糖耐量异常患者骨密度水平测定及其与血糖代谢指标的关系探究

目的 研究糖耐量异常(IGT)患者的骨密度水平及其与血糖代谢指标的关系.方法 将河北医科大学第一医院门诊体检发现的IGT患者290例纳入研究的观察组,同期体检的健康者290例纳入研究的对照组,检测两组受试者的血糖代谢指标空腹血糖、空腹血浆胰岛素、胰岛素样生长因子、糖基化终末产物、糖化血红蛋白水平以及L3、L4椎体、股骨颈、大转子、Ward's区的骨密度,分析骨密度水平与血糖代谢指标的关系.结果 两组受试者空腹血糖水平无明显差异(P＞0.05).观察组患者的晚期糖基化终末产物、糖化血红蛋白水平高于对照组,胰岛素、胰岛素样生长因子水平以及L3、L4腰椎、股骨颈、Ward's三角区、大转子的骨密度水平均低于对照组.糖基化终末产物、糖化血红蛋白水平与骨密度水平呈负相关,胰岛素、胰岛素样生长因子水平与骨密度水平呈正相关.结论 IGT患者的骨密度显著下降,且骨密度与血糖代谢指标胰岛素、胰岛素样生长因子、糖基化终末产物、糖化血红蛋白水平密切相关.     

泛素特异性蛋白酶4对脂肪干细胞成骨分化的影响

目的:本研究通过使用泛素特异性蛋白酶4(USP4)抑制剂Vialinin A干预大鼠脂肪干细胞(ASCs)的生长分化,探究USP4对ASCs的成骨分化的影响。方法:将分离培养至第3代的ASCs细胞分为6组分别用含0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L Vialinin A的培养基培养10 d,CCK-8检测各组细胞增殖情况。将第3代细胞分为实验组、阳性以及阴性对照组,分别用含0.5μmol/L Vialinin A的成骨诱导液、不含Vialinin A的成骨诱导液及普通的α-MEM培养。检测各组第7天细胞内USP4、β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)基因的表达。将3组细胞培养至第4、7、10、14天进行ALP染色,检测ALP的活性;培养至21 d时进行茜素红染色,检测细胞矿化结节的形成。采用t检验比较组间数据差异,P<0.05时差异具有统计学意义。结果:0.5μmol/L Vialinin A处理的实验组细胞增殖趋势与对照组的差异无统计学意义,表明该浓度的Vialinin A对细胞增殖无影响,作为后续实验组浓度。ALP与茜素红染色结果显示实验组染色效果均较其他组显著。RT-qPCR结果显示与阴性对照组相比,阳性对照组与实验组细胞内USP4与β-catenin表达量较低,差异具有统计学意义。实验组与阳性对照组相比无显著性差异。与阳性对照组相比,实验组的ALP与OPN表达量显著升高,差异具有统计学意义。结论 :0.5μmol/L的USP4抑制剂Vialinin A可以促进大鼠ASCs内ALP与OPN基因的表达。但USP4可能并非通过β-catenin途径调节其成骨分化。     

大鼠慢性牙周炎与IgA肾病复合模型血清中MMP-3的表达及意义

目的：研究大鼠慢性牙周炎与IgA肾病（IgAN）复合模型血清中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）的水平,探讨慢性牙周炎与IgAN之间的可能发病机制。方法：40只SD大鼠随机分成4组,每组10只,分别为空白对照组、慢性牙周炎组、IgAN组和慢性牙周炎＋IgAN复合组。第12周末处死动物分别检测血清中MMP-3、血肌酐（Scr）,24h尿蛋白,大鼠牙龈附着丧失（AL）及出血指数（SBI）结果,观察牙周和。肾脏组织病理学改变。结果：慢性牙周炎＋IgAN复合组分别与空白对照组、慢性牙周炎组、IgAN组相比,血清MMP-3、Scr含量均显著增高（P〈0．05）,血清MMP-3与24h尿蛋白定量、AL的多元线性回归方程：24h尿蛋白-1．822＋0．206×MMP-3,R2—0．691（P〈0．05）AL-26．316＋1．577×MMP-3,R2—0．549（P〈0．05）。结论：血清MMP-3的水平在慢性牙周炎与IgAN复合组中明显增加,可能与两种疾病存在一定的关系,为研究二者发病机制提供了一个方向。     

NT-3转染的SC对坐骨神经缺损大鼠腓肠肌细胞的影响

目的观察神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的施旺细胞(SC)对大鼠坐骨神经缺损模型腓肠肌细胞的影响。方法取3 d龄Wistar大鼠2只,分离、培养SC。将重组人真核细胞质粒(pcDNA3)-NT-3通过阳离子脂质体转染SC,用免疫组化染色观察转染前后SC的生长速度,测定SC含量。Wistar成年大鼠80只制成坐骨神经缺损模型,向坐骨神经断端分别注入ECM凝胶(A组)、SC-PLGA ECM凝胶(B组)、NT-3基因-PLGA ECM凝胶(C组)、NT-3基因修饰SC-PLGA ECM凝胶(D组)各20μL,每组20只。分别于术后1、4、8、12周每组各取5只大鼠,制作腓肠肌标本,常规HE染色,测量肌纤维横截面积。采用Tunel法对肌细胞凋亡率进行检测。结果 NT-3经阳离子脂质体转染SC后3、5、7、9、14、21 d SC细胞数、纯度与转染前相比,P均<0.05。术后12周腓肠肌纤维横截面积B、C、D组与A组相比,B、C组与D组相比,P均<0.05。转染后12周A、B、C、D组腓肠肌细胞凋亡率分别为32.09%±1.02%、15.84%±0.63%、11.67%±0.48%、6.83%±0.25%,A组>B组>C组>D组,P均<0.05。结论 NT-3基因经阳离子脂质体转染SC能促进SC的分泌,修复损伤神经,防止失神经肌细胞凋亡。     

放射治疗与介入治疗肝源性脾亢75例

目的:比较放射性外照射、三维适形放疗及介入治疗肝源性脾亢的疗效、不良反应及住院费用.方法:选择60名肝硬化脾亢患者和15名原发性肝癌合并脾亢患者作为研究对象,前者分为肝硬化脾脏介入治疗组和肝硬化脾脏外照射治疗组;肝硬化脾亢采用脾脏外照射治疗,介入治疗采用部分脾脏栓塞术,肝癌合并脾亢采用脾脏三维适形放疗,评价3组治疗前、治疗中及治疗后脾脏大小、血常规指标、不良反应及住院费用情况.结果:治疗后3组患者脾脏均显著缩小,白细胞计数、血红蛋白和血小板计数均显著升高(P<0.05),但3组患者脾脏大小及血常规指标变化之间均无显著性差异(P>0.05).治疗后肝硬化脾脏外照射及肝癌脾脏三维适形放疗组发热和疼痛评价指标较介入治疗组显著减轻(0.57±0.55,0.64±0.51vs1.80±1.21;0.36±0.63,1.67±1.12vs4.59±3.22,均P<0.05).肝硬化脾脏外照射放疗组住院费用显著低于肝癌脾脏三维适形放疗组和介入组.结论:放射性外照射治疗肝硬化脾亢、三维适型放射治疗肝癌合并脾亢可达到和介入治疗相同的疗效,并能显著减轻发热和疼痛反应,缩减治疗费用.     

大剂量糖皮质激素上调血管内皮细胞MR表达的意义

目的 观察UPS和Dex对人脐静脉内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况,以探讨糖皮质激素作用的新机制.方法 利用内毒素脂多糖LPS“致伤”血管内皮细胞,用地塞米松进行“治疗”,然后通过RT-PCR和免疫组化的方法检测血管内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况.结果 内皮细胞本身能明显表达MRmRNA,运用不同浓度Dex和100 ng/mlLPS刺激后,可使人脐静脉内皮细胞内MRmRNA表达明显下降,应用大剂量(10-6mol/L)的Dex刺激细胞3h,MRmRNA的表达无明显变化,6h开始有升高,12 h达高峰,24 h回升近刺激前水平.免疫组化的结果与RT-PCR一致.结论 大剂量的DEX( 10-6mol/l)可上调MR的表达,GC引起GR和MR表达的不同变化可能是机体对损伤应激的一种调节机制,表明糖皮质激素作用存在新的机制.     

大剂量糖皮质激素下调血管内皮细胞GR表达的意义

目的观察LPS和Dex对人脐静脉内皮细胞糖皮质激素受体(GR)的表达情况。方法利用内毒素脂多糖LPS"致伤"血管内皮细胞,用地塞米松进行"治疗",然后通过RT-PCR和免疫组化的方法检测血管内皮细胞糖皮质激素受体(GR)的表达情况。结果内皮细胞本身能明显表达GRmRNA,运用不同浓度Dex和100 ng/ml LPS刺激后,可使人脐静脉内皮细胞内GRmRNA表达明显下降,应用大剂量(10-6mol/L)的Dex刺激细胞3h,GRmRNA的表达无明显变化,6 h开始明显下降,12 h达高峰,24 h回升近刺激前水平。结论大剂量的Dex(10-6mol/L)可下调GR的表达,表明严重创伤时血管内皮细胞中糖皮质激素作用存在其他的作用机制。     

运用两种BSA剂量建立IgA肾病大鼠模型观察

目的:目前IgA肾病(IgAN)动物模型并无经典造模方法,本实验选择国内较常用方法建立大鼠IgAN模型,分两个时间点观察不同剂量牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)灌胃联合注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)+四氯化碳(carbon terachloride,CCL4)方法建立IgA肾病模型效果。方法:将SPF级健康雄性SD大鼠60只(平均体重200～240g)随机分为3组,每组20只。低剂量组(A组):BSA400mg/kg(100g/L)隔天灌胃,持续12周;皮下注射蓖麻油0.3ml+CCL40.10ml,每周1次持续12周,第8周LPS0.05mg尾静脉注射。高剂量组(B组):BSA增加至600mg/kg(100g/L),余干预同低剂量组。对照组(C组)生理盐水4ml/kg灌胃,0.4ml皮下注射。建模后第8周、12周每组各处死10只大鼠,留取血、尿、肾组织标本检测。观察指标:一般情况、蛋白尿、血尿、肝肾功能、肾组织病理。结果:模型组大鼠血肌酐、尿素氮及尿蛋白均明显增高(P<0.05),高剂量组显著高于低剂量组(P<0.05),且肾组织病理8周后均出现轻中度系膜细胞及系膜基质的增生,12周末显著伴肾间质轻度纤维化,高剂量组病变较重;12周末均有荧光出现,均强于第8周,低剂量组荧光表达不典型,高剂量组表达强于低剂量组(P<0.05)。电镜报告与病理表现一致。结论:运用BSA+LPS+CCL4联合造模方法在12周左右可建立快速IgA肾病动物模型,而且高剂量BSA(600mg/kg)组肾组织病变更显著,模型更典型。此模型的建立及运用可以为IgA肾病临床及基础研究提供良好动物模型基础。