介绍一种脂肪组织的冷冻制片方法

在临床病理工作中,病理制片是病理诊断中的重要环节之一,制片质量的好坏,直接影响病理诊断的准确率和及时性,还关系到医院的总体医疗质量和诊疗水平[1]。做一张优质的病理切片,除了需要相应的仪器设备及操作者的经验外,病理组织的质量是根本保证。脂肪组织由于其特有的质地,制片较其它组织困难,这个难题一直困扰着病理技术人员[2]。     

高压锅水浴法修复组织抗原防脱片技术的应用

目前用于免疫组化的抗体近千种 ,不同抗体对病理切片的要求不尽相同。有些抗体 (单抗或多抗 )必须在组织切片经高压修复后才能有效使用 ,如ＥＲ、ＰＲ、ｐ5 3及一些多药耐药标记等。用于免疫组化的病理组织 ,经福尔马林固定后许多抗原决定簇被醛基交联封闭 ,无法与抗体结合 ,采用高温高压 (下称常规法 )处理这些组织 ,就可破坏醛基交联 ,使抗原暴露 ,从而与抗体有效结合。但是由于免疫组化操作步骤多 ,历时长 ,整个过程必须在有水的环境中完成 ,组织切片容易从玻片上脱落。曾采用几种常规组织抗原修复方法 ,防脱片效果并不理想。经过实践 ,…     

六种实验动物主要消化腺的比较组织学研究

目的 对六种实验动物的消化腺进行比较组织学研究,并观察其自发性病变,为实验动物病理学检测标准及以它们为基础的科学研究提供理论依据.方法 选取按照现行实验动物质量国家检测标准检测合格的猕猴30只、比格犬16只、树鼩20只、日本大耳白兔18只、SD大鼠20只及昆明小鼠20只,经麻醉后处死并剖检.选取消化腺组织体积分数10％甲醛固定,常规石蜡切片,HE染色、免疫组化染色及特殊染色,光镜观察,比较它们在组织学结构方面的异同及有无自发性病变.结果 （1）腮腺、颌下腺、舌下腺的组织学差异主要是腺泡的组成、腺泡内脂肪组织的含量、黏液性腺泡AB/PAS染色的情况及导管系统的组织学结构;（2）作为一种独有的唾液腺,比格犬有一对颧腺,日本大耳白兔有一对眶下腺;（3）肝脏的组织学差异主要是肝小叶的组织学结构、门管区的组织学结构及肝细胞的形态;（4）胰腺的组织学差异主要是胰腺小叶内有无淋巴组织以及胰腺导管系统的组织学结构;（5）胆囊的组织学差异主要是表面上皮的形态、黏膜窦是否明显;（6）炎症是肝脏普通存在的自发性病变,在部分实验动物的颌下腺及胰腺也可观察到炎细胞浸润.结论 获得了六种实验动物宝贵的组织学资料并分别揭示了各自的组织学特点.研究人员在制定病理学检测标准、实验研究、药物安全性评价时应充分考虑各种动物的组织学结构差异及自发性病变的存在.     

HPIRS—1000彩色病理图文报告格式规范设计

我们在使用同济医科大学千屏影像公司研制的HPIRS—1000病理图文分析系统软件时,发现原报告格式不符合要求并作了些调整,现介绍如下。1 原报告格式 软件中原报告格式为某地医院的格式,在纸张大小、格式内容及各种域的定义等方面不符合本院要求,且线条、文字及图象排列不够规范。     

乳腺癌干细胞与乳腺癌关系的研究现状

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞.在正常情况下,干细胞的自我更新和分化能力受到了严格的调控,一旦这种调控机制被破坏,细胞就会无限制地生长、繁殖,形成异常新生物,即肿瘤.因此,人们在干细胞的理论基础上提出了肿瘤干细胞的概念[1].     

乳腺增生病与乳腺癌p185蛋白表达及c-erbB-2基因扩增

为探讨c-erbB-2基因在乳腺癌发生早期的作用,用免疫组化方法检测36例乳腺单纯性增生、31例不典型增生、30例乳腺癌中p185蛋白的表达,用狭缝印迹法检测上述组织中c-erbB-2基因的扩增.结果显示p185蛋白在单纯性增生、不典型增生,乳腺癌中的表达率分别为0%,25.8%(8/31),56.7%(17/30);c-erbB-2基因的扩增率分别为0%,19.3%(6/31),36.7%(11/30).表明c-erbB-2基因扩增发生于不典型增生阶段,在增生病向乳腺癌进展中起重要作用,可作为预测乳腺癌的辅助分子标记物.     

兔股骨头缺血性坏死模型的建立与评价

为建立股骨头缺血性坏死动物模型，我们给实验动物肌肉注射醋酸泼尼松龙注射液，8周后进行X线摄片、血液流变学、组织学、免疫组织化学和数字减影血管造影观察和研究，实验结果显示造模成功。     

血管内皮生长因子基因在兔股骨头滑膜细胞的表达

目的：观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)基因在兔股骨头滑膜细胞的表达，以期为股骨头缺血性坏死的基因干预提供实验依据。方法：实验于2002-12／2004—08在中国医学科学院昆明医学生物学研究所和解放军成都军区昆明总医院中心实验科完成。选择健康成年24周龄以上的日本大耳兔12只，对照组和基因组各6只。将重组VEGF基因的真核表达载体(pcDNA／VEGF)和空载体pcDNA各200μg分别注入基因组和对照组兔髋关节腔，采用免疫组化法检测pcDNA／VEGF和pcDNA在滑膜细胞中的表达。结果：VEGF基因转染7d后，可见pcDNA／VEGF在滑膜细胞高效表达，而对照组(空质粒DcDNA)则无。结论：重组VEGF基因可在兔股骨头滑膜细胞中表达。促进股骨头缺血坏死处新生血管形成和侧支循环建立，为基因干预股骨头缺血性坏死提供了坪论基础。     

p21Ha-ras原核表达载体的构建、表达及纯化的研究

目的：构建PET-28a（＋）Ha-ras原核表达质粒，并表达、纯化得到p21ras蛋白，为研究p21ras在肿瘤发病中的作用和机制以及p21ras细胞内抗体抗肿瘤的研究奠定基础。方法：培养人肝癌细胞株7703，提取总RNA，通过RT-PCR特异扩增出Ha-ras cDNA，然后应用TA克隆策略将纯化后的Ha-ras插入至中间载体pMD18-T vector中得到重组质粒PMD-18T vector-ras．重组质粒PMD-18T vector-Ha-ras经过BamH I和Hind Ⅲ双酶切后纯化回收得到具有黏性末端的Ha-ras cDNA．将PET-28a（＋）同样经过BarnH I和Hind Ⅲ双酶切后纯化回收得到与ras cDNA相同的黏性末端的线形质粒片段，将具有黏性末端的ras cDNA与酶切后的PET-28a（＋）定向连接，构建出重组质粒PET-28a（＋）-Ha-ras，经酶切鉴定，并通过核苷酸序列测序证实。将鉴定正确的PET-28a（＋）．Ha-ras转入感受态BL-21（DE3）中诱导表达，利用组氨酸“标签”（His-Tag）对p21ras进行金属螯合亲和层析纯化。结果：测序分析证实，克隆入PET-28a（＋）的Ha-ras序列与Genbank登录号为“NM_005343”的Ha-ras cDNA序列一致，将重组质粒PET-28a（＋）．Ha-ras转化BL21（DE3），用IPTG诱导目的蛋白表达。SDS、PAG和蛋白纯化结果表明，PET-28a（＋）-Ha-Ras在E-coli中获得可溶性高表达，经Ni-NTA-树脂柱亲和层析纯化得到了PAGE纯的p21ras蛋白。结论：成功构建了原核表达载体PET-28a（＋1）-Ha-ras，并经表达、纯化得到活性形式的p21ras蛋白，从而为研究p21ras在肿瘤发病中的作用和机制以及P21ras细胞内抗体抗肿瘤的研究奠定了基础。     

加强临床病理联系 积极预防医疗纠纷

临床医生中存在两种对病理检查的片面认识,一种认为病理诊断必须百分之百正确;另一种认为病理诊断可有可无或者是例行公事。实际上临床与病理是一个不可分割的整体,二