制药工程专业的创办、改革与建设

华南理工大学生物工程系现设有生物工程专业和制药工程专业,是在原有发酵工程专业、微生物工程专业的基础上发展起来的新兴学科.1952年华南理工大学食品工程系就已设立发酵工程专门化;1958年设立微生物工学专业;1981年发酵工程专业获硕士学位授予权,1987年获博士学位授予权,是国内同类专业中历史悠久的学科专业.目前,生物工程系已拥有发酵工程、生物化工两个硕士点和发酵工程、生物化工两个博士点,有教授9名(其中博士生导师5名),副教授12名,具有博士学位的年轻教师15名.     

金丝桃素及其提取物对肺癌细胞SpcA1的体外杀伤效应

目的研究贯叶金丝桃中金丝桃素及其提取物对人肺癌细胞株SpcA1的体外杀伤效应。方法以发光二极管为光源，通过测定胞内荧光强度来确定细胞对金丝桃素的吸收，用显微镜观察、四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和凋亡DNA电泳分析法研究金丝桃素及其提取物对细胞的杀伤作用。结果光活化的金丝桃素对SpcA1细胞有显著的体外杀伤效应，其抑制细胞生长的能力与金丝桃素的浓度及光照能量密切相关。结论金丝桃素及其提取物能明显抑制肺癌细胞的生长，提示金丝桃素在肿瘤治疗中应用前景良好。     

HPLC测定贯叶连翘及提取物中伪金丝桃素和金丝桃苷的含量

目的:建立贯叶连翘药材及提取物中伪金丝桃素和金丝桃苷的含量测定方法。方法:样品经甲醇超声波提取,采用Krom asil C18柱(4.6mm×200mm,5μm)测定;测伪金丝桃素用流动相:甲醇-0.006mol/L磷酸氢二钠(87.5:12.5,v/v,用磷酸调pH至6.5);测金丝桃苷用流动相:甲醇-0.5%磷酸(45:55,v/v,用三乙胺调pH至3.0);流速均为1.0mL/m in;检测波长分别为590nm和360nm。结果:伪金丝桃素在0.023 8~0.476 0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为101.1%,RSD=1.7%。金丝桃苷在0.197 2~1.97 2μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.8%,RSD=1.5%。结论:本方法快捷、简便,结果准确、可靠,可作为贯叶连翘药材及提取物中有效成分伪金丝桃素和金丝桃苷的质量控制方法。     

多肽及蛋白类药物微囊制剂研究的特点

学术背景：多肽及蛋白类药物稳定性差、易被酶降解，口服给药的生物利用低，如将其包埋成微囊制剂，不仅能有效防止药物在体内很快被降解，还能够提高药物的稳定性，实现缓释或控释。目的；介绍几种常用的多肽及蛋白类药物微囊制备方法，并比较各种方法的优缺点，以及常用的药用辅料。检索策略；由第一、二作者应用计算机检索Proquest和Elsevier数据库1993—01／2008—01文献，检索词为“microcapsule”，限定语言种类为“English”：同时检索维普中文期刊数据库、万方数据库1996-01／2008-01文献，检索词为“微囊”，限定语言种类为中文。纳入与多肽及蛋白类药物微囊制备方法、工艺优化及壁材选择有关文献，排除较陈旧的文献及重复研究。文献评价；共收集到140篇相关文献，30篇符合标准，其中22篇介绍多肽及蛋白类药物微囊制备方法，8篇关于常用的药用辅料。资料综合；①多肽及蛋白类药物微囊化的常用制备方法主要有复相乳液法、超临界流体法、喷雾干燥法，具体制备过程中应根据药物的理化性质选择合适的方法。②用于制备多肽或蛋白类药物的壁材主要有可生物降解聚合物和生物黏附材料。结论；多肽及蛋白类药物微囊制备应根据其不同的理化性质选择合适的制备方法和壁材，以获得最理想的实验结果。同时，多肽及蛋白质类药物的稳定性将是制备过程中需要重点考察的内容。     

重组乙肝表面抗原真核表达质粒的构建及表达

采用限制性内切酶从重组的真核表达质粒pcDNA-S2S中分离出经过测序鉴定的乙肝表面抗原中蛋白（preS2 S)基因片段,将其亚克隆于pVAX1真核表达载体,构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒pVAX-S2S,酶切鉴定后将重组质粒体外转染COS7细胞,ELISA法检测上清液中的HBsAg呈阳性,说明重组质粒pVAX-S2S在体外能够有效表达HBsAg,为进一步的体内免疫反应打下基础。     

不同产地贯叶连翘中金丝桃素和伪金丝桃素的含量分析

目的比较不同产地贯叶连翘中金丝桃素和伪金丝桃素的含量。方法样品经甲醇超声波提取,采用KromasilC18柱(200mm×4.6mm,5μm)分离测定,以甲醇-0.006mol/L磷酸氢二钠(87.5∶12.5,V/V,用磷酸调节pH值至6.5)为流动相,检测波长为590nm,流速为1.0mL/min。结果不同产地贯叶连翘中金丝桃素和伪金丝桃素的含量存在一定差异。结论该方法为制订贯叶连翘药材质量控制标准提供了重要依据。     

人肝再生增强因子在体外可与Na+-K+-ATPase 特异性结合

目的： 用体外下拉实验证明人肝再生增强因子（hALR）与其相互作用蛋白Na+-K+-ATPase的体外结合作用。方法：将Na+-K+-ATPase β亚基部分基因片段定向克隆到pGEX-4T-1 中, 转化大肠杆菌DH5α，IPTG 诱导, 获得Na+-K+-ATPase β亚基部分蛋白与谷胱甘肽（GST）的融合表达，经GST偶联的琼脂糖珠纯化, 以GST下拉实验检测其与hALR蛋白的体外直接相互作用。结果：还原型SDS-PAGE 显示GST- Na+-K+-ATPase 融合蛋白泳道有hALR蛋白单体和二聚体条带，Western blotting 结果进一步证实为hALR蛋白。结论：Na+-K+-ATPase可在体外与hALR蛋白特异地结合。     

多肽及蛋白类药物微囊制剂研究的特点*★

学术背景：多肽及蛋白类药物稳定性差、易被酶降解，口服给药的生物利用低，如将其包埋成微囊制剂，不仅能有效防止药物在体内很快被降解，还能够提高药物的稳定性，实现缓释或控释。 目的：介绍几种常用的多肽及蛋白类药物微囊制备方法，并比较各种方法的优缺点，以及常用的药用辅料。 检索策略：由第一、二作者应用计算机检索Proquest 和 Elsevier 数据库1993-01/2008-01文献，检索词为“microcapsule”，限定语言种类为“English”；同时检索维普中文期刊数据库、万方数据库1996-01/2008-01文献，检索词为“微囊”，限定语言种类为中文。纳入与多肽及蛋白类药物微囊制备方法、工艺优化及壁材选择有关文献，排除较陈旧的文献及重复研究。 文献评价：共收集到140篇相关文献，30篇符合标准，其中22篇介绍多肽及蛋白类药物微囊制备方法，8篇关于常用的药用辅料。 资料综合：①多肽及蛋白类药物微囊化的常用制备方法主要有复相乳液法、超临界流体法、喷雾干燥法，具体制备过程中应根据药物的理化性质选择合适的方法。②用于制备多肽或蛋白类药物的壁材主要有可生物降解聚合物和生物黏附材料。 结论：多肽及蛋白类药物微囊制备应根据其不同的理化性质选择合适的制备方法和壁材，以获得最理想的实验结果。同时，多肽及蛋白质类药物的稳定性将是制备过程中需要重点考察的内容。     

用微型包囊法研究新型高效微生态活菌制剂

采用流化床技术与喷嘴结合的微型包裹法，将３种双歧杆菌、高效活菌保护剂和双歧促生因子一起作为核心物质，包封于无毒囊材中成酸肠溶微囊。微囊在人工模拟胃液中处理４ｈ，其中的双歧杆菌活菌数仍保持在４４％以上；在人工肠液中处理１２ｍｉｎ，微囊全部崩解释放出活性菌，在３７℃保存３个月，其中的活菌数在于１０＾９个／ｇ。有效地解决了胃酸，消化酶和抗生素等对活性双歧杆菌的灭 和产品常温保存期短的问题。     

RNA干扰血管紧张素原基因表达对前脂肪细胞3T3-L1分化的影响

目的:构建靶向血管紧张素原(AGT)基因的RNA干扰质粒,研究AGT基因对鼠前脂肪3T3-L1分化的影响。方法:设计靶向AGT的小分子RNA干扰片段(AGT-shRNA),以未靶向任何DNA的小分子RNA(Non-shRNA)为对照,利用载体psiRNA-U6.1/Neo构建重组表达质粒,转染鼠前脂肪细胞3T3-L1并筛选到稳定转染细胞株,RT-PCR和SDS-PAGE法分别检测AGT基因沉默效果,通过显微镜观察和脂肪细胞分化标志物检测来确定AGT基因干扰对3T3-L1细胞分化的影响。结果:成功构建AGT干扰质粒,与对照组比较,AGT基因转录水平受到显著抑制(P<0.05),AGT蛋白表达水平也仅为对照的43.86%。AGT基因干扰后3T3-L1细胞脂质水平和甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH)活性仍随分化时间延长呈上升趋势,但增长量明显低于对照组(P<0.05)。结论:RNA干扰AGT基因可明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,提示脂肪组织中的肾素-血管紧张素系统(RAS)与脂肪代谢有重要关联。