成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体基因突变对小鼠骨髓基质细胞发育的影响

目的:观察对比野生型小鼠和成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体突变型小鼠骨髓基质细胞体外培养的生长情况以及成骨潜能,探讨成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体功能持续增强对小鼠骨髓基质细胞发育的影响。方法:实验于2005-09/2006-02在解放军第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。①实验动物:将雄性成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体S252W突变小鼠(由陈林教授在美国国立卫生研究院建立后引入本实验室)和雌性C57BL/6J小鼠(由解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心提供)交配,经过基因型鉴定的雄性F1代8周龄小鼠按照基因型分为野生型组和突变型组,12只/组。②实验方法:将两组小鼠脱臼处死后分离胫、股骨,用DMEM培养液冲出骨髓,离心后弃上清,加入DMEM低糖培养液制成细胞悬液,贴壁法分离培养骨髓基质细胞,以1×108 L-1密度传代。③实验评估:倒置相差显微镜下观察细胞形态及贴壁生长情况。采用MTT法检测两组骨髓基质细胞的增殖情况。检测体外成骨诱导条件下两组骨髓基质细胞的碱性磷酸酶活性。采用Vankossa染色检测体外成骨诱导条件下两组骨髓基质细胞的钙结节形成能力。结果:①形态学观察:倒置相差显微镜下两组骨髓基质细胞形态变化相似。第3代骨髓基质细胞在体外诱导成骨条件下增殖速度明显减慢,多数细胞由梭形变成长方形,并逐渐成为立方形,细胞体积增大。②生长曲线:野生型组骨髓基质细胞的吸光度值在接种后2d内变化不大,细胞处于潜伏期,第4天显著增加,第6天达高峰,进入平台期。与野生型组比较,突变型组骨髓基质细胞生长曲线出现右移和平台期滞后。③碱性磷酸酶活性:在体外诱导成骨条件下,野生型组骨髓基质细胞随培养时间延长碱性磷酸酶活性逐渐上升,第9～15天达高峰,然后随细胞老化而下降。与野生型组相比较,突变型组骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性增高出现滞后现象,并且其高峰数值显著低于野生型组(P<0.05)。④钙结节形成:经过21d的成骨诱导培养,野生型组骨髓基质细胞可见较多的钙结节形成,突变型组有分散的钙结节形成,但较细小。结论:成纤维细胞生长因子及其受体信号对细胞发育的调控效应是复杂多面的,持续的成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体功能增强可能引起体外培养的小鼠骨髓基质细胞增生减缓,并可能阻抑其向成骨细胞的分化。     

有源电极表面肌电信号在检测中的应用

目的:准确地检测表面肌电信号。方法:研究减小表面肌电信号检测中的噪声方法,探讨如何采用差分结构放大器、有源电极、滤波器等方法设计电极单元,以及电极形状和正确的放置方法。结果:采用仪用放大器AD620设计了双极性的有源电极成功用于表面肌电信号检测。结论:实验表明,采用有源电极可以提高信噪比,减小噪声,有效地提取出表面肌电信号。     

维生素D信号通路在骨骼稳态维持中的作用

维生素D作为一种重要的类固醇激素在骨骼发育和稳态维持中发挥重要作用。机体从外界获取的维生素D需在体内经过2次羟化转变为活性1,25-二羟基维生素D3,然后与维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)结合后发挥生物学作用。传统观点认为1,25-二羟基维生素D3在体内主要通过内分泌途径作用于肠道和肾脏,通过调节钙磷吸收和重吸收维持矿物质稳态,并因此间接调节骨骼稳态。近年发现1,25-二羟基维生素D3能直接作用于成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞等,通过调节其增殖、分化直接调节骨形成与骨吸收,维持骨稳态的平衡。     

成年小鼠骨细胞的分离鉴定及其成纤维细胞生长因子受体的表达

目的 建立稳定的成年小鼠骨细胞分离和鉴定方法,检测其标志性基因和成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)表达.方法 将3月龄C57小鼠的胫骨和股骨分离后剪除干骺端,冲去骨髓,切割成约1 mm碎片,用Ⅰ型胶原酶和EDTA溶液交替消化以获取骨细胞.分别通过形态观察、ALP染色、OC染色和E11/gp38染色鉴定骨细胞.qRT-PCR检测骨细胞标志性基因表达,并与骨细胞系IDG-SW3和MLO-Y4比较.检测FGFRs在骨细胞的表达.结果 分离出的骨细胞呈多树突状或星状,并借突触彼此连接.ALP染色可见成骨细胞染色阳性,骨细胞染色阴性.OC染色成骨细胞和骨细胞均阳性,成纤维细胞阴性,而E11/gp38染色仅见骨细胞染色阳性.实验所得细胞表达骨细胞特异基因DMP1、SOST、FGF23,表明骨细胞成功分离,且此原代骨细胞与IDG-SW3和MLO-Y4细胞系表达有差异.FGFR1～3在骨细胞中均有表达.结论 成功分离成年小鼠原代骨细胞,发现FGFR1～3在原代骨细胞中均有表达.     

护理干预对骨折患者术后疼痛及满意度的影响

目的探讨护理干预对骨折患者术后疼痛及满意度的影响。方法选择峡江县人民医院2009年1月至2010年6月收治的100例骨科手术患者为研究对象,按随机数字对照法分为干预组和常规组各50例。常规组术后给予常规护理,干预组在常规组基础上给予针对性的护理干预,比较2组患者术后48天的疼痛程度及对护理工作的满意度。结果干预组患者术后疼痛程度明显轻与常规组,对护理工作的满意度显著高于常规组。结论护理干预能明显减轻骨折患者术后疼痛程度,并有效提高对护理工作的满意度。     

关节软骨干/祖细胞治疗关节软骨缺损研究进展

关节软骨由于无血管、神经和淋巴管,损伤后自我修复能力极差。目前软骨损伤修复主要采用其他组织来源的间充质干细胞体外大量扩增或自体移植,然而体外扩增容易去分化,自体移植需要多次手术。理想的关节软骨修复要求新生软骨具有与原关节软骨相同的分层结构、生物特性及基质组分,并实现功能学恢复。激活内源性关节软骨干/祖细胞促进缺损部位自我修复或组织工程化软骨为软骨再生提供可能性。前期研究表明,关节软骨干/祖细胞在多个组织存在。该文对关节软骨干/祖细胞治疗关节软骨缺损研究进展作一综述。     

重庆地区围绝经期与绝经后妇女骨密度及身体成分相关指标分析

目的 调查重庆地区围绝经期与绝经后妇女(5~10年）骨密度及相关身体成分指标,分析身体成分指标与骨密度的关系,为本地区骨质疏松的防治提供线索。方法 ①选取2017年于本院进行健康体检年龄≥45岁的妇女956名(排除相关原发疾病）,其中围绝经期510名,绝经后446名,并分别记录身高、体重,计算出体质量指数(body mass index, BMI）;②使用美国GE公司双能X线骨密度仪测定受试者腰椎1~4、左侧股骨颈、大转子、股骨干、全髋的骨密度以及全身脂肪、肌肉含量与骨矿含量。结果 一般情况分析发现,重庆地区围绝经期妇女身高明显高于绝经后妇女［分别为(156.81 ± 5.27) cm、(153.32 ±5.51) cm］,而体质量指数无明显差异。 绝经后妇女肌肉含量(37.91 ± 6.42) kg、脂肪含量(17.84 ± 2.16) kg、骨矿含量(1.58±0.41) kg均较围绝经期妇女 [(37.88 ± 6.15) kg、(19.21 ± 2.07) kg、(1.75±0.20) kg ]降低。绝经后妇女诊断骨质疏松与低骨量的比例分别为28.92%、41.03%,高于围绝经期妇女低骨量的发生率(28.63%)。围绝经期妇女腰椎1~4和左侧股骨颈、大转子、股骨干及全髋骨密度 (bone mineral density, BMD)明显高于绝经后妇女［分别是(1.0 959 ± 0.1 603) g/m2和(0.8 410 ± 0.1 606) g/m2,(0.8 178 ± 0.1 577) g/m2和(0.7 872 ± 0.1 585) g/m2,(0.6 946 ± 0.1 252) g/m2和(0.6 728±0.1 274) g/m2,(1.0 329 ± 0.1 712) g/m2和(1.0 030±0.1 737) g/m2,(0.8 773 ± 0.1 448) g/m2和(0.8 495 ± 0.1 478) g/m2］。结论 绝经后妇女髋部、腰椎等部位BMD均较围绝经期妇女明显降低;骨质疏松及低骨量的发生率随年龄增加显著升高;和围绝经期妇女相比,绝经后妇女全身脂肪含量偏低;BMD与全身肌肉含量呈正相关性。     

狂犬病毒CTN-1v株毒种的不良反应与免疫学效果研究

目的：观察CTN－1v株毒种的不良反应及免疫学效果，方法：选择20例健康接受应用CTN－1v株毒种的制备的狂犬病疫苗，观察接种的不良反应进行中和抗体测定。结果：接种的不良反应率为35％（7／20），中和抗是转率为100％，免疫后14天中和抗体水平平均为13．08IU/ml(5.83-22.16IU/ml)，结论：CTN－1v株毒种，不良反应轻微而且免疫原性良好，可在短时间产生较高水平的中和抗体。     

骨培养探讨脂多糖对小鼠骨骼发育及矿化的影响

目的 探讨体外培养情况下脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激对小鼠骨骼发育和矿化的影响及其机制.方法 分离E18.5 d小鼠跖骨和胫骨,分为空白对照组(Blank组)及LPS组(10μg/mL LPS).分别于培养后第1、7天照相,计算跖骨和胫骨全长增长率(TL-rate)、矿化带增长率(CZ-rate)、第7天矿化带占骨全长的比例(CZ％).培养7d后固定、石蜡包埋切片,臧红固绿和甲苯胺蓝染色观察肥大带宽度、Ⅱ型胶原(collagenⅡ,ColⅡ)、X型胶原(collagen X,Col X)免疫组化染色观察软骨细胞分化及TUNEL染色观察软骨细胞凋亡变化.结果 与Blank组比较,LPS处理后跖骨和胫骨TL-rate及CZ-rate明显降低(跖骨TL-rate P=0.025;跖骨CZ-rate P=0.019;胫骨TL-rate P=0.010;胫骨CZ-rate P=0.024).臧红固绿、甲苯胺蓝染色及形态计量显示LPS组胫骨肥大带较Blank组明显变短(P ＜0.001).与Blank组比较,LPS组胫骨的软骨分化相关蛋白ColⅡ、ColX表达降低,软骨细胞凋亡明显增加.结论 LPS通过抑制软骨增生、分化及促进肥大带软骨细胞凋亡来抑制骨骼发育及矿化.     

呼吸、体温两生理参数检测电路的设计

介绍了一种由8Xc196单片机控制的用于检测人体呼吸节律、体温参数监护仪的设计。系统采用液晶显示器（LCD）作为显示屏,具有实时显示呼吸波及其频率、体温参数以及呼吸频率、体温24h趋势图和自动报警功能。并可通过RS232接口与PC机之间进行数据传输。