非手术性甲状旁腺功能减退症患者T淋巴细胞亚群的改变

目的分析比较非手术性甲状旁腺功能减退症(non-surgical hypoparathyroidism,ns-HP)患者与慢性淋巴细胞性甲状腺炎(慢甲炎)患者、健康对照外周血调节性T淋巴细胞(Tregs)、辅助性T淋巴细胞1型(Th1)及Th17亚群的分布。方法 2018年7月至2019年3月北京协和医院内分泌科门诊随诊的ns-HP和慢甲炎患者各20例,及对照20名,3组研究对象根据性别和年龄匹配。用流式细胞仪测量Tregs、Th1和Th17细胞百分比。用多元线性回归探索影响淋巴细胞亚群的因素。结果 ns-HP组和慢甲炎组患者血液Tregs百分比均低于对照组(P0.05和P0.01),而Th17细胞百分比高于健康对照(P0.05和P0.01)。在ns-HP组患者中,未发现Tregs和Th17细胞比例的独立影响因素。结论 ns-HP发病可能与T淋巴细胞亚群分布的改变相关。     

非受体型酪氨酸激酶-Syk蛋白的提取与纯化

目的 :从转染syk基因的Sf2 1细胞中提取、纯化免疫相关因子Syk蛋白。方法 :将syk基因转染Sf2 1细胞 ,于 2 8℃培养 48h ,收集细胞 ,用超声波破碎仪裂解细胞 ,提取裂解液中总蛋白 ,用Yellow 3凝胶和Toyopearl AF Heptin 650M凝胶层析柱分离、纯化。层析液中的Syk蛋白存在和性质 ,用SDS PAGE、免疫印迹实验和等电聚焦实验鉴定。结果 :从 2 5亿个Sf2 1细胞裂解液中提取了含有Syk的 2 2 5mg蛋白质。经Yellow 3凝胶层析分离 ,得到两个亚种的Syk蛋白 ,相对分子质量 (Mr)均为72× 10 3 。进一步用Toyopearl AF Heptin 650M凝胶层析纯化后 ,得到两个纯的Syk蛋白 ,SDS PAGE、免疫印迹实验结果显示 ,两种Syk的Mr 均为 72× 10 3,与Syk的理论相对分子质量吻合。但等电聚焦实验显示 ,这两种Syk蛋白成分具有不同的pI值。结论 :从 2 5亿个转染syk基因的Sf2 1细胞中纯化出8mgSyk蛋白 ,纯度高于 95%。这两种Syk的Mr 虽然相同 ,但具有不同的pI值 ,是两个亚种。这些Syk可用于研究Syk的作用机制、抗Syk抗体的制备和Syk诊断试剂盒的制备等     

21－羟化酶CYP21B基因Ile~（172）→Asn错义突变

为了解先天性肾上腺皮质增生症患者的２１－羟化酶ＣＹＰ２１Ｂ基因中Ｉｌｅ~（１７２）→Ａｓｎ错义突变的发生率，根据放大受阻突变体系（Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ＡＲＭＳ）的要求，设计了３种引物：５＇ｄ（ＴＴＧＧＧＡＧＡＣＴＡＣＴＣＣＣＴＧＣＴＣＴ）３＇（共同引物）、５＇ｄ（ＡＧＧＴＧＡＧＧＴＡＡＣＡＧＡ）３＇（正常引物）、５＇ｄ（ＡＧＧＴＧＡＧＧＴＡＡＣＡＧＴ）３＇（突变引物），在７例患儿中进行了检测，发现具有本突变者３例。对其中一例进行的家系分析，结果提示：这组引物有快速、简便的优点，不需使用同位素就能对具有Ｉｌｅ~（１７２）→Ａｓｎ变异的高危家庭成员作产前诊断。     

鼠巨细胞病毒感染细胞热休克蛋白70与细胞毒T细胞活性的相关性研究

目的体外研究小鼠巨细胞病毒（murine cytomegalovirus,MCMV）感染细胞热休克蛋白70与细胞毒T细胞（CTL）活性相关性。方法体外培养小鼠胚肺细胞,在加入MCMV后16、24、48、72、120h分别收获细胞,用免疫组织化学方法检测HSP70表达情况;CTL活性检测组：体外培养小鼠胚肺细胞,设以下各组：正常细胞对照组,病毒感染组,病毒感染＋放线菌素组,病毒感染＋槲皮素组,病毒感染＋HSP70抗体组,分别在以上时相选用^51Cr释放试验检测CTL活性。结果MCMV感染诱导小鼠胚肺细胞表达HSP70,与正常细胞对照组比较,各时相HSP70表达强度差异均具有显著性,其中16h始升高,120h表达最强。病毒感染组：CTL活性升高,与其它各组比较,各时相差异均具有显著性意义,自16h始升高,120h达最高;放线菌素组、槲皮素组、HSP70抗体组,CTL活性均无显著性差异,自16h始升高,120h达最高,与正常细胞对照组比较,CTL活性均升高。结论MCMV感染细胞热休克蛋白70与CTL的活性具有一定相关性。     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅱ.酶标霍乱弧菌单克隆抗体快速检测霍乱弧菌的实验研究

本文就所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中有种特异性的三株(2B_1H_1C_6,2B_1H_1F_6及2B_1H_1F_3)单克隆抗体及抗霍乱弧菌多克隆抗体,作酶标抗体直接法和间接法,对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,探究在临床诊断应用中的价值。结果表明,酶标McAb较酶标多克隆抗体敏感,前者在10~4/ml菌时可以检出,后者要在10~4～10~6/ml菌时才能检出;同时表明酶标间接法比直法敏感,特异性实验结果显示酶标单克隆抗体对10株霍乱弧菌有很高的     

音乐治疗对眼底手术病人焦虑的影响

目的：在于观察经听觉通道输入音乐对眼底手术病人焦虑状态的影响。方法：实验对象为39名择期进行眼底手术的男性病人，他们被随机地分为实验和对照两组，其中实验组19人，对照组20人，在手术过程中通过耳机给患者输入他们自己选定的音乐、观察焦虑（STAI），抑郁（SDS），视觉模拟焦虑（VAS）和脑电（BI）的变化。结果：实验组STAI，SDS，VAS值与对照组比明显降低，病人的焦虑、抑郁情绪有了明显改善，而脑电的变化没有显著性的差异。结论：音乐治疗可降低择期眼底手术男性病人的焦虑、抑郁与视觉模拟焦虑水平。     

血清乙型肝炎病毒DNA水平对HBV全基因组克隆效率的影响

目的：通过比较血清HBV DNA水平对一片段PCR法和两片段PCR法这两种不同方法的HBV全基因组克隆效率的影响，选择出合适的HBV全基因组克隆技术，供后续的HBV的基础和临床研究。 方法：采集了慢性乙型肝炎（CHB）患者85份血清，分别用本研究建立的一片段PCR法及两片段PCR法扩增HBV全基因组，经双酶切鉴定后将PCR产物克隆入载体，进行HBV全基因组序列测定。同时用实时荧光定量PCR法检测上述85份血清的HBV DNA滴度。 结果： 本研究建立的一片段PCR法扩增成功需要的血清HBV DNA浓度高于两片段PCR法,两种方法扩增的效率比较为：一片段PCR法扩增的阳性率低于两片段PCR法（P<0.01）。一片段PCR法的保真性和灵敏度分析发现： 保真性：核苷酸的人为突变率为1.13 bp/kb；灵敏度：为102个初始模板。浓度大于103的重组质粒DNA80%可以成功扩增，浓度低于该值的扩增效率比较低。结论： 血清HBV DNA水平对两种扩增方法的阳性率有一定影响，滴度高低是选择合适PCR扩增方法的依据。HBV DNA滴度大于106copies/L的样本，可选用一片段PCR法的全基因组扩增、克隆技术，而对HBV DNA滴度小于106copies/L样本，则可选用两片段PCR法的全基因组扩增、克隆技术。本研究建立的一片段PCR法扩增HBV全基因组克隆的技术是一种值得推荐的好方法，但还需进一步优化。     

UU和HCMV感染及细胞因子与输卵管妊娠的关系研究

本文研究目的是应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,检测 2 1份输卵管妊娠患者宫颈分泌物及输卵管液中解脲支原体 (UU)及巨细胞病毒 (HCMV) ,用ELISA法检测输卵管液中IL - 6、IL - 8,研究UU、HCMV感染和细胞因子变化与输卵管妊娠的关系。结果显示 :输卵管妊娠组宫颈分泌物和输卵管液中UU、HCMV检出率显著高于正常妊娠组 ,两者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;输卵管妊娠组宫颈分泌物与输卵管液中UU、HCMV检出率比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;输卵管妊娠组输卵管液中IL- 6、IL - 8较正常妊娠组有极显著性差异 (P <0 .0 0 1)。结论 :输卵管妊娠与UU、HCMV感染和细胞因子变化有密切关系 ,与生殖道感染有密切关系。     

重型乙型肝炎患者TNF和IL—1的检测及意义

检测３０例重型乙型病毒性肝炎（重型肝炎）患者血清和外周血单个核细胞培养上清中肿瘤坏死因子水平及ＰＢＭＣ诱生的白细胞介素１活性，结果：重型肝炎患者ＴＮＦ和ＩＬ－１水平均增高，且二者呈正相关。提示ＴＮＦ和ＩＬ－１在重型肝炎的发病机制中起重要作用。     

急性髓系白血病中CD64表达的敏感性及特异性研究

研究急性髓系白血病(AML)免疫分型中CD64的敏感性和特异性.用系列抗原对132例AML患者的骨髓细胞进行直接标记,并用流式细胞术进行分析.结果表明:在AML中,CD64对急性粒-单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)中敏感性最高(分别为96.4%和100%),在其他AML(M0、M1、M2、M3,M6、M7)中表达均较低.CD64对M4和M5中的特异性为56.5%.因此,CD64有助于AML中M4、M5的鉴别诊断.