氯丙嗪对耐药细胞系K562／AO2多药耐药逆转作用的研究

目的：研究氯丙嗪对耐药细胞系K562/AO2多药耐药逆转作用。方法：应用免疫组化观察K562／AO2细胞系的耐药蛋白表达情况，用MTT法测定不同浓度的氯丙嗪对K562/AO2细胞系耐药逆转作用，用流式细胞术测定不同浓度的氯丙嗪与K562／AO2细胞作用后细胞内罗丹明的蓄积情况，用半定量RT—PCR法测定氯丙嗪对K562／AO2细胞多药耐药基因(mdr-1)mRNA表达的影响。结果：K562／AO2细胞不但P-gP表达阳性，而且肺耐药相关蛋白(lung resistanceelated protein．LRP)表达也阳性；氯丙嗪能增强多柔比星对K562／AO2细胞的杀伤作用(单用ADM组、氯丙嗪0．75μg／mL+ADM组、氯丙嗪1．5μg／mL+ADM组和氯丙嗪3μg／mL+ADM组对K562／AO2的抑制率分别为5．2％、25．9％、39．1％和74．8％)；增加K562／AO2细胞内罗丹明的蓄积(对照组、氯丙嗪0．75μg／mL组、氯丙嗪1．5μg/mL组和氯丙嗪3μg／mL组细胞内的荧光强度的均值分别为1．87、10．28、48．75和65．63)；对K562／AO2细胞mdr-1 mRNA表达无明显影响(对照组mdr-1和β-actin的面积比为0．41，氯丙嗪组为0．42)。结论：氯丙嗪对K562／AO2细胞的耐药有较强的逆转作用，并呈剂量依赖关系。     

正常足月儿脐血血浆中GM—CSF和IL—3含量测定

目的 探讨脐血血浆中造血生长刺激因子的含量,以便了解胎儿造血的特点,并且可为临床应用脐血提供可靠的实验依据。方法 应用ＥＬＩＳＡ法对６４例正常足月儿脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３进行了测定。结果 脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３的含量分别是：１１８．７１±７４．５６ｐｇ／ｍｌ和７４．８９±４６．３２ｐｇ／ｍｌ,与正常组比较Ｐ〈０．０１。结论 脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３的含量明显高于正常成人     

SLE患者外周血中CD23+、CD19+细胞表达状况的研究

目的研究外周血中CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的异常表达在SLE发病及病情进展中的意义。方法应用流式细胞术检测活动期与稳定期SLE患者外周血中CD19 、CD23 及CD23 /CD19 细胞的表达率;同时应用流式直方图分析细胞表面CD19,CD23分子的表达密度。结果活动期SLE患者组CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞表达率均高于稳定期SLE患者组及正常对照组,差异均有显著性意义;稳定期SLE患者组CD23 及CD23 /CD19 与正常对照组比较无显著性差异;稳定期SLE患者组CD19 细胞表达率高于正常对照组,但差异无显著性意义。且CD19 、CD23 及CD23 /CD19 细胞的表达率与病情积分及ANA均成正相关。活动期SLE患者组CD23的平均荧光强度与对照组及稳定期SLE组比较均有显著性差异;活动期SLE患者组CD19的平均荧光强度与对照组、稳定期SLE组比较及稳定期SLE患者组CD19、CD23的平均荧光强度与对照组比较均无显著性差异。结论外周血中CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的异常表达在SLE发病机理及病情进展中起重要作用,检测CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的表达情况对SLE病情监控具有一定的应用价值。     

人MEF2C基因shRNA慢病毒载体构建及其对Daoy细胞MEF2C mRNA表达的影响

目的构建人肌细胞增强因子2C(MEF2C)基因短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,观察其对髓母细胞瘤Daoy细胞MEF2C mRNA表达的影响。方法设计MEF2C基因特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pGLV3/H1/GFP/Puro载体,筛选有效shRNA慢病毒载体,继而在293T细胞中包装成病毒颗粒,将其感染髓母细胞瘤Daoy细胞,Real-time PCR检测MEF2C mRNA。结果构建的MEF2C基因shRNA慢病毒载体测序正确,包装获得的shR-NA慢病毒颗粒感染Daoy细胞后其MEF2C mRNA表达量较阴性对照组下降了81.1%。结论成功构建了MEF2C基因shRNA慢病毒表达载体并包装成慢病毒颗粒,其能够有效抑制MEF2C mRNA的表达。