CRKL活性与白血病细胞多药耐药的关系

 目的　探讨CRKL活性在白血病细胞多药耐药中的作用,发现与耐药相关的新因素。方法　应用流式细胞术比较CRKL在K562、HL-60及其耐药细胞中的活性变化;对敏感细胞用柔红霉素处理后,检测CRKL活性与化疗作用时间的关系以及撤药后CRKL活性的改变。结果　与K562、HL-60敏感细胞比较,在K562、HL-60耐药细胞株中,CRKL的磷酸化水平明显升高;在用柔红霉素处理72 h后,K562和HL-60细胞CRKL的磷酸化水平与化疗药物作用呈时间依赖性,未发现Jurkat细胞CRKL磷酸化水平的改变。结论　CRKL活性变化与白血病细胞多药耐药的形成有关,是白血病细胞多药耐药的又一个新的影响因素。     

外周血CK-20mRNA的表达与大肠癌诊断、分期及预后的研究

引言我们利用RT-PCR技术检测了126例大肠癌患者外周血单个核细胞CK-20mRNA的表达情况,研究CK-20mRNA的表达在大肠癌中的临床意义。1资料与方法1.1研究对象1.1.1大肠癌组经手术后病理证实的大肠癌患者126例,男75例,女51例,年龄38~73岁,平均57.4岁;按Duke’s分期:A期23例、B期34例、C期44例、D期25例。术前采集外周血。1.1.2正常对照组健康志愿者25例,男17例,女8例,年龄29~58岁,平均46.5岁。1.1.3细胞株组①HT29细胞株(结肠癌细胞株);②H740细胞株(肝癌细胞株);③2HTB-133(乳腺癌细胞株);④TPG5(肺癌细胞株);⑤K562细胞株(红白细胞病细胞株);⑥SGC7901(胃癌细胞株),常规细胞培养。1.1.4其他癌症组胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、食管癌各10例。1.2方法1.2.1样品的采集和保存(1)血标本的采集采取大肠癌患者及正常献血员外周静脉血10ml,放入20u/ml肝素处理的防凝试管内,分离出单个核细胞,放入-80℃冰箱保存备测。(2)实体瘤标本的来源大肠癌组织及其他癌症取自大肠癌和其他癌症病人手术后癌组织。标本30m...     

正常足月儿脐血血浆中GM—CSF和IL—3含量测定

目的 探讨脐血血浆中造血生长刺激因子的含量,以便了解胎儿造血的特点,并且可为临床应用脐血提供可靠的实验依据。方法 应用ＥＬＩＳＡ法对６４例正常足月儿脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３进行了测定。结果 脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３的含量分别是：１１８．７１±７４．５６ｐｇ／ｍｌ和７４．８９±４６．３２ｐｇ／ｍｌ,与正常组比较Ｐ〈０．０１。结论 脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３的含量明显高于正常成人     

人MEF2C基因shRNA慢病毒载体构建及其对Daoy细胞MEF2C mRNA表达的影响

目的构建人肌细胞增强因子2C(MEF2C)基因短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,观察其对髓母细胞瘤Daoy细胞MEF2C mRNA表达的影响。方法设计MEF2C基因特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pGLV3/H1/GFP/Puro载体,筛选有效shRNA慢病毒载体,继而在293T细胞中包装成病毒颗粒,将其感染髓母细胞瘤Daoy细胞,Real-time PCR检测MEF2C mRNA。结果构建的MEF2C基因shRNA慢病毒载体测序正确,包装获得的shR-NA慢病毒颗粒感染Daoy细胞后其MEF2C mRNA表达量较阴性对照组下降了81.1%。结论成功构建了MEF2C基因shRNA慢病毒表达载体并包装成慢病毒颗粒,其能够有效抑制MEF2C mRNA的表达。     

涎腺腺癌微血管密度与预后的研究

<正>在恶性肿瘤的发生发展过程中血管形成起着重要的作用,与恶性肿瘤生长、侵袭和转移密切相关。研究肿瘤组织中微血管密度（microvessel density,MVD）是近年来肿瘤研究的热点之一,在头颈肿瘤中,口腔、咽癌的研究表明MVD的增加明显缩短患者的生存,与淋巴结转移和临床分期明显相关[1]。     

成年大鼠嗅球成鞘细胞的分离培养及形态学研究

目的：探讨大鼠嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells OECs)的分离培养方法并观察其形态。方法：采用差时贴壁和阿糖胞苷(Ara—c)抑制相结合的方法培养嗅鞘细胞,并在不同阶段进行观察和行NGFRp75和GFAP免疫组化染色鉴定。结果：成功培养出高纯度的嗅鞘细胞,胞体呈梭形、多突起形及油煎蛋形3种类型,突起细长编织成网状。结论：差时贴壁和Ara—c抑制相结合的纯化培养方法是一种简单而又有实效的嗅鞘细胞培养方法。     

涎腺腺癌中VEGF表达与微血管密度及预后的关系

目的　研究微血管密度 (MVD)和血管内皮生长因子 (VEGF)在涎腺腺癌中的表达 ,探讨其与预后关系。方法　采用SABC免疫组织化学染色方法检测 4 3例涎腺腺癌中MVD和VEGF的表达 ,采用SPSS软件行统计分析。结果　 6 5 .12 %的涎腺腺癌组织呈VEGF阳性表达。VEGF表达阳性的涎腺腺癌组织MVD显著高于VEGF表达阴性者 (P <0 .0 5 )。VEGF表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关 ,而与肿瘤的临床分期无关。VEGF阴性表达的病人术后 5年生存率较阳性表达者高。结论　涎腺腺癌组织VEGF表达与微血管密度有明显的相关性 ,是涎腺腺癌主要的新生血管诱导因子之一 ,VEGF可做为涎腺腺癌预后的一个有效指标。     

SLE患者外周血中CD23+、CD19+细胞表达状况的研究

目的研究外周血中CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的异常表达在SLE发病及病情进展中的意义。方法应用流式细胞术检测活动期与稳定期SLE患者外周血中CD19 、CD23 及CD23 /CD19 细胞的表达率;同时应用流式直方图分析细胞表面CD19,CD23分子的表达密度。结果活动期SLE患者组CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞表达率均高于稳定期SLE患者组及正常对照组,差异均有显著性意义;稳定期SLE患者组CD23 及CD23 /CD19 与正常对照组比较无显著性差异;稳定期SLE患者组CD19 细胞表达率高于正常对照组,但差异无显著性意义。且CD19 、CD23 及CD23 /CD19 细胞的表达率与病情积分及ANA均成正相关。活动期SLE患者组CD23的平均荧光强度与对照组及稳定期SLE组比较均有显著性差异;活动期SLE患者组CD19的平均荧光强度与对照组、稳定期SLE组比较及稳定期SLE患者组CD19、CD23的平均荧光强度与对照组比较均无显著性差异。结论外周血中CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的异常表达在SLE发病机理及病情进展中起重要作用,检测CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的表达情况对SLE病情监控具有一定的应用价值。     

改良MTT法检测胃肠癌体外化疗药物敏感性

目的 探讨胃肠癌对常用化疗药物的敏感性。方法 应用改良MTT法进行了化疗药物的体外药敏试验。结果 不同病例对同一药物的敏感性不同，有其各自的耐药谱。结论 根据体外药敏试验实行个体化用药方案，可提高临床化疗疗效。     

端粒酶反义寡核苷酸对食管癌细胞Eca-109端粒酶活性及细胞凋亡的影响

目的探讨人端粒酶反义寡核苷酸(PS-ASODN)对食管癌Eca-109端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法1-5uM的PS-ASODN、5uM的N-ASODN作用于Eca-109细胞后,在倒置显微镜下连续观察Eca-109细胞形态学改变;采用半定量TRAP-银染法检测端粒酶活性;用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期变化。结果PS-ASODN对Eca-109细胞具有生长抑制作用,PS-ASODN作用后,细胞的生长速度缓慢,细胞体积缩小,部分细胞变形漂起。随着药物浓度增加,PS-ASODN对Eca-109细胞端粒酶活性的抑制作用逐渐增强,呈浓度依赖性和序列特异性。流式细胞仪检测到凋亡峰并受阻于G0/G1期,而对照组寡核苷酸无上述作用。结论PS-ASODN不但抑制食管癌的增殖,降低端粒酶的活性,而且具有促凋亡的作用,对食管癌的临床治疗具有重要的价值。