LncRNA FENDRR调控miR-942-5p表达对食管癌细胞增殖、上皮间充质转化及侵袭的影响

目的:探究LncRNA FENDRR通过miR-942-5p对EC细胞增殖、上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）和侵袭的影响。方法:收集EC和食管正常组织,将EC-113细胞分为BC组（不转染）、过表达（OE）-FENDRR-NC组（转染pcDNA空质粒）、OE-FENDRR组（转染pcDNA-LncRNA FENDRR质粒）、OE-FENDRR+miR-942-5p mimics-NC组（共转染pcDNA-LncRNA FENDRR+miR-942-5p mimics-NC）和OE-FENDRR+miR-942-5p mimics组（共转染pcDNA-LncRNA FENDRR+miR-942-5p mimics）。实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）分析组织或细胞中LncRNA FENDRR、miR-942-5p表达量;细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）法、裸鼠成瘤实验、Transwell法分析EC-113细胞体外和体内增殖和侵袭活性;双荧光素酶报告实验和RNA pull down实验分析LncRNA FENDRR和miR-942-5p的靶向关系;蛋白质印迹法（Western blot）分析EMT相关蛋白表达。结果:转染pcDNA-LncRNA FENDRR质粒可增高EC-113细胞的LncRNA FENDRR表达量,降低miR-942-5p表达,同时降低体外和体内增殖活性、侵袭数量、N-钙黏附素（N-cadherin,N-CAD）、波形蛋白（vimentin,VIM）和Snial及基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP9）蛋白水平,增加E-钙黏附素（E-cadherin,E-CAD）蛋白水平（P＜0.05）,而miR-942-5p mimics逆转了上述作用。LncRNA FENDRR可靶向并下调miR-942-5p表达。结论:LncRNA FENDRR为miR-942-5p分子海绵,可以下调miR-942-5p表达,从而抑制EC细胞增殖、EMT和侵袭能力。     

TRIM28转录激活RMI2对肝癌SK-Hep-1细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究RecQ介导的基因组不稳定性(因子)-2 (RMI2)对肝癌(HCC)SK-Hep-1细胞恶性表型的影响。方法:GEPIA数据库检测RMI2、三结构域蛋白28(TRIM28)在HCC组织中的表达,并预测HCC分期、HCC患者总体生存率和无病生存率,以及RMI2与TRIM28表达在HCC组织中的相关性;实时定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹法(Western blot)检测RMI2和TRIM28表达。基于HumanTFDB网站预测RMI2启动子与TRIM28结合位点;荧光素酶报告实验和染色质免疫沉淀法(ChIP)验证RMI2与TRIM28两者的结合关系。采用MTT和EdU染色检测细胞增殖;流式细胞术和TUNEL实验分别检测细胞周期和凋亡;Western blot分析增殖和凋亡相关蛋白表达。结果:HCC组织和细胞系中RMI2和TRIM28表达水平较正常组织和肝上皮细胞增加(P<0.001),且与预后不良相关。敲低RMI2后SK-Hep-1细胞增殖能力降低(P<0.001),导致G0/G1期细胞阻滞(P<0.001),细胞凋亡率增加(P<0.001)。HCC组织中RMI2和TRIM28的表达呈正相关,TRIM28可结合RMI2启动子从而上调其表达(P<0.001)。TRIM28过表达可逆转RMI2敲低对SK-Hep-1细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响(P<0.05)。结论:RMI2受TRIM28转录激活从而调控SK-Hep-1细胞恶性表型。     

以颈横动脉为蒂的两种皮瓣在老年口腔癌术后缺损修复中应用的对比研究

目的:探讨以颈横动脉为蒂的两种皮瓣在修复口腔癌术后缺损的效果。方法:收集2021年3月-2022年3月在我院口腔颌面外科确诊为口腔癌并进行了皮瓣移植修复的39例患者。其中锁骨上动脉皮瓣组15例,上斜方肌皮瓣组24例。观察并记录皮瓣成活情况,供受区形态及功能恢复情况。结果:39例皮瓣总成活率为89.74%(35／39),锁骨上动脉皮瓣成活率为80.00%(12／15),上斜方肌皮瓣成活率为95.83%(23／24),两组皮瓣存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在皮瓣特征方面,两组皮瓣的取瓣时间、皮瓣大小、住院时间、修复部位方面比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。但是在术后并发症中,锁骨上动脉组在术后感染、瘢痕、色素沉着、功能障碍方面优于上斜方肌皮瓣组,差异具有统计学意义(P<0.05)。术后随访患者6个月,2组皮瓣修复效果良好,两组皮瓣术后生存质量评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:锁骨上动脉皮瓣与上斜方肌皮瓣均可作为修复老年口腔癌术后缺损的可靠皮瓣,但在并发症方面,锁骨上动脉皮瓣要优于上斜方肌皮瓣,能达到更好的效果。     

甲状腺乳头状癌伴桥本甲状腺炎患者中央区淋巴结转移预测模型的构建与验证

目的:评估HT合并PTC患者中央淋巴结转移（central lymph node metastasis,CLNM）的预测因素。建立列线图预测PTC伴HT患者发生CLNM的可能性。方法:回顾性收集了2018年1月至2021年12月在我院接受甲状腺手术的4 171例PTC患者的资料。最后,共纳入671例PTC合并HT患者。其中,468例患者组成训练组,其余203例患者组成了验证组,以验证模型的性能。预测因子选择采用LASSO回归模型,并采用多因素logistic回归分析建立预测模型,建立了预测CLNM的列线图,并进行了内部验证。结果:LASSO回归模型显示,有17个变量可能是影响CLNM发生的因素（P<0.05）。随后,多因素逻辑回归分析显示,年龄较低、结节性高回声、肿瘤大直径、肿瘤多灶性、甲状腺外扩张（extrathyroidal extension,ETE）、颈部淋巴结肿大、癌胚抗原（carcino-embryonic antigen,CEA）是发生中央区淋巴结转移（CLNM）的独立预测因素。基于独立预测因素构建PTC合并HT患者发生CLNM列线图,并进行内部验证。通过建立预测模型,训练组发生CLNM的ROC曲线下面积（AUC）为0.774（95%CI,0.725~0.824）,验证组发生CLNM的ROC曲线下面积（AUC）为0.781（95%CI,0.712~0.850）。列线图对训练队列和验证队列以及合并数据集均显示出良好的校准和鉴别能力。结论:本研究构建的列线图预测模型对甲状腺乳头状癌伴桥本甲状腺炎患者发生中央区淋巴结转移（CLNM）有良好的预测作用。为临床治疗方案提供合理的参考,帮助临床医生为患者制定个性化的治疗方案。     

LOX1在胃癌中的表达及其促肿瘤生长的机制探讨

目的:探讨血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1（lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX1）在胃癌中的表达及与预后相关性,同时明确其促胃癌生长作用及潜在机制。方法:利用人类癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达汇编(GEO)和癌症细胞系百科全书(CCLE)数据库分析LOX1在胃癌组织和细胞中的表达水平;利用多种统计方法分析LOX1表达水平与胃癌患者预后及临床特征的相关性;通过质粒转染敲低LOX1,进一步应用细胞功能实验（CCK-8、克隆形成、EdU实验）探究LOX1对胃癌细胞增殖能力的调控作用;通过Western blot、qPCR、免疫荧光分析LOX1对NF-κB信号通路激活的调控作用。结果:LOX1在胃癌组织和细胞中显著高表达;高水平LOX1提示胃癌患者预后较差且肿瘤较易发生转移;敲低LOX1显著抑制肿瘤细胞增殖;敲低LOX1显著抑制胃癌细胞中NF-κB信号通路的激活。结论:LOX1通过激活NF-κB信号通路对胃癌细胞增殖能力具有调控作用;LOX1可作为生物标记物提示患者预后;靶向LOX1可作为潜在胃癌治疗新方案。     

circ_0001721/miR-198对前列腺癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨circ_0001721/miR-198分子轴对人前列腺癌细胞DU145生物学行为的影响及相关作用机制。方法:应用qRT-PCR法检测circ_0001721、miR-198的表达量;DU145细胞转染si-circ_0001721、miR-198 mimics、anti-miR-198以及相应的对照（si-NC、miR-NC、anti-miR-NC）;CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验检测细胞增殖、克隆、凋亡、迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证circ_0001721与miR-198的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果:与癌旁组织比较,circ_0001721在前列腺癌组织中高表达（P＜0.05）,而miR-198在前列腺癌组织中低表达（P＜0.05）;与转染si-NC或转染miR-NC相比,si-circ_0001721或miR-198 mimics可以提高细胞增殖抑制率、凋亡率和E-cadherin蛋白水平（P＜0.05）,降低克隆形成数、迁移和侵袭数以及N-cadherin蛋白水平（P＜0.05）;circ_0001721可靶向结合miR-198;与共转染si-circ_0001721和anti-miR-NC相比,共转染si-circ_0001721和anti-miR-198降低了细胞增殖抑制率、凋亡率和E-cadherin蛋白水平（P＜0.05）,而增加了克隆形成数、迁移和侵袭数以及N-cadherin蛋白水平（P＜0.05）。结论:敲低circ_0001721可通过上调miR-198抑制前列腺癌细胞的生长和转移。     

miR-34s增强结直肠癌细胞对放射敏感性的作用研究

目的:探讨miR-34s对结直肠癌细胞放射敏感性的影响以及在电离辐射致DNA损伤中的作用。方法:利用实时荧光定量PCR（real-time quantitative fluorescence PCR,qRT-PCR）检测miR-34a/b/c-5p在结直肠癌细胞中的表达水平,以及电离辐射后miR-34a/b/c-5p表达水平变化趋势。基于克隆形成法和单击多靶模型建立细胞存活曲线,分析miR-34a/b/c-5p对结直肠癌细胞放射敏感性的影响。过表达miR-34a/b/c-5p并进行照射,利用免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点形成情况,进而分析miR-34a/b/c-5p对电离辐射致DNA损伤的作用。结果:miR-34a/b/c-5p在HCT116细胞中的表达水平明显高于HT29细胞（P＜0.05）。HCT116细胞经4 Gy照射后24 h内,miR-34a/b/c-5p表达水平呈双峰变化趋势。与miR-NC组相比,过表达miR-34a/b/c-5p可显著增加结直肠癌细胞的放射敏感性,miR-34a/b/c-5p组细胞平均致死剂量（D0）和准阈值剂量（Dq）均明显降低,且辐射增敏比（SER）明显增加。过表达miR-34a/b/c-5p可显著增加电离辐射诱导的DNA双链断裂（double strand breaks,DSBs）水平,照射后1 h和8 h γH2AX焦点数明显高于miR-NC组（P＜0.05）。结论:miR-34s为放射响应miRNA分子,过表达miR-34s可增加电离辐射诱导的DNA损伤水平并增强结直肠癌细胞的放射敏感性。     

PD-L1在结直肠癌肿瘤细胞、肿瘤浸润免疫细胞中的表达与临床病理特征及预后的相关性

目的:探讨结直肠癌（colorectal cancer,CRC）原发灶肿瘤细胞（tumor cells,TC）、肿瘤浸润免疫细胞（tumor-infiltrating immune cells,TIIC）中程序性死亡-配体1（programmed death-ligand 1,PD-L1）的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法:采用免疫组化法检测 2018-2021年我院72例行结直肠癌根治性切除术且病理证实的癌组织TC、TIIC中PD-L1的表达,分析其与临床病理特征及总生存期（overall survival,OS）的关系。结果:72例结直肠癌TC PD-L1阳性率为6.9%,与肿瘤分化程度相关。TIIC PD-L1阳性率为48.6%,与术前血CEA、CA199水平有关。Kaplan-Meier 及 Log-rank 结果显示,患者OS与分化程度、淋巴结转移、肝转移、TIIC PD-L1表达有关（P＜0.05）,TIIC PD-L1阳性患者比阴性患者OS长。Cox单因素和多因素回归分析显示:分化程度、淋巴结转移、肝转移、TIIC PD-L1 表达是影响CRC患者 OS 的独立预后因素。结论:PD-L1 在CRC TC及TIIC中均表达,TIIC PD-L1阳性患者比阴性患者OS长。TIIC PD-L1的表达更能反应肿瘤免疫微环境,为免疫治疗疗效预测、CRC预后预测提供参考。     

短链脂肪酸在肿瘤免疫治疗中的作用及机制研究进展

免疫治疗的临床应用显著提高了肿瘤患者的生存率,其机制除了其本身具有增强免疫细胞介导的抗肿瘤反应外,肠道微生物及其代谢产物的变化也发挥着重要作用。短链脂肪酸是结肠中细菌发酵未被小肠吸收的碳水化合物的主要产物,有研究表明短链脂肪酸具有免疫调节功能,可以影响肿瘤对免疫检查点抑制剂的应答。本文就近年来短链脂肪酸在肿瘤的免疫治疗过程中发挥作用的研究进展进行综述。     

菌群移植联合PD-L1抑制剂及化疗治疗三阴性乳腺癌的展望

与其他乳腺癌亚型相比,三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)患者,无论他们的疾病阶段,总是被认为总体生存数据最差。近年来,PD-L1抑制剂联合白蛋白紫杉醇在治疗TNBC已经取得突破性进展,但在治疗过程中药物副作用也极大地限制了化疗的临床应用,造成它在杀伤癌细胞的同时却又损害了人体的健康。目前已有多方面的科研结果证实,平衡的肠道菌群可以增强化疗效果减轻其副作用。菌群移植作为一种新技术在重建胃肠道微生态方面已在国内外一些医疗研究机构广泛开展,本文就菌群移植联合PD-L1抑制剂及化疗治疗三阴性乳腺癌的价值作一综述。