宁波市O139群霍乱弧菌分子特征研究

宁波市自1997年发现首例O139群霍乱弧菌引起的病例以来,由该菌引起的患者逐年增多,现已取代O1群霍乱弧菌而成为我市流行的霍乱病原优势菌型.我们对近年来宁波市分离的O139群霍乱弧菌进行分子生物学及分子流行病学特性的研究,为监测、分析和防控霍乱疫情提供依据.     

一株伤寒沙门菌检出TEM-1耐药基因

目的：研究水产品中分离的一株伤寒沙门菌NB2005220中检出的TEM-1耐药基因，分析其在细菌耐β-内酰胺类抗生素中的作用。方法：纸片扩散法药物敏感实验检测细菌耐β-内酰胺类抗生素情况，用常规PCR方法扩增TEM-1耐药基因，并对PCR产物进行测序和NCBI比对分析。结果：发现伤寒沙门菌NB2005220携带TEM-1耐药基因，测序分析其与AJ634602有高度同源性，药敏实验表明，该菌株对氨苄青霉素和羧苄青霉素耐药，对头孢噻吩等敏感，三相水解实验证明这种耐药为β-内酰胺酶引起。结论：首次从水产品中分离的沙门菌NB2005220携带TEM-1耐药基因，介导该菌对氨苄青霉素、羧苄青霉素等耐药。     

3种副溶血性弧菌分型方法的应用与比较

目的:用分型的方法分析副溶血性弧菌的流行优势型,溯源其亲缘关系,为追踪感染源提供依据。方法:用诊断血清进行血清学分群,用PFGE和ERIC进行基因分型。结果:607株分离于海产品的VP分出10个O血清群,有30株至今尚不能分群,分群率为94.64%,O6群和O5群为流行优势群;480株病人VP分为6个血清群,O3群为流行优势群。377株分离于海产品的VP分成29个PFGE型;480株病人VP分成12个PFGE型。261株不同来源的VP分出42个ERIC基因型。结论:3种方法均能用于VP的分型,但各有特点。由于基因分型方法敏感性高、特异性强、分型率和分辨率佳的优点,将逐渐取代传统的表型分型技术。     

甬沪两地海产品中副溶血性弧菌携带与分型

目的:了解宁波和上海两地市售海产品中副溶血性弧菌污染情况以及菌株的流行优势型和毒力等.方法:用PCR快速筛检与GB法相结合方法分离海产品中副溶血性弧菌;用血清学和PFGE方法对菌株进行分群和基因分型;用PCR方法检测tdh和trh毒力基因;结果:从3 740份海产品中分离出1 507株疑似副溶血性弧菌,检出率为40.29％,其中宁波地区检出率为41.42％,上海地区检出率为21.86％;菌株的生化反应典型,560株副溶血性弧菌分出10个血清群,有30株VP未被分型,分型率为95.06％,377株副溶血性弧菌分出29个PFGE型;497株副溶血性弧菌检出7株带tdh毒力基因的副溶血性弧菌,均未检出trh毒力基因,检出率为1.41％.结论:宁波、上海海产品中副溶血性弧菌携带率较高,是诱发副溶血性弧菌疾病的原因食品.菌株的血清型和PFGE型较分散,其流行优势群与致病性副溶血性弧菌的相关性不明显;菌株带tdh和trh毒力基因较低,与病人分离株有明显差别,根据该特征,可将副溶血性弧菌分为致病的和非致病两类,便于分析和检测.     

宁波市伤寒、副伤寒病原学调查及耐药性监测分析

目的了解2005年宁波市春季伤寒、副伤寒流行的病原学特征、菌型分布及细菌对抗菌药物的敏感状况,为伤寒的预防和治疗提供依据。方法采集农贸市场水产品泥蚶、牡蛎等按GB/T4789.4-2003方法开展病原菌的分离培养,病人血液、粪便等标本及带菌者粪便按GB/16001-1995方法进行病原菌分离培养,分离的菌株用VITEK自动鉴定仪作菌株的生化鉴定,用血清凝集试验对菌株分型,用K-B法作菌株的药物敏感试验。结果分离和收集到185株菌株,其中伤寒沙门菌3株,甲型副伤寒沙门菌182株。药敏试验结果显示,185株菌株对头孢哌酮、氧哌嗪青霉素、头孢曲松、头孢他啶及妥布霉素均为敏感,敏感率为100.0%;对氨苄西林、氯霉素、头孢噻肟、氟哌酸较为敏感,敏感率均在80.0%以上;对复方磺胺敏感率最低,仅为60.0%,且有30.3%(56/185)菌株呈现耐药。结论2005年春季宁波市局部地区流行的伤寒、副伤寒以甲型副伤寒沙门菌为优势菌型,少数病原为伤寒沙门菌。病原菌对氧哌嗪青霉素、妥布霉素及头孢哌酮等第3代头孢菌素药物显示良好的敏感性,可作为当前预防和治疗伤寒、副伤寒的首选药物。