靶向Notch-1基因的siRNA对人脑胶质母细胞瘤细胞裸鼠体内成瘤性的影响

背景与目的:近些年的研究发现,Notch-1基因在人脑胶质母细胞瘤的发生、发展中起到了重要的作用.本研究旨在观察靶向Notch-1基因的小干扰RNA(siRNA)对人脑胶质母细胞瘤裸鼠体内成瘤性的影响.方法:以OligofectamineTM为载体将靶向Notch-1基因的SiRNA转染人脑胶质母细胞瘤细胞系TJ905中,并设立无意序列siRNA(nonsense siRNA)转染组.然后,把经Notch-1 siRNA和经无意序列siRNA转染的细胞及未经转染的细胞分为3组.每组细胞悬液注射裸鼠5只,注射量按1×107/mL无血清培养基注射入每只裸鼠皮下200 μL,观察动物的成瘤情况,每隔3 d记录-下裸鼠移植瘤的体积V=(ab2)/2(a为肿瘤的长径,b为肿瘤的宽径),并在接种成瘤后对各组动物进行相应的SiRNA/Oligofectamine TM混合物的瘤内注射治疗,对照组注射等量的PBS.观察20 d后处死动物,取出肿瘤组织,常规石蜡包埋,组织切片HE染色并进行Notch-1的免疫组化染色测定.结果:裸鼠处死后观察肿瘤直径:Notch-1 siRNA转染组为(1 203±206)mm3,siRNA转染组为(2 241±401)mm3,对照组为(2 309±466)mm3,Notch-1 siRNA转染组与无意siRNA转染组,以及Notch-1siRNA转染组与对照组之间比较均有统计学意义(P<0.05).免疫组化结果显示:Notch-1的表达在Notch-1siRNA转染组与其他两组之间的比较也同样具有统计学意义(P<0.01).结论:靶向Notch-1基因的siRNA可以通过有效地降低肿瘤细胞Notch-1的表达来抑制裸鼠皮下胶质母细胞瘤移植瘤的生长,但还需要对siRNA的合理使用剂量与转染方式进行更加深入的研究.     

继发与不继发糖尿病的肢端肥大症型垂体腺瘤患者的临床比较分析

目的：比较分析继发与不继发糖尿病的肢端肥大症型垂体腺瘤患者的临床资料,初步探讨肢端肥大症垂体腺瘤继发糖尿病的可能病理免疫学机制。方法回顾性分析2008年1月至2013年6月济宁医学院附属医院神经外科采用单鼻孔直达蝶窦入路显微手术切除的84例肢端肥大症垂体腺瘤患者的临床资料,运用免疫化学发光法测定术前基础血生长激素（GH）水平,使用多田公式（xyz／2）计算MRI上肿瘤体积,采用免疫组织化学的方法检测肿瘤内分泌激素的表达,采用χ2或t检验比较继发与不继发糖尿病的肢端肥大症垂体腺瘤患者在发病年龄、性别、发病时间、瘤体大小、基础血GH水平以及肿瘤激素免疫反应等方面的差异。结果20例（24％）肢端肥大症垂体腺瘤患者继发糖尿病。继发和不继发糖尿病的肢端肥大症垂体腺瘤患者男女均可发病（χ2＝1.944,P＝0.163）,发病年龄多集中在41～50岁（P＝0.652）,MRI显示瘤体大小均有微腺瘤、大腺瘤、巨大腺瘤,差异均无统计学意义（P＝1.000）;发病时间分别集中在1～5年（55％）、6～10年（45％）,差异有统计学意义（P＝0.004）;术前基础血GH水平分别为（42.83±8.70）ng／ml、（38.91±36.46）ng／ml,差异有统计学意义（t＝5.253,P＝0.031）。继发糖尿病的肢端肥大症垂体腺瘤患者促甲状腺激素（TSH）免疫反应平均光密度值（0.545±0.023）明显高于不继发糖尿病者（0.408±0.019）,差异有统计学意义（t＝5.336,P＝0.001）;TSH免疫反应阳性率（70％）亦明显高于不继发糖尿病的肢端肥大症患者（14％）,差异有统计学意义（χ2＝23.971,P＝0.000）。结论继发与不继发糖尿病的肢端肥大症垂体腺瘤患者在发病年龄、性别、瘤体大小方面无明显差别,但二者在发病时间、术前基础血GH水平及肿瘤病理免疫反应方面存在明显差别,肿?     

N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基口服基因疫苗的制备和激活SD大鼠产生循环抗体的初步报告

目的研制携带N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl，D-aspartate receptor subunit 1，NR1)的口服疫苗，探讨疫苗激活SD大鼠产生循环抗体的可能性。方法采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法构建NR1的表达载体；以磷酸钙共沉淀的方法转染HEK293细胞，并用G418筛选阳性细胞克隆；应用逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色方法鉴定阳性细胞株；经氯化钙法制备携带NR1表达载体的减毒鼠伤寒沙门(氏)菌口服疫苗(SL—NR1)；胃内灌注600μL、D(λ)260nm为0．6的SL—NR1，2周内4次给药；以阳性细胞株为靶细胞，用免疫荧光方法检测大鼠循环中NR1抗体滴度。结果扩增出NR1基因并构建了含有NR1基因的表达载体——pCDNA3．1-NR1；建立了细胞株HEK 293-NR1；证实口服疫苗可激活SD大鼠(23／25只)产生NR1抗体。结论成功研制了携带NR1基因的口服减毒鼠伤寒沙门(氏)菌活疫苗，其可激活机体免疫反应产生NR1抗体。     

肢端肥大症型垂体腺瘤MRI特点及其与血清GH水平、肿瘤GH表达水平的关系分析

目的探讨肢端肥大症型垂体腺瘤MRI特点及其与血清生长激素（GH）水平、肿瘤GH表达水平之间的关系。方法回顾性分析2008年1月~2013年6月采用经鼻蝶入路显微手术切除的84例肢端肥大症型垂体腺瘤患者的临床资料。结果 MRI显示肿瘤可突破鞍膈向鞍上生长、突破鞍底向蝶窦内生长,鞍下侵犯指数[（2.35±0.69）cm]明显高于鞍上侵犯指数[（0.66±0.25）cm;P〈0.01]。术前血清GH水平与瘤体大小、肿瘤GH表达水平之间无明显相关性（P〉0.05）。结论肢端肥大症型垂体腺瘤有明显的向蝶窦内优先侵犯生长的趋势;其术前血清GH水平、肿瘤GH表达水平及瘤体大小之间无明显相关性。     

肥厚性硬脑膜炎1例

肥厚性硬脑膜炎（hypertrophic cranial pachymeningitis,HCP）属罕见疾病,以局灶性或弥漫性硬脑膜肥厚为病理学特点,临床主要表现为慢性头痛,常伴有多组脑神经损害、局灶性脑损害。现将我科诊治的1例此类病例报道如下。     

多发性原发性颅内肿瘤(附40例报告)

多发性原发性颅内肿瘤临床上较少见,1990年1月～1999年12月我院共收治经手术及病理学证实者40例,现报告如下.1 临床资料1.1 一般资料 40例中男18例,女22例,2～72岁,平均45岁,其中30岁以下9例,30～60岁22例,60岁以上9例;病程最短者9天,最长者12年,平均18个月.     

新清肝饮对乙醇诱导脂肪肝大鼠肝脏一氧化氮和一氧化氮合酶活性的影响

酒精性脂肪肝 (ＡＦＬ)是酒精性肝病中最为常见的早期良性病变。本研究以小柴胡汤为阳性对照 ,观察乙醇诱导脂肪肝大鼠肝组织一氧化氮(ＮＯ)和一氧化氮合酶 (ｉＮＯＳ)的活性变化及新清肝饮的作用 ,探讨新清肝饮防治大鼠ＡＦＬ的作用机制。1　材料与方法1 1　动物及饲料 :选用ＳＤ大鼠 40只 ,雌性 ,体重 1 90± 2 0 ｇ ,二级动物 ,由河北省实验动物中心提供。普通饲料喂养 ,动物室温度 2 5±2℃。1 2　药物 :新清肝饮煎剂 (小剂量 1ｍｌ含生药1 44ｇ ,大剂量 1ｍｌ含生药 2 88ｇ)、小柴胡汤煎剂 ( 1ｍｌ含生药 0 63ｇ) ,由河北省中医药…     

外伤性脑动脉闭塞临床分析

外伤性脑动脉闭塞临床分析（０６２５５２）河北任丘华北石油总医院脑外科栗世方，刘汝佩外伤性脑动脉闭塞临床上较少见，由于其症状常被原发性脑损伤掩盖，且伤后２４ｈ内ＣＴ扫描不易发现，故早期诊断较困难。现将自１９９０年３月至１９９６年２月我科收治的２６例病人...     

骨髓间充质干细胞-胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统的

背景：体内研究已经证实骨髓间充质干细胞能够像神经干细胞一样在脑内迁移和整合,如果骨髓间充质干细胞用于系统途径移植成为可能,将会显著简化移植的步骤。 目的：构建含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因的重组表达质粒pEGFP-N3-CD,用脂质体Lipofectamine2000转染大鼠骨髓间充质干细胞,体外观察CD基因的表达及BMSCs-CD/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞的杀伤作用。 方法：构建pEGFP-N3-CD质粒,酶切、DNA测序鉴定。全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,脂质体Lipofectamine2000介导重组表达质粒pEGFP-N3-CD转染大鼠骨髓间充质干细胞。G418筛选培养获取阳性克隆(BMSCs-CD细胞),免疫细胞化学染色检测BMSCs-CD细胞的CD基因蛋白表达。Transwell小室共培养BMSCs-CD细胞和C6胶质瘤细胞,24 h后加入前体药物5-氟胞嘧啶,72 h后TUNEL、MTT、流式细胞术检测C6胶质瘤细胞的凋亡情况。 结果与结论：构建的重组表达质粒pEGFP-N3-CD含完整的CD基因序列,CD基因转染至骨髓间充质干细胞并在基因及蛋白水平有完整表达。BMSCs-CD和C6胶质瘤细胞体外共培养条件下,C6胶质瘤的凋亡率呈剂量依赖性,与对照组相比差异有显著性意义(P < 0.01)。结果提示体外共培养条件下,BMSCs-CD/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞生长有显著的抑制作用。     

大脑中动脉动脉瘤的影像学分型及对夹闭动脉瘤的指导价值

目的 术前根据大脑中动脉动脉瘤(MCAAs)的影像学特点进行分型并探讨其对术中夹闭的指导价值.方法 134例共发现168个动脉瘤,其中MCAAs 143个,术前按瘤顶指向分为4型:指向颞侧58个;额侧29个;侧裂后上方52个;侧裂后下方4个.除2例微动脉瘤肌肉包裹外,141个成功夹闭.结果 根据GOS评分,治愈(5分)111例占82.8％;自理(4分)14例占10.5％;重残或植物生存(3～2分)4例占3.0％;死亡(1分)5例占3.7％.结论 术前影像学分型,术中采用个体化手术技巧分离和夹闭动脉瘤,可减少脑血管痉挛的发生率,提高手术疗效.