利用脊柱骨来源骨髓细胞建立急性移植物抗宿主病模型

目的探讨利用脊柱骨来源骨髓细胞建立小鼠异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,Allo-HSCT)急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型的可行性。方法选择C57BL/6(H-2b)雄性小鼠为供体鼠,BALB/c(H-2d)雌性小鼠为受体鼠。制备供体鼠的脾细胞和脊柱骨来源骨髓细胞悬液。受体鼠采用药物加小剂量辐照的预处理方式,于移植前8d～移植前4d腹腔注射氟达拉滨(200mg/kg),接着移植前3d～移植前1d腹腔注射环磷酰胺(60mg/kg),最后在移植前进行全身照射(total-body irradiation,TBI),照射剂量为4Gy(戈瑞)。18只受体鼠经预处理后随机分为3组,每组6只:(1)骨髓移植组,只输入1×107个脊柱骨来源骨髓细胞;(2)aGVHD组,输注1×107个脊柱骨来源骨髓细胞和5×106个脾细胞,建立aGVHD模型;(3)空白对照组,不输入任何细胞。观察3组小鼠生存状态及存活率,取aGVHD组与骨髓移植组存活21d的受体鼠进行病理学检查,取aGVHD组移植后21～28d存活的小鼠的脾脏进行流式细胞术检测骨髓细胞嵌合度。结果骨髓移植组小鼠全部存活,可重建造血,单纯输注骨髓细胞不会诱发aGVHD。aGVHD组小鼠出现aGVHD表现,100%发生aGVHD相关死亡,中位生存期为18d;病理检查结果显示符合aGVHD病理表现,移植后21～28d存活的小鼠诊断为供受体混合嵌合状态,符合aGVHD诊断标准。结论用脊柱骨来源骨髓建立的aGVHD模型完全符合标准,且更加经济,适合大规模建模。     

回肠直动脉及器官表面动脉的形态观测

目的 :通过对回肠直动脉分支类型、管径、间距以及器官表面动脉吻合网眼密度 (吻合网眼数 /统计肠总面积 )的观测 ,研究回肠直动脉对血供的影响。方法 :选取成人及 2～ 6岁小儿尸体进行股动脉插管、乳胶灌注后解剖剥离 ,观察分支类型并测量其管径、间距以及单位面积吻合网眼密度。结果 :回肠各段直动脉、管径、间距均有所不同 ,其管径平均为 (0 .6 1± 0 .0 2 )mm、(0 .5 3± 0 .0 3) mm、(0 .5 1± 0 .0 1) mm ,间距为 (2 .2 1± 1.6 4 ) m m、(2 .17± 1.17) m m、 (2 .85± 0 .4 6 ) m m ,分支以 2支型为主 ,占 4 0 .2 3%、4 3.4 2 %和 4 3.5 2 %。结论 :回肠各段直动脉管径、间距有所不同。     

整合素α6β4和实验性变态反应性神经炎

目的 :研究整合素α6和 β4在实验性变态反应性神经炎 (experimentalallergicneuritis,EAN)中的表达变化 ,探讨其表达变化与病变过程中髓鞘损伤和修复的关系。方法 :建立Lewis大鼠EAN动物模型 ,分别在急性期和恢复期的模型鼠坐骨神经 ,用免疫组化的方法观察α6、β4及层黏连蛋白的蛋白表达状况 ;用原位杂交的方法检测α6 β4的mRNA的表达状况。 结果 :免疫组化结果表明 ,β4在急性期表达减少 (P <0 .0 5 ) ,恢复期表达无明显变化(P =0 6 84 0 )。α6和层黏连蛋白在病变急性期和恢复期与对照组比较变化均不明显 (α6P =0 .0 75 1 ,层黏连蛋白P=0 .2 0 4 7) ,原位杂交也得出相似结论 (急性期 β4P <0 .0 5 ,恢复期β4P =0 .82 3;α6P =0 .81 )。 结论 :炎症损伤影响了施万细胞 (Schwanncell,SC)整合素的表达 ,其表达模式与周围神经的胚胎发育过程中α6 ,β1及β4的表达变化相似 ,推测 β4与髓鞘再形成的关系更加密切。α6和 β4表达变化与髓鞘的损伤和修复过程密切相关。     

踝关节骨折脱位伴下胫腓联合分离46例手术治疗体会

踝关节骨折脱位伴下胫腓联合分离是临床常见的骨折脱位之一,近年来有明显上升的趋势,严重影响着人民群众的身心健康[1]。根据有关资料统计,踝关节骨折脱位伴下胫腓联合分离的发生率与年龄、性别有关,多发生于老年女性。踝关节是一个复合关节,其稳定性与灵活性十分重要[2]。大量解剖学、生物力学以及临床研究结果表明,踝关节具有重要作用。因此,手术治疗踝关节骨折脱位伴下胫腓联合分离十分必要。现对我院踝关节骨折脱位伴下胫腓联合分离患者46例的手术     

腹腔镜下治疗成人脐尿管囊肿的临床分析

目的 探讨腹腔镜下脐尿管囊肿切除术治疗脐尿管囊肿的临床疗效.方法 回顾性分析2011年10月至2015年10月本院5例脐尿管囊肿患者进行腹腔镜下脐尿管囊肿切除术的临床资料及手术结果.结果 5例患者中4例手术获得了成功,其中1例术前具有腹膜炎体征的患者中转为开放手术,术中均无大出血、周围及腹腔脏器损伤等严重并发症;手术时间平均108 min(60～ 150 min),失血量平均约37 mL(20～65 mL),术后住院天数平均8d,2周后均恢复日常活动.4例患者术后病检证实脐尿管囊肿,1例病检回报示脐尿管肉芽肿性炎症,倾向于结核,术后给予抗结核治疗半年;所有患者随访6个月到1年,术后无肉眼血尿、切口感染及囊肿复发、恶变等.结论 腹腔镜下脐尿管囊肿切除术安全有效,可以作为治疗脐尿管囊肿的首选手术方式.对于不伴有脐尿管膀胱瘘者,可不必同时行膀胱袖口切除术.     

过表达miR-519d-3p通过降低DU-145前列腺癌细胞TRAF4水平抑制其增殖

目的观察微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)对前列腺癌细胞增殖的影响,并探讨可能的分子机制。方法通过荧光实时定量PCR检测PC-3、DU-145、22RV1、PC-3M、LNCa P人前列腺癌细胞和RWPE-1人正常前列腺上皮细胞中miR-519d-3p的表达水平。以miR-519d-3p表达水平最低的DU-145前列腺癌细胞为转染对象,转染miR-519d-3p模拟物或阴性对照微小RNA(miR-NC)并验证转染效率。采用流式细胞术检测miR-519d-3p对前列腺癌细胞细胞周期的影响,MTT法检测前列腺癌细胞的增殖能力。生物信息学软件预测并应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-519d-3p的靶基因。荧光实时定量PCR检测miR-519d-3p靶基因的表达水平,Western blot法检测靶基因蛋白及下游转化生长因子β(TGF-β)信号通路蛋白表达水平。结果与正常前列腺上皮细胞相比,miR-519d-3p在前列腺癌细胞的表达水平显著降低,DU-145细胞表达水平最低。DU-145细胞转染miR-519d-3p模拟物后,细胞miR-519d-3p的表达水平显著增加。过表达miR-519d-3p将前列腺癌细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期并降低细胞的增殖能力。生物信息学预测及双荧光素酶报告基因证明肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)为miR-519d-3p的靶基因。过表达miR-519d-3p可明显降低前列腺癌细胞中TRAF4基因及下游TGF-β信号通路蛋白的表达水平。结论 miR-519d-3p在前列腺癌细胞中低表达,过表达miR-519d-3p通过抑制TRAF4的表达抑制DU-145前列腺癌细胞的增殖。     

川芎-白芷药对不同配比不同剂型对 偏头痛动物模型的影响

目的:观察川芎-白芷药对不同配比、不同剂型对偏头痛动物模型的影响。方法:利用硝酸甘油(10 mg.kg-1)ip一次造成大鼠偏头痛模型,sc利血平(0.4 mg.kg-1)7 d造成小鼠偏头痛模型,川芎-白芷药对3.5 g.kg-1.d-1进行治疗,对模型动物脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、降钙素基因相关肽(CGRP)含量进行检测。结果:偏头痛大鼠模型组脑组织中5-HT含量(720.44±92.1)ng.g-1,CGRP含量(618.32±139.3)pg.g-1;与模型组比较,川芎-白芷药对不同配比、不同剂型3.5 g.kg-1.d-1可升高偏头痛大鼠脑组织中5-HT 48.41%～73.18%,降低头痛大鼠脑组织中CGRP 38.02%～50.02%(P<0.01);与小鼠偏头痛模型组比较,川芎-白芷药对不同配比、不同剂型5 g.kg-1.d-1可升高偏头痛小鼠脑组织中5-HT 36.60%～69.52%(P<0.05,P<0.01)。结论:川芎-白芷药对不同配比、不同剂型主要是通过影响单胺类递质的释放,缓解神经源性炎症而改善偏头痛的症状。     

回肠膀胱术与原位回肠新膀胱术近期临床疗效比较

目的：探讨分析全膀胱切除术后两种尿流改道术式的临床效果差异。方法：回顾分析57例膀胱癌患者,其中行回肠膀胱术35例,原位回肠新膀胱术22例,对两组患者在出血量、手术时间、术后平均住院天数、住院费用以及术后早期并发症发生率等方面的情况进行统计学比较分析。结果：回肠膀胱术组的手术出血量l000（650,1400）ml较原位回肠薪膀胱术组500（300,6001ml为多,而在术后平均住院天数和住院费用方面,回肠膀胱术组则少于原位回肠新膀胱术组．分别为25d和39d,21078．74（18840．13,28140．02）元和36483．13（33496．01,45464．16）元,差别均具有统计学意义（P〈O．05）。两组在手术时间[（393±74与416±113）min】、术后早期并发症发生率（62．9％与63．6％）、围手术期死亡率（2．9％与4．6％）等方面无统计学差异（P〉O．05）。结论：回肠膀胱术与原位回肠新膀胱术都是目前较好的膀胱全切术后尿流改道方式,二者各有优缺点,应根据患者的个体情况选择合适的手术方式。