镇肝熄风汤对脑出血肝阳化风证患者外周血单个核细胞蛋白质组学的影响

目的:观察镇肝熄风汤治疗脑出血肝阳化风证(方证相应)前后外周血单个核细胞蛋白质双向凝胶电泳图谱的动态变化,探讨脑出血肝阳化风证的蛋白质表达规律,寻找镇肝熄风汤所作用的蛋白及疗效机制.方法:利用固相梯度双向凝胶电泳技术建立脑出血(10例)肝阳化风证镇肝熄风汤治疗10日前后及健康对照组(10例)外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,经PDQuest8.0软件分析,选取差异表达的蛋白质点,应用MALDI-TOF-MS质谱仪获得肽质量指纹图谱.用Mascot软件搜索数据库鉴定部分差异蛋白质.结果:筛选出22个差异表达蛋白质点,其中脑出血肝阳化风证与健康对照组比较有20个差异表达蛋白质点,8个表达下调,7个表达上调,5个缺失;脑出血肝阳化风证经镇肝熄风汤治疗后与健康对照组比较4个表达下调,5个表达上调,2个缺失,9个表达与健康人无明显差异;在挖取的20个蛋白质点中有8个得到鉴定,其中脑出血肝阳化风证与健康对照组比较6个表达下调,1个表达上调,1个缺失;脑出血肝阳化风证经镇肝熄风汤治疗后与健康对照组比较2个表达下调,1个蛋白缺失,5个表达与健康人无明显差异.结论:初步建立了脑出血肝阳化风证外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,初步鉴定了部分与脑出血肝阳化风证相关的蛋白及镇肝熄风汤可能的多靶点蛋白调节机制,这些蛋白功能涉及细胞代谢、信号转导、电子传递、细胞骨架等.     

应用多重PCR在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA 1基因

目的应用多重聚合酶链反应（PCR）法在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA 1基因。方法收集2004年10月-2005年7月湖南地区中南大学3所附属医院临床标本分离的多重耐药肠杆菌科细菌171株，以美国临床实验室标准化研究所（CLSI）规定的方法进行超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）表型确证试验，多重PCR进一步进行blaTEM、blaSHV、blaOXA 1三种耐药基因的检测。结果171株多重耐药的肠杆菌科细菌中，142株（83.04%）ESBLs表型检测阳性，经多重PCR扩增，105株获得阳性结果。根据扩增片段大小判断：检出携带blaTEM菌株85株，携带blaSHV菌株26株，携带blaOXA 1菌株10株，其中15株菌同时携带多种耐药基因。结论多重PCR可以快速、准确地检测出ESBLs表型阳性肠杆菌科细菌是否携带blaTEM、blaSHV、blaOXA 1基因。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的流行病学研究

目的了解某院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的感染和医院环境中MRSA的污染情况,研究临床和相应环境标本中MRSA的同源性,寻找MRSA医院感染的传染源及传播途径。方法采用Vitek-2细菌鉴定系统鉴定金黄色葡萄球菌;以头孢西丁纸片琼脂扩散法和mecA基因聚合酶链反应（PCR）鉴定MRSA随机扩增多态性DNA（RAPD）技术进行同源性分析。结果临床标本分离的金黄色葡萄球菌中,MRSA占58．54％（24／41）;环境标本分离的金黄色葡萄球菌中,MRSA占38．10％（16／42）。MRSA菌株经RAPD扩增后均可见数量不等（4～6条）的条带,分型率达100％。经聚类分析,24株临床MRSA菌株分为4型,其中以RAPDⅠ型为主（14株）;16株环境MRSA菌株分为3型,亦以RAPDⅠ型为主（13株）。烧伤科与神经外科各有4例患者及其周围环境分离出同源菌。结论该院临床标本及医院环境标本中MRSA分离率较高,RAPDⅠ型MRSA为其主要流行株且存在RAPDⅠ型MRSA菌株克隆传播。外源性途径是MRSA医院感染的主要来源。     

恶性血液病患者MDR1和MRP表达水平及其意义

用ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例急性白血病和６例多发性骨髓瘤患者ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达水平。结果显示：临床耐药患者ＭＤＲ１表达水平明显增高；与临床耐药之间呈显著正相关；与ＭＲＰ之间无明显相关性。表明ＭＤＲ１是临床耐药的主要机制。     

免疫血红蛋白法与转铁蛋白法检测胃液隐血结果比较

目的 评价并比较免疫血红蛋白法（IFOBT）与转铁蛋白法（Tf）在胃液隐血检测中的应用.方法 收集72例胃液标本（标本需在收集后1 h内检验完成,若不能及时检验需置于4℃冰箱保存）分别用血红蛋白胶体金试纸条、转铁蛋白试纸条进行隐血检测.结果 免疫血红蛋白法共检出阳性标本20例,阳性率为27.78%;转铁蛋白法检出阳性标本41例,阳性率为56.94%,两种检验方法结果差异有显著性（P＜0.05）,转铁蛋白法阳性率高于血红蛋白法.而联合检测（Tf＋IFOBT）阳性率增加到62.5%.通过胃液颜色与隐血检测结果分析发现,当胃液颜色为黑色、黑褐色、咖啡色时,绝大多数隐血试验为阳性.但是其他颜色的胃液也有阳性结果.结论 转铁蛋白法检测胃液隐血优于免疫血红蛋白法,联合检测可提高胃液隐血试验阳性率.     

联合检测血清透明质酸、Ⅳ型胶原及层黏蛋白对肝纤维化的诊断价值

目的：探讨血清透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（CIV）及层黏蛋白（LN）联合检测对肝伦的诊断价值。方法：采用酶联免疫法对健康人组22例、急性肝炎组10例、慢性肝炎组10例、肝硬化组25例及慢性重症肝炎组10例，分别检测血清HA，CIV及LN的水平；对肝硬化组三项指标分别检测和联合检测所得的敏感性、特异性及准确性进行比较。结果：血清中HA，CIVLN的水平以肝硬化组和慢性重症肝炎组最高，均明显高于其它组（P＜0.01）。肝硬化组联合检测的敏感性高于单项检测的敏感性，但其特异性降低。结论：联合检测HA，CIV及LN可提高诊断肝纤维化敏感性，但特异性降低；其中HA＋CIV的敏感性和特异性较高，为最优联合。     

HBV感染者病毒载量与外周血白细胞VCS参数的相关性探讨

目的 探讨不同病毒载量的HBV感染者外周血白细胞VCS相关参数的变化规律。方法 收集2016年9月～2017年5月湘雅医院200例HBV感染者作为实验组,根据其血液中HBV DNA量分为低于检测下限组、低中病毒载量组和高病毒载量组; 100例健康体检者作为对照组。采用DXH800血细胞分析仪检测各组血细胞,包括中性粒细胞平均体积(MNV)、中性粒细胞体积分布标准差(MNV-SD)、中性粒细胞平均传导率(MNC)、中性粒细胞传导率分布标准差(MNC-SD)、淋巴细胞平均体积(MLV)、淋巴细胞体积分布标准差(MLV-SD)、淋巴细胞平均传导率(MLC)、淋巴细胞传导率分布标准差(MLC-SD)、单核细胞平均体积(MMV)、单核细胞体积分布标准差(MMV-SD)、单核细胞平均传导率(MMC)、单核细胞传导率分布标准差(MMC-SD)以及淋巴指数(Lymph index)等VCS相关参数。组间比较采用t检验,采用受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),以评价VCS相关参数的诊断价值。结果 HBV低于检测下限组的MNC,MLV,MLC和MMC; HBV低中病毒载量组的MNC,MLV,MMC,MMC-SD和淋巴指数; HBV高病毒载量组的MNC,MLV,MLV-SD,MLC,MMC和淋巴指数与对照组比较,差异均有统计学意义(t=2.003～5.468,均P<0.05)。MMC在各实验组中曲线下面积为0.669～0.762,敏感度为62.0%～74.0%,特异度为57.1%～87.5%。结论 研究发现HBV感染时外周血白细胞VCS参数中的MNC,MMC,MLV,MLC和淋巴指数会发生变化且与HBV DNA载量变化有一定相关性,这些指标可以用于辅助判断HBV感染及复制程度和治疗效果评估。     

轮状病毒感染与小儿腹泻的关系

目的通过对小儿腹泻患者的粪便进行轮状病毒(Rotavirus,RV)的检测,探讨不同季节、不同年龄段小儿腹泻患者与轮状病毒感染的相关性,为小儿腹泻病因的诊断提供一种手段,帮助更好的诊断、治疗腹泻。方法收集2011年7-12月中南大学湘雅医院儿科门诊初步诊断为腹泻的患儿(0~5岁)粪便标本(139例),采用A群轮状病毒诊断试剂盒检测样本中A群轮状病毒抗原。结果 139例腹泻患儿粪便,35例轮状病毒抗原检测阳性,阳性率为25.18%;其中7-8月份阳性率为21.79%(17/78),9-10月份阳性率为22.58%(7/31),11-12月份阳性率为46.67%(14/30);0~1岁患儿阳性率为28.41%(25/88),1~2岁患儿阳性率35.29%(12/34),2~5岁患儿阳性率为5.88%(1/17);男性患儿阳性率23.26%(20/86),女性患儿阳性率33.96%(18/53)。结论 A群RV引起的婴幼儿急性腹泻主要集中在秋冬季,1~2岁的婴幼儿为A群RV感染的高峰期。男女婴幼儿间的感染率差异无统计学意义(P>0.05)。     

恶性血液病患者MDR_1和MRP表达水平及其意义

用ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例急性白血病和６例多发性骨髓瘤患者ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达水平。结果显示：临床耐药患者ＭＤＲ１表达水平明显增高；与临床耐药之间呈显著正相关（ｒ＝０．６１２，Ｐ＜０．０１）；与ＭＲＰ之间无明显相关性（ｒ＝０．０３５，Ｐ＞０．０５）。表明ＭＤＲ１是临床耐药的主要机制。