慢性吸烟大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道Kv1.5、BKCa表达的变化

目的：观察吸烟对大鼠肺动脉平滑肌大电导的钙激活的钾通道（BK_Ca）和电压依赖性延迟整流钾通道Kv1.5蛋白和mRNA表达的影响，以阐明吸烟引起的肺血管反应性改变中钾通道表达的变化。方法：复制大鼠的慢性吸烟模型，采用HE染色、免疫组织化学染色、原位杂交等方法。结果：（1）慢性吸烟可降低大鼠肺动脉平滑肌 BK_Ca 蛋白和mRNA表达；（2）慢性吸烟可降低大鼠肺动脉平滑肌Kv1.5蛋白和mRNA表达；（3）大动脉 BK_Ca的降低程度大于Kv1.5，小动脉 BK_Ca和Kv1.5的降低程度无明显差异。结论：慢性吸烟可下调大鼠肺动脉平滑肌钾通道 BK_Ca和Kv1.5的表达水平，是导致肺血管反应性增高的机制之一。     

褪黑素预处理对抗油酸引起的大鼠急性肺损伤

目的：评估褪黑素预处理对油酸引起的大鼠急性肺损伤的拮抗作用。方法：24只大鼠随机分为生理盐水组、油酸组和褪黑素预处理组3组，检测大鼠肺泡灌洗蛋白、肺的湿干比重、丙二醛、超氧化物岐化酶水平，并进行肺的病理组织学检查。结果：（1）静脉注射0.15 mL/kg油酸引起肺泡灌洗蛋白、肺的湿干比重显著增高（P<0.01），病理组织学检查发现有肺出血、肺水肿、肺泡间隔增厚以及肺泡腔出现炎性细胞，导致严重的急性肺损伤；（2）提前60 min腹腔注射20 mg/kg褪黑素明显减轻上述的症状，与丙二醛的降低（P<0.01）和超氧化物岐化酶的升高（P<0.01）相一致。结论：褪黑素预处理可通过清除和防止自由基的形成，进一步降低肺泡毛细血管膜通透性的增加，从而减轻油酸引起的大鼠急性肺损伤。提示褪黑素可能在急性肺损伤的防治中是有效的。     

人转铁蛋白-阿霉素结合物对耐阿霉素K562细胞的体外杀伤作用

目的 探讨阿霉素（ＡＤＭ）与人转铁蛋白（Ｔｆ）结合物对耐阿霉素Ｋ５６２细胞株的体外杀伤作用。方法 采用葡聚糖（ＤＥＸ）Ｔ－１０作为中介体、联接Ｔｆ与ＡＤＭ制备结合物Ｔｆ－ＡＤＭ,用ＭＴＴ法比较结合物对耐ＡＤＭ及ＡＤＭ敏感的Ｋ５６２细胞的体外杀伤作用强度。结果 结合物对耐ＡＤＭ的Ｋ５６２细胞株７２ｈ培养、ＭＴＴ法测定结合物对耐ＡＤＭ的Ｋ５６２细胞ＩＣ５０为４．９μｍｏｌ,游离ＡＤＭ的ＩＣ５０〉１７．２４μｍｏｌ,Ｔｆ对这两种细胞都没有体外杀伤作用。结论 结合物Ｔｆ－ＡＤＭ可提高ＡＤＭ对耐ＡＤＭ的Ｋ５６２细胞株的杀伤作用,此作用与Ｔｆ无明显关系。     

卡马西平对维库溴铵肌松时效的影响

目的　观察卡马西平对维库溴铵肌松时效的影响。方法　择期神经外科手术患者 4 2例 ,ASAⅠ -Ⅱ级 ,A组 (n =10 )肿瘤组 ,无癫痫病史及抗惊厥药服用史 ;B组 (n =10 )癫痫病史 2 2天至 2年 ,未服用抗惊厥药 ;C组 (n =12 )癫痫病史 2 7天至 2年 ,持续服用卡马西平控制病情 ;D组 (n =10 )癫痫病史 9- 12年 ,持续服用卡马西平控制病情。麻醉诱导均采用芬太尼 2 μg/kg、异丙酚 2mg/kg、瑚珀胆碱 1.5mg/kg。TOF(四个成串刺激 )恢复 10 0 %后 ,采用异氟醚 (1MAC)维持麻醉 ,持续 15min时 ,静注维库溴铵 0 .1mg/kg ,用肌松监测仪监测四组TOF的变化。结果　维库溴铵的起效时间四组间均无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,临床作用时间 ,TOF恢复 75 %的时间 ,恢复指数 ,A、B组间无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但C、D组分别比A、B组明显缩短 (P <0 .0 5 ) ,D组又比C组明显缩短 (P <0 .0 5 )。结论　术前服用卡马西平可降低维库溴铵的肌松作用 ,缩短肌松恢复时间 ,且随服用卡马西平持续时间的延长影响程度就越强     

几种血管活性药物对失血性休克大鼠肠系膜微循环的影响

目的:比较几种血管活性药物对失血性休克大鼠肠系膜微循环的影响。方法:选取SD大鼠,随机分为正常对照组(A组),失血性休克模型组(B组),生理盐水处理组(C组),多巴胺处理组(D组),去甲肾上腺素处理组(E组),山莨菪碱处理组(F组)。实验采用动脉放血至动脉血压为60mmHg左右,同时观察肠系膜微循环状态改变来复制失血性休克大鼠模型;各组行相应药物处理后,分别测量动脉血压和检测肠系膜微循环相关指标,并进行比较分析。结果:B组大鼠动脉血压、肠系膜微血管出/入口管径、血流速度明显低于A组(P<0.05或P<0.01),血液流态由线流改变为粒流。与B组比较,几种血管活性药物(D、E、F组)对失血性休克大鼠动脉血压均有显著升高作用,依次为去甲肾上腺素>多巴胺>山莨菪碱(P<0.05或P<0.01),多巴胺对微血管出/入口管径恢复明显(P<0.01),山莨菪碱和多巴胺对肠系膜血流速度有明显改善(P<0.01或P<0.05),山莨菪碱还能使肠系膜血流流态恢复为线流。结论:实验性治疗失血性休克需适度补充血容量,同时选用山莨菪碱改善肠系膜微循环,有利于休克复苏。     

阿维A胶囊治疗重症银屑病124例

银屑病是由遗传因素和环境因素共同作用所致的慢性炎症性皮肤病,我科2003年1月至2007年7月采用阿维A胶囊治疗银屑病124例,取得比较满意的疗效,现将结果报道如下。资料与方法1病例选择124例患者均为住院病人,男89例,女35例。年龄16~81岁,平均年龄47&#177;11.8岁,病程1个月至40年,平均13.7&#177;5.7年。寻常型银屑病57例,红皮病型28例,脓疱型37例,关节病型2例。皮损面积均大于体表面积60%。所有患者入院查肝肾功、血脂、尿常规均正常,其中24例脓疱型银屑病血常规中白细胞总数高于正常外,其余指标正常。10例红皮病型银屑病患者合并2型糖尿病,口服降糖药血糖正常。所有病患无妊娠期,无哺乳妇女,无两年内计划妊娠者,就诊前未使用维A酸类和抗代谢药物或曾使用,但疗效欠佳且已停药6个月以上。2治疗方法阿维A剂量30~50mg/d(体重低于40kg以及年龄大于70岁者一般采用30mg/d)分次或顿服并随食物同服,临床症状控制后根据不同情况每2~3周减10mg并给予10mg维持量,疗程至少3月,未使用其他治疗银屑病的药物。3疗效判断标准治愈:红斑、鳞屑或脓疱以及关节症状消退90%以上或完全消退;显效:红斑、鳞...     

EGFP-Cre重组酶真核表达重组质粒的构建及表达

目的 构建噬菌体P1 Cre重组酶真核表达重组质粒,检测其在体外的表达情况和生物学活性.方法 利用分子克隆技术,将cre编码序列克隆到真核表达质粒pIRES2-EGFP上,构建为重组质粒pCMV-Cre-EGFP.行菌液PCR、BamHⅠ酶切及测序鉴定,用FuGENE 6介导转染293T细胞,应用荧光显微镜和流式细胞仪观察分析Cre重组酶的表达和重组效应.结果 经菌液PCR、酶切及测序等鉴定分析,证实已将目的片段cre插入pIRES2-EGFP的多克隆位点上;建立Cre( )组(pCMV-Cre-EGFP和含Loxp-CMV-RFP-Loxp的pCSilencer质粒)和Cre(-)组(pIRES2-EGFP和pCSilencer),转染293T细胞,48 h后荧光显微镜下可见2组均表达绿色荧光和红色荧光,Cre( )组的红色荧光少于Cre(-)组;流式细胞仪检测荧光蛋白表达率,统计学分析显示2组细胞的红色荧光蛋白表达率存在显著性差异(P＜0.01).结论 成功构建噬菌体P1Cre重组酶表达重组质粒,并能在体外表达具有活性的Cre重组酶.     

增殖诱导配体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的 检测增殖诱导配体（APRIL）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达水平，探讨APRIL在SLE发病中的意义。方法 采用半定量RT-PCR法检测36例SLE患者及17例正常人PBMC的APRILmRNA表达，并与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关性分析。结果 SLE患者活动期组和非活动期组APRIL mRNA表达水平均明显高于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），活动期组较非活动期组增高更明显（P〈0．01）；SLE患者APRILmRNA表达水平与SLEDAI评分呈正相关（r=0．6725，P〈0．01）。结论 SLE患者APRILmRNA表达水平的增高，可能在SLE的发病机制中具有重要作用。     

实验性自身免疫性卵巢功能早衰中IL-2和IFN-γ的检测

目的:探讨Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ在自身免疫性卵巢功能早衰(POF)中的表达.方法:分别用猪卵透明带(PZP)抗原和PBS缓冲液注射免疫Balb/c小鼠,共免疫3次,每2W免疫1次,经过3次免疫后,观察各组卵巢组织病理形态,并测定各组IL-2和IFN-γ水平.结果:PZP免疫小鼠卵巢组织形态明显改变,且Th1性细胞因子IL-2和IFN-γ表达均明显高于对照组.结论:自身免疫性卵巢功能早衰与T细胞介导的Th1型免疫应答有关.     

心房颤动患者心房组织中的胶原重构

 目的 研究风湿性心脏瓣膜病心房颤动(房颤)患者心房组织中胶原表达的变化,探讨房颤患者心房纤维化的机制及其在房颤发生、持续中的作用.方法 75例风湿性心脏瓣膜病接受换瓣置换手术者分为3组,其中窦性心律组34例,阵发性房颤组11例,慢性房颤组30例,于术中获取右心耳组织约100 mg,采用苦味酸天狼猩红染色法对心房组织胶原沉积量及分布情况进行分析,应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,测定心房组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的mRNA水平.结果 (1)房颤患者心房组织存在明显纤维化,纤维化程度与左心房内径(r=0.390, P=0.001)、房颤持续时间呈正相关(r=0.320,P=0.005);(2)与窦性心律 组比较,Ⅰ型胶原的mRNA在阵发性房颤患者(P＜0.05)、慢性房颤患者(P＜0.001)心房组织中的表达均明显增加;房颤患者Ⅲ型胶原的mRNA表达虽有增加,但差异无统计学意义.Ⅰ型胶原的mRNA表达水平与左心房内径(r=0.336,P=0.004)、房颤持续时间 (r=0.339,P=0.003)呈正相关.结论 房颤患者心房组织存在明显纤维化,Ⅰ型胶原的分子重构可能是房颤时心房纤维化发生的分子机制之一,与房颤的发生和持续有关.