沉默circ_0000745通过靶向 miR-296-5p对结直肠癌细胞增殖及转移的影响

摘要:目的 探讨circ_0000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法 收集2013年3月 ~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量 PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组 织、癌旁组织中circ_0000745与 miR-296-5p表达,分析circ_0000745与 miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系。 将人结直肠癌细胞 HCT-116分为si-NC组、si-circ_0000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-circ_0000745+anti-miR-NC组、si-circ_0000745+anti-miR-296-5p组;采用 CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细 胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ_0000745与 miR-296-5p的靶向关系;采用 Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果 与癌旁组织比较,结直肠癌组 织中circ_0000745的表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56 例,与存活患者相比,死亡患者的circ_0000745明显增高(P<0.05),miR-296-5p明显降低(P<0.05)。与 HT-29细胞 相比,HCT-116细胞的circ_0000745mRNA 表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05),选择 HCT-116细 胞进行下一步研究。与si-NC组比较,si-circ_0000745组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵 袭细胞数减少(均P<0.05);circ_0000745可靶向调控 miR-296-5p的表达;与 miR-NC组比较,miR-296-5p过表达组细 胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均 P<0.05);与si-circ_0000745+anti-miRNC组比较,si-circ_0000745+anti-miR-296-5p组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭 细胞数增多(均P<0.05)。结论 结直肠癌组织中circ_0000745呈高表达,miR-296-5p呈低表达,高表达circ_0000745 及低表达 miR-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ_0000745通过靶向 miR-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转 移,沉默circ_0000745可为结直肠癌治疗提供新思路。     

老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤 标志物、炎症因子与预后的相关性分析

目的 探讨老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤标志物、炎症因子变化及其与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ）、序贯器官衰竭评估（sequential organ faiure assessment,SOFA）评分的相关性。方法 选取浙江省立同德医院2018年2月至2021年2月收治的66例老年脓毒症患者纳入研究,将合并心肌损伤者纳入观察组（n=33）,无心肌损伤者纳入对照组（n=33）。比较两组患者的心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes,CK-MB）、肌红蛋白（myoglobin,Mb）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、APACHEⅡ评分、SOFA评分情况,采用Pearson相关分析法分析血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分的相关性。结果 观察组患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显高于对照组（P<0.05）。Pearson相关分析结果显示,血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分均呈正相关（P<0.05）。结论 老年脓毒症合并心肌损伤患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平升高,可直接反映患者的病情和预后。     

大鼠心肌梗死后心肌炎症与骨髓干细胞归巢于缺血心肌的关系

目的:分析大鼠急性心肌梗死后心肌组织炎症与骨髓干细胞归巢于缺血心肌的关系。方法:实验于2005-05在西安交通大学动物实验中心完成。①选取清洁级健康雄性SD大鼠128只,取8只大鼠作为正常对照组,剩余120只大鼠随机数字表法分为单纯粒单细胞集落刺激因子组、地塞米松干预组、假手术组,40只/组。②单纯粒单细胞集落刺激因子组、地塞米松干预组建立急性心肌梗死模型,假手术组在左前降支挂线不结扎,正常对照组不进行任何手术。③单纯粒单细胞集落刺激因子组、地塞米松干预组、假手术组大鼠于造模前连续5d皮下注射粒单细胞集落刺激因子50μg/(kg·d)。地塞米松干预组于造模后1h一次性给予地塞米松500μg/kg肌注。④各组大鼠于造模后1,3,5,10d免疫组化观察心肌组织中ckit阳性细胞数及肿瘤坏死因子的表达。造模后28d进行梗死灶组织形态学观察。结果:128只SD大鼠全部进入结果分析。①术后28d各组心肌梗死灶组织形态学观察结果:单纯粒单细胞集落刺激因子组心内膜下有完整的心肌结构,心肌细胞排列整齐,中层由从梗死区边缘伸向斑痕区的心肌组织和结缔组织组成;地塞米松干预组心内膜下仅有散在的心肌细胞,心内膜与心外膜之间的结缔组织稀薄,中层未见有心肌组织;假手术组心脏结构完整未见瘢痕组织。②术后不同时间点各组ckit多克隆抗体特异性免疫组化染色结果:术后1,3,5d各时相点,以单纯粒单细胞集落刺激因子组ckit 细胞密度最大,地塞米松干预组ckit 细胞明显受到抑制(P<0.01);术后10d两组梗死区周边均未发现ckit 细胞。假手术组术后各时间点均未见ckit 细胞。③术后不同时间点各组肿瘤坏死因子的表达情况:地塞米松干预组术后1,3,5,10d各时间点肿瘤坏死因子表达均显著低于单纯粒单细胞集落刺激因子组(P<0.01),而假手术组未发现有肿瘤坏死因子表达。结论:心肌损伤后的炎症反应是骨髓干细胞归巢的先决条件,炎症抑制后限制了骨髓干细胞归巢。提示骨髓干细胞归巢于缺血心肌是机体潜在的修复机能。     

移动查房系统对临床药学工作的影响

目的 探讨移动查房系统对临床药学工作的影响.方法 比较新疆维吾尔自治区克拉玛依市中心医院使用移动查房系统前（1409例,2011年4月至2012年9月）及使用移动查房系统后（2 595例,2012年10月至2014年3月）临床药学工作数量、内容的变化,分析移动查房系统的技术优势及对临床药学工作的影响.结果 使用移动查房系统前不良反应、药物咨询、患者用药教育、医嘱审核与不合理医嘱干预数量分别为58、336、165、828、22例,使用移动查房系统后不良反应、药物咨询、患者用药教育、医嘱审核与不合理医嘱干预数量分别为85、377、260、1735、138例,不良反应上报数量增加了46.6％,患者用药教育增加了57.6％,医嘱审核工作量增长了109％,临床药师对不合理医嘱的干预数量增长了527％.临床药师在使用移动查房系统前干预不合理医嘱22例,主要为用法用量错误（11例,50.0％）、重复用药（3例,13.6％）、特殊人群用药禁忌（3例,13.6％）、相互作用（3例,13.6％）等方面;使用移动查房系统后干预不合理医嘱共计138例,主要为用法用量错误（66例,47.8％）、静脉营养液浓度过高（25例,18.1％）、重复用药（10例,7.2％）、特殊人群用药禁忌（12例,8.7％）、相互作用（8例,5.8％）方面.结论 移动查房系统使得临床药师的工作流程优化,工作效率提高,工作内容发生了根本改变,更多地参与科室内的会诊、临床药物治疗方案的设计.     

血浆置换对重型乙型病毒性肝炎HBV DNA含量的影响及与预后的关系

探讨经血浆置换（PE）治疗重型乙型病毒性肝炎后,患者血清中HBV DNA含量的变化对预后的影响。随机选取60例乙型肝炎病毒标志物阳性患者,20例为对照组,40例在内科治疗的基础上加PE治疗。观察治疗前后血清HBV DNA含量变化。40例经PE治疗的患者血清HBV DNA含量下降,PE治疗有效组比PE治疗无效组和对照组降低更明显,且肝功能指标改善也更明显。PE治疗可以有效的去除重型肝炎患者血清HBV DNA,改善肝功能及预后,提高患者的存活率。     

2010—2012年广州市黄埔区职业病发病情况

目的分析广州市黄埔区职业病发病特点,为科学防治提供依据。方法回顾性分析2010—2012年广州市黄埔区新发职业病流行病学特征。结果①2010—2012年广州市黄埔区新发职业病37例,其中男性36例（97.3%）。②以青壮年为主,〈45岁病人占75.7%。③诊断病种包括尘肺、噪声聋和苯中毒;其中尘肺占78.4%（29例）,噪声聋占13.5%（5例）;苯中毒占8.1%（3例）。④平均发病工龄为（17.2±5.6）a,其中噪声聋为（17.2±5.6）a,苯中毒为（3.3±1.1）a,尘肺为（9.8±4.2）a;工龄〈10 a的占54.1%。⑤行业分布以船舶修造、石油加工和交通运输设备制造为主,占全部病例的94.6%（35/37）。⑥企业性质与规模：私营（27例,73.0%）,中小型企业（28人,75.7%）发病为多。⑦多数企业3年新发尘肺病超过2人,个别企业一年内新发4例尘肺。结论黄埔区职业病防治形势严峻,预防尘肺病、噪声聋和苯中毒是工作重点,应建立合理有效的管理机制,做好综合防治。     

金粉蕨素体外诱导人宫颈癌HeLa 细胞凋亡的机制

目的：探讨金粉蕨素（ONY）体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞,采用MTT法检测ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长抑制率的影响;Hoechst33258染色检测ONY对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术（FCM）检测ONY对HeLa细胞凋亡率的影响;DNA琼脂糖电泳检测HeLa细胞凋亡的DNA条带;Western blot分析凋亡相关蛋白表达变化。结果 ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,以HeLa细胞对ONY最为敏感,作用24 h的IC50值为10.48μg·mL-1。经ONY作用于HeLa细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态学改变,表现出典型的凋亡特征的亚二倍体峰,且呈剂量依赖性,同时出现典型的凋亡DNA条带;同时,cytochrome c、caspase-9和caspase-3蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达下调,而bax蛋白表达不变, Bcl-2/Bax比值下调（P〈0.05）。结论 ONY可能通过调控线粒体途径相关蛋白抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导其凋亡。     

臂丛分支的CT定位研究及在Bristow-Latarjet术式的临床意义

目的　研究臂丛分支在肩胛下肌前方的CT定位,提高Bristow-Latarjet术式临床操作时安全范围的认知。 方法　福尔马林固定的上肢标本16侧（男10,女6）。解剖和使用显影线标记16侧肩的臂丛分支（肌皮神经、腋神经、桡神经）在肩胛下肌前方的位置、行程,CT水平位上测量肩关节内旋45°、中立位、外旋45° 3个体位2~5点位置肌皮神经到关节盂的距离及成角规律,所得数据经统计学处理。 结果　⑴臂丛在肩胛下肌前方,由内往外神经的排列分别是腋神经、桡神经、肌皮神经。⑵CT水平位上测量肌皮神经在3个体位的数据,组间比较：角度上比较,2~5点位置的内旋位与中立位、与外旋位比较具有统计学意义（均P<0.05）;距离上比较：2点位置的外旋位与中立位、与内旋位比较具有统计学意义（均P<0.05）,中立位与内旋位比较无统计学差异（P=0.15）;3~5点位置的内旋位与中立位、与外旋位比较具有统计学意义（均P<0.05）。5点位置的外旋位与中立位比较无统计学差异（P=0.07）。组内比较：内旋位2点位置的角度分别与3~5点位置比较,均有统计学差异（均P<0.05）,3~5点位置的两两比较,均无统计学差异（均为P>0.05）。 Pearson分析：盂的高度HL与内旋位2点位置的角度呈负相关,与3点位置的角度呈正相关,与内旋位2点位置的距离呈负相关,与3~5点位置的距离呈正相关。 结论　肩关节内旋45°时肌皮神经的安全范围显著大于中立位及外旋45°,建议内旋位操作。     

结核分枝杆菌ClpP1重组蛋白的特性探讨及初步应用

目的用纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)ClpP1重组蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价,间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性,以初步评价其应用价值。方法通过SDS-PAGE确定ClpP1重组蛋白的主要表达形式,利用纯化包涵体方式对重组蛋白进行纯化;将纯化蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价;再分别以纯化蛋白为抗原,制备抗体为一抗,间接ELISA法检测临床诊断结核病患者血清中抗M.tb抗体和M.tb抗原。结果 SDSPAGE显示ClpP1重组蛋白主要以包涵体表达形式存在,将纯化蛋白免疫新西兰白兔4次,取血测抗体效价为1∶64 000;Western blot结果显示制备抗体可较好的与ClpP1蛋白特异性结合;间接ELISA法结果表明,以重组蛋白为抗原测患者血清中抗M.tb抗体和以制备抗体为一抗测血清中的M.tb抗原的2实验组分别与对照组相比均具有显著性差异。结论制备了具有免疫原性的M.tb ClpP1重组蛋白及效价较高的多克隆抗体,并得出ClpP1多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为进一步研究ClpP1重组蛋白的特性及其应用奠定了基础。     

无缝隙筛查模式在新型冠状病毒肺炎防控期间门诊就诊患者中的应用与体会

自2019年12月起新型冠状病毒肺炎的疫情在我国湖北省武汉市爆发以来,全国人民都加入了抗击和防控疫情的队伍中来。疫情能如何有效的快递防控显得尤为重要,本文介绍了三甲综合性医院的门诊对SARS-CoV-2筛查工作的应急管理的工作,对医务工作人员的培训,门诊预检流程的安排和环境的重新规划,确保安全,快速,有效地进行,保证患者及家属能在疫情期间及时得到就诊,也确保了门诊医务工作人员能安心工作。