实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型的建立

目的 为深入研究人类多发性硬化症建立EAE大鼠模型。方法 采用双后退足垫皮内注射豚鼠全脊髓匀浆（GPSPH）-福氏完全佐剂（CFA）混合乳剂，辅以注射百日咳疫苗，诱导Wistar大鼠EAE模型。取对照及发病高峰期大鼠脑、脊髓组织，常规病理切片，HE染色。ELISA法检测血清MBP抗体。结果 一次性双后腿足垫皮内注射GPSPH-CFA混合乳剂可诱导Wistar大鼠EAE模型，临床症状约在造病后10-15d出现。同时注射百日咳疫苗能提高发病率和发病程度。EAE大鼠脑、脊髓组织HE染色见大量淋巴细胞浸润，在血管周围形成淋巴鞘，但未见脱髓鞘改变。与对照组相比，EAE大鼠血清中抗MBP抗体明显增高。结论 非敏感品系Wistar大鼠可用于制备EAE动物模型。发病大鼠除有EAE临床症状外，还伴有中枢神经系统炎性改变和血清MBP抗体的增高。     

壳聚糖和益生菌对免疫抑制性异育银鲫正向调节作用的研究

本研究旨在应用环磷酰胺诱导建立的免疫抑制性异育银鲫的实验模型,以研究壳聚糖和益生菌壳聚糖和益生菌对异育银鲫免疫功能的影响。实验分别设立基础饲料、生理盐水为对照,基础饲料、环磷酰胺为阴性对照组,实验饲料加注环磷酰胺为实验组。饲养异育银鲫(体重123.2±4.8)g 30 d,在实验的第15天按10 mg/kg.bw的剂量给实验组和阴性对照组的每尾鱼注射环磷酰胺液,空白对照组每尾鱼注射等量生理盐水,每隔5 d注射1次,共注射3次。第3次注射后的第6天,分别取各组鱼的外周血和头肾为实验标本材料。以瑞氏染色计数和分析外周血白细胞数量及分类,白细胞吞噬白色葡萄球菌的活性。应用硝酸还原酶法测定NO含量,比浊法测定头肾溶菌酶活力。采用IFN-αELISA试剂盒和ABC-HRP方法测定IFN-α、ELISA法测定IgM含量。采用靶细胞乳酸脱氢酶释放法测定外周血NK细胞杀伤活性以及采用3H-TdR掺入法测定外周血淋巴细胞转化能力。实验结果表明:阴性对照组各项免疫指标均显著低于空白对照组;添加的壳聚糖和益生菌能够不同程度地恢复免疫抑制实验组的大多数免疫指标。三种壳聚糖的免疫调节能力各不相同,分子量居中的壳聚糖A的调节能力较强;分子量较大的壳聚糖B的调节能力较弱;壳聚糖C的调节能力并没有随添加量的增加而提高。因此,本研究的初步结论为:壳聚糖的免疫调节能力受分子量的影响较大,并不与添加量成正比,而适量的壳聚糖或益生菌能够不同程度地消除鱼类的免疫抑制,具有使其拓展成为鱼类免疫功能调节剂的前景。     

髓鞘碱性蛋白(MBP)特异的Wistar大鼠T细胞系的建立

目的：建立特异的大鼠T细胞系,为T细胞疫苗的研制打下基础。方法：采用足垫皮内注射豚鼠全脊髓匀浆（GPSCH）－福氏完全佐剂（CFA) 合乳剂和百日咳疫苗,诱导Wistar大鼠EAE模型。腹股沟淋巴结细胞经豚鼠髓鞘碱性蛋白（GPMBP）反复刺激,^3H-TdR掺入法筛选针对GPMBP特异增殖的T细胞。FACS检测T细胞表型。RT－PCR测定T细胞的细胞因子格局。结果：一次性足垫皮内注射GPSCH－CFA混合乳剂可诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型,并证实了同时注射百日咳疫苗能提高发病率和发病程度。EAE大鼠脑、脊髓组织HE染色见大量淋巴细胞浸润,在血管周围形成淋巴鞘、但未见脱髓鞘改变。T细胞对GPMBP呈特异性增殖,为CD4^ 表型。RT－PCR结果显示T细胞IL－2和IFN－γmRNA表达水平较高,TNF-α亦低水平表达。结论：Wistar大鼠可用于制备EAE动物模型。GPMBP特异性T细胞系为CD4^ 表型,呈TH1类细胞因子格局。     

鸡胶原Ⅱ型诱导大鼠类风关模型的建立

用鸡胶原Ⅱ型（chicken collagen Ⅱ,CCⅡ）和完全弗氏佐剂免疫Wistar大鼠诱导胶原性关节炎,建立自身免疫性类风湿性关节炎（RA）实验动物模型。以ELISA法检测实验组和对照组动物血清中的CCⅡ抗体的水平,同时采用组织病理学和X射线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征,并对其血液和滑膜液进行微生物学鉴定。结果显示,用CCⅡ和完全弗氏佐剂免疫的实验组大鼠关节炎的发病率为80％,同时在免疫后25d,关节炎指数为最高（AI＝7．8）。ELISA法检测抗CCⅡ抗体结果显示,实验组大鼠血清中抗CCⅡ抗体的水平均较各对照组大鼠明显增高（P＜0．001）。组织病理学和X－射线摄片结果显示,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。微生物鉴定结果均为阴性。本实验成功建立了胶原诱导的大鼠关节炎模型,且其病理特征和人类RA极为相似,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。     

T细胞无能与凋亡关系初探

目的：探讨无能Ｔ细胞与凋亡的关系。方法：利用Ｂ７－１单抗和环孢素Ａ（ＣｓＡ）联用处理ＡＰＣ即Ｔ细胞系统,在体外诱致抗原特异性Ｔ细胞无能,用ＰＩ染色法经ＦＡＣＳ分析了无能Ｔ细胞的凋亡,用ＲＴ－ＰＣＲ法检测了凋亡细胞Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达水平。结果：无能Ｔ细胞在１、３、５、１０ｄ细胞凋亡的百分率依次为２．１６％１１．２８％、１９．２７％、４１．２２％。当加入１００Ｕ／ｍｌ ＩＬ－２维培养,无能Ｔ细胞为     

鸡胶原II型诱导大鼠类风关模型的建立

用鸡胶原II型 (chickencollagenII,CCII)和完全弗氏佐剂免疫Wistar大鼠诱导胶原性关节炎 ,建立自身免疫性类风湿性关节炎 (RA)实验动物模型。以ELISA法检测实验组和对照组动物血清中的CCII抗体的水平 ,同时采用组织病理学和X射线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征 ,并对其血液和滑膜液进行微生物学鉴定。结果显示 ,用CCII和完全弗氏佐剂免疫的实验组大鼠关节炎的发病率为 80 %,同时在免疫后 2 5d ,关节炎指数为最高 (AI=7 8)。ELISA法检测抗CCII抗体结果显示 ,实验组大鼠血清中抗CCII抗体的水平均较各对照组大鼠明显增高 (P <0 0 0 1)。组织病理学和X 射线摄片结果显示 ,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。微生物鉴定结果均为阴性。本实验成功建立了胶原诱导的大鼠关节炎模型 ,且其病理特征和人类RA极为相似 ,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。