6-羟基多巴胺诱发大鼠黑质细胞凋亡的实验研究

目的：为了解证实细胞凋亡参与了帕金森病（Parkinson disease,PD)的发病和黑质细胞凋亡的调控因素。方法：通过脑立体定位注射6－羟基多巴胺（6－OHDA）建立大鼠PD模型。采用TUNEL法、原位杂交技术、电镜观察等，选择6－DHDA注射术后1、3、5、7、14及21d为研究时点，观察大鼠PD模型形成过程中黑质细胞凋亡的数量及超微结构变化情况，并检测黑质细胞Bcl-2 mRNA、P53 mRNA表达情况及铁的浓度。结果：用TUNEL法发现黑质细胞存在细胞凋亡，与对照组比较差异有显著性（P＜0．05），7d 细胞凋亡数为最高，21d最低；电镜观察在此过程中黑质细胞存在典型的细胞凋良，并逐渐加重;Bcl-2和铁随时间增加而升高，P53则在1d为最高，其后很快下降，但都高于对照组（P＜0．05）。结论：6－OHDA能诱发大鼠黑质细胞凋亡，细胞凋亡参与了PD发病，并受到Bcl-2、P53和铁的影响。     

罗格列酮对肝星状细胞的生物学特性及PDGF表达的影响

目的 观察罗格列酮对体外培养的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖、凋亡、细胞周期、超微结构及表达α-SMA、PDGF-B的影响.方法 MTT法检测罗格列酮对HSC增殖的影响;流式细胞仪(FCM)检测罗格列酮对HSC细胞周期和凋亡率的影响;免疫组化SABC法检测罗格列酮对HSC表达α-SMA、PDGF-B的影响;电镜观察罗格列酮对HSC超微结构的影响.结果 MTT法检测显示罗格列酮对HSC的增殖具有抑制作用,抑制率随着罗格列酮浓度的增加而增加;FCM检测:罗格列酮作用后,HSC的凋亡率、G0/G1期细胞比例均随着浓度的增加而增加,各浓度组凋亡率的增加均具有显著性意义(P<0.01);免疫组化染色显示HSC中α-SMA、PDGF-B的表达水平随着罗格列酮浓度的增加而减少,且两者的表达具有紧密相关性(r=0.971);电镜观察显示HSC的生长状态受到抑制,部分细胞呈现凋亡相关的超微结构改变.结论 罗格列酮能抑制HSC的增殖、活化,其作用机制可能与阻滞HSC于G0/G1期、诱导HSC凋亡及降低HSC的PDGF表达有关.     

银屑病细胞凋亡与超微结构的变化

目的 探讨银屑病细胞凋亡的机制。方法 用原位末端标记(TUNEL)技术检测银屑病皮损及经银屑病患者白细胞刺激的培养角质形成细胞的凋亡情况。透射电镜观察其超微结构的变化。结果 银屑病组凋亡表达为89.31±27.23,对照组为18.72±8.74(P<0.01)。经银屑病患者白细胞刺激的角质形成细胞凋亡表达为0.9585±0.3421,较各对照组明显增高(P值均<0.01)。超微结构显示其细胞增生活跃,细胞间粘连疏松。角质形成细胞内见凋亡改变。结论 推测凋亡增多伴随细胞过度增殖是机体维持细胞动力学稳定的一种保护性机制。凋亡增多可能与银屑病患者外周血白细胞参与的诱导有关。     

H-ras基因P53蛋白和表皮生长因子受体在喉癌中的表达(摘要)

取解放军457医院35例喉鳞癌常规石蜡包理标本，男29例，女6例，年龄44～71岁。另取8例喉正常上皮。免疫组化染色：采用LSAB法，P53单克隆抗体（Oncogenescienceco）和表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）单克隆抗体（Sontacruzco），按LSAB试剂盒（Zymedco）操作说明进行石蜡切片的免疫组化染色。原位杂交：采用地高辛标记与检测试剂盒（BMco），和H－ras癌基因探针（cDNA，1．skb，北京中山生物技术公司）。按试剂盒操作说明进行探针标记和标本石蜡切片原位DNA－RNA分子杂交。采用IBAS200D型自动图像分…     

体外感染细胞表达HCV-NS5和复制HCV RNA的实验研究

为了研究 HCV- NS5 和 HCV RNA在体外感染细胞培养系统中的表达和复制情况 ,选用 HCV RNA水平为2× 10 4拷贝 / m l的阳性血清感染人肝癌细胞株 (Hep G2细胞株 )。应用胶体金标免疫电镜法和原位杂交法检测 HCV在被感染细胞中 NS5 蛋白表达和 RNA复制的情况。结果在细胞浆内有电子密度大的金标颗粒的吸附 ,在感染后的第 1至第 9代细胞中均有发现。感染后的细胞超微结构完整 ,未发现 HCV颗粒。在感染后的第 1至第 7代细胞内出现特异性杂交信号 ,HCV RNA阳性物呈蓝紫色细小颗粒分布在细胞浆和细胞核内。因此 ,HCV能够在 Hep G2细胞中表达 NS5抗原和复制 RNA,而细胞超微结构完整。     

6-羟基多巴胺诱发大鼠黑质细胞凋亡的实验研究

帕金森病 (Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ ,ＰＤ)是一种常见的中老年神经系统变性疾病 ,新近体外实验研究认为ＰＤ可能通过细胞凋亡这一条共同径路而致。本试验采用 6 羟基多巴胺 (6 ＯＨＤＡ)制作大鼠ＰＤ模型 ,在ＰＤ形成过程中 ,采用免疫组织化学、原位杂交、电镜的方法证实细胞凋亡参与了ＰＤ发病 ,并观察细胞凋亡的调控因素。材料和方法 :Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 72只 ,体重 180～ 2 0 0ｇ。随机分为二组 :对照组 (ｎ =36 )和ＰＤ模型制作组 (ＰＤ组 ,ｎ=36 )。ＰＤ组采用改良的Ｔｈｏｍａｓ方法行脑立体定位注射 6 ＯＨＤＡ注射…     

肿瘤患者的人文关怀

肿瘤不仅给患者造成生理上的巨大伤害，同时也给患者带来心理上、精神上的严重创伤。据调查，约有56．57％的肿瘤病人存在不同程度的心理障碍。肿瘤病人心理承受能力及应激能力较差，存在较严重的心理健康问题，给予有效的关怀照顾，能增强肿瘤病人应对不良情绪的能力，促进病人的康复。     

早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中癌基因表达的研究

目的:研究癌基因c-myc和N-ras在早孕绒毛及GTD中的表达。方法:地高辛标记的c-myc、N-ras裸核探针与石腊包埋的18例早孕绒毛及54例GTD组织进行原位杂交。结果:c-myc mRNA在早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌中阳性表达率分别为27.8%、44.4%、55.5%和84.4%。N-ras mRNA在早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌组织中阳性表达率分别为83.8%、88.9%、77.8%和44.4%。Ⅲ-Ⅳ期GTT中c-myc阳性表达率高于Ⅰ期。c-myc和N-ras在GTT组织中共同表达率为47.2%。结论:c-myc与GTD病变的发展及临床分期有关,N-ras为GTT发生的早期事件。     

糖尿病视网膜病变黄斑区硬性渗出对视功能的影响

目的：观察非增殖期糖尿病视网膜病变黄斑区硬性渗出对视功能的影响。方法回顾性分析自2010年3月-2011年5月确诊为非增殖期糖尿病视网膜病变者共37例71眼,根据黄斑区6mm硬性渗出累及象限范围分为5组、按渗出的程度分为4级,并分析其与视力、视野的关系。结果黄斑区硬性渗出范围：A组(0象限)、B组(1个象限)、C组(2象限)、D组(3个象限)、E组(4个象限)视力分别是0.83±0.22、0.31±0.24、0.20±0.24、0.17±0.12、0.12±0.13,方差分析差异有统计学意义（F=17.62,P=0.00）;视野平均缺损分别为-1.73±1.71、-7.39±4.21、-8.82±6.10、-10.03±3.47、-10.99±2.52,方差分析差异有统计学意义（F=5.79,P=0.00）。黄斑区硬性渗出程度1级、2级、3级、4级组视力分别为0.80±0.23、0.33±0.25、0.15±0.14、0.06±0.03,方差分析差异有统计学意义（F=32.19,P=0.00）;视野平均缺损分别为-2.14±2.01、-7.82±3.68、-9.90±2.57、-10.49±8.08,方差分析差异有统计学意义（F=7.57,P=0.00）。结论黄斑区硬性渗出的程度和范围明显影响视力和视野。     

骨桥蛋白和CD44V6在肝细胞癌中的表达及与癌转移的关系

肝细胞癌(HCC)转移是导致治疗失败的主要原因,即使是根治性切除,5年内仍有60%～70%的患者出现转移复发,局部治疗的转移复发率则更高。近几年的研究表明,骨桥蛋白(osteopDmjn,OPN)是一种可由多种人类癌组织表达和分泌的甘油一磷蛋白,参与细胞与基底膜的粘附,形成酸性微环境,促进局部基底膜以及细胞外基质的破坏。有研究