利用显微镜对组织切片进行观察鉴别并给予形态描述.由于课程内容相对固定、缺乏必要的相互联系,其教学活动存在着难度大、内容枯燥乏味、学生疑点多等问题,只有充分调动学生学习的积极性和主动性,开发学生智能,才能提高组织胚胎学的教学质量和教学水平.从1992年到1997年期间,我教研室将知识竞赛引入组织胚胎学的教学活动中,充分利用这一生动活泼的群众性娱乐形式,对学生进行智能训练和素质培养,促使学生主动参与组织学的教学活动.五年来,组织学知识竞赛在提高学生组织学学习的主动性上发挥了积极作用,并取得良好的教学效果.为此,我们将知识竞赛在调动学生学习组织学积极性和主动性中的作用和体会进行总结如下:     

重视能力培养 推进素质教育

素质教育是医学教育改革的方向。本室在1992年至1997年间,通过开展组织学知识竞赛、课外血涂片制作兴趣小组和组织学墙报—“H、E之角”等第二课堂教学活动,积极开展对学生智能和各项综合能力的培养,使学生综合素质得到了必要的训练和提高。实践证明,这种重视能力培养的教改模式在推进组织学素质教育的过程中具有不可忽视的作用。     

做好兼职班主任的体会

从中学到大学，对于初入学的一年级新生来说，是人生的一大转折。在这关键的过渡时期，他们十分需要正确的引导、帮助和关怀。作为兼职班主任，必须肩负起这个重任，使学生能尽快适应大学的学习和生活，在德、智、体、美各方面得到全面发展。本文将浅谈本人在担任兼职班主任工作过程中的一些心得体会．一、胸有成竹有的放矢全面了解和掌握学生的情况，做到胸有成竹，有的放矢，这是做好兼职班主任工作的前提和基础．首先详细阅读并记录新生的高考档案，间接了解学生的过去，也可发现不少问题．例如，从报考第一志愿来看，全班31人，有14人报…     

神经肽Y对人血管平滑肌细胞脂质代谢的调制作用

为探讨神经肽Y在血管平滑肌细胞中对脂质代谢是否具有调制作用 ,以成人血管平滑肌细胞体外培养模型为研究对象 ,经不同浓度的神经肽Y作用后 ,运用激光扫描共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术 ,定量观察神经肽Y对人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体表达的影响。结果发现 ,对照组人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体表达的平均荧光强度为 2 4 4 3± 1 89,而在浓度为 1 0 8mol L、1 0 7mol L、1 0 6mol L和 1 0 5mol L的神经肽Y作用下 ,各组的平均荧光强度分别为 2 0 1 5± 1 64、1 890± 1 4 5、1 841± 1 2 3和 1 786± 1 36 ,与对照组相比分别下降了1 7.49%、2 2 .62 %、2 4 .64 %和 2 6 .92 % (P <0 .0 1 ) ,且各浓度组之间多有显著差异 ,呈现一定的剂量依赖效应。结果提示 ,神经肽Y很可能通过下调人血管平滑肌细胞低密度脂蛋白受体的表达 ,从而影响血管平滑肌细胞的脂质代谢。     

人血管平滑肌细胞低密度脂蛋白受体的表达与神经肽Y关系的研究

目的 :探讨人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体 (LDL -R)的表达与神经肽Y(NPY)之间的关系 ,以阐明NPY在动脉粥样硬化的发生发展中的重要地位。方法 :将第 3～ 4代融合生长的hVSMC分成10 -6mol/LNPY组和对照组 ,分别培养 6 ,12 ,2 4 ,4 8h四个时间段后 ,进行荧光免疫组化染色 ,然后在激光扫描共聚焦显微镜系统下 ,定量观察NPY对人血管平滑肌细胞的LDL -R表达的影响。结果 :各时间段中对照组hVSMC的LDL -R表达的平均荧光值分别为 2 5 2 7.4 5± 2 0 9.2 2 (6h) ,2 4 76 .6 6± 2 10 .2 8(12h) ,2 4 4 2 .6 5±189.16 (2 4h)和 2 4 2 8.39± 191.0 3(48h) ,各时间段之间均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而各时间段中NPY组hVSMC的LDL -R表达的平均荧光值分别为 2 2 80 .6 8± 174 .5 7(6h) ,1878.81± 15 4 .18(12h) ,184 0 .78±12 3.2 9(2 4h)和 172 1.6 8± 14 3.4 5 (48h) ,与相应时间段的对照组相比分别下降 9.76 % ,2 4 .14 % ,2 4 .6 4 %和2 9.10 % (P <0 .0 1) ,且各时间段之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,呈现一定的时间依赖效应。结论 :人血管平滑肌细胞的LDL -R表达受NPY下调作用的影响 ,可导致LDL -R介导途径障碍 ,从而使LDL在血管壁中沉积 ,这可能是NPY参与动脉粥样硬化发生发展的重要机制之一     

组织胚胎学课程建设的实践与设想

本文总结三年来组织胚胎学在教学文件、教学管理、教学改革、多媒体教学手段、开展学生第二课堂,推行素质教育以及科研、师培、师德师风建设等方面的做法及取得的成绩;提出下世纪高级医学人才的培养目标、教师应具备的素质、新时期学科教学改革的目标、学生创新素质的培养以及如何对教学效果进行综合评价等。     

细胞内游离钙离子在神经肽Y刺激血管平滑肌细胞增殖中的作用

为探讨细胞内游离钙离子在神经肽Ｙ刺激血管平滑肌细胞增殖过程中的变化，以体外培养的血管平滑肌细胞模型为研究对象，运用激光共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术，定量和动态观察了神经肽Ｙ对血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度与血管平滑肌细胞增殖间的相互关系。结果发现，神经肽Ｙ组中血管平滑肌细胞的增殖活度（ＭＴＴ法）和增殖细胞核抗原的表达较对照组明显增强；与此同时，神经肽Ｙ作用下体外培养的血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度也逐渐升高。此结果提示，神经肽Ｙ刺激血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号传导机制与神经肽Ｙ提高细胞内游离钙离子浓度有关。     

神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达与细胞内液pH变化的关系

为探讨细胞内液pH在神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡过程中的变化 ,以体外培养血管平滑肌细胞模型为研究对象 ,运用激光共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术 ,定量和动态观察研究神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因bcl 2和bax表达与细胞内液pH变化之间的关系。结果发现 ,在神经肽Y作用下 ,体外培养的血管平滑肌细胞凋亡相关基因bcl 2和bax表达的平均荧光值分别为 134 9.6 7± 10 8.2 8和 1397.5 0± 10 4.43,与对照组的 986 .6 4± 91.2 2和 10 6 0 .44± 10 7.5 4相比 ,差异明显 (P <0 .0 1) ,bax与bcl 2两者平均荧光值之比为 1.0 4;神经肽Y还可降低血管平滑肌细胞内液pH的平均荧光值 ,使细胞浆酸化。此结果提示 ,神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因的表达与神经肽Y降低细胞内液酸碱度、细胞浆酸化有关。