中国内江猪的氟烷基因型

为了给医学实验用猪的选育工作提供相关资料,作者采用聚合酶链反应结合限制性内切酶（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术对２５头中国内江猪的氟烷基因型进行了检测,结果２５头内江猪氟烷基因型均为阴性纯合子。从而提示中国内江猪有可能成为医学实验动物及猪→人异种移植的选育猪种之一;ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法是鉴别猪氟烷基因型的可靠又简便的方法。     

问号赖型钩端螺旋体23 kDa蛋白的免疫原性研究

钩端螺旋体病（简称钩体病）是分布最广的一种人兽共患病，已有７７个国家和地区有钩体病的流行，给人类和畜牧业造成了严重危害。为了控制钩体病流行，目前多采用全菌死疫苗。但是，全菌死疫苗免疫持久性不强，而且需多次注射，因而有严重的局限性。因此，寻找由钩体基因编码的保护性抗原，使之持久地抵抗侵入机体的钩体，已成为钩体病研究的课题。我们前文已报道问号赖型钩端螺旋体重组质粒ｐＤＬ１２１可表达被全钩抗血清识别的２３ｋＤａ蛋白（刘洪斌等，以Ｌａｍｂｄａｇｔ１１作载体构建赖型钩体基因文库及其重组质粒ｐＤＬ１２１的克…     

转化生长因子-β1在人横纹肌肉瘤肌源性分化中的作用

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在横纹肌肉瘤肌源性分化中的作用。方法:采用细胞培养、逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)及免疫荧光染色观察TGF-β1对横纹肌肉瘤细胞系RD肌源性分化相关指标的影响,并用免疫组化SP法,检测49例横纹肌肉瘤组织中TGF-β1表达与肌球蛋白重链(MyHC)之间的相关性。结果:TGF-β1可明显抑制RD细胞肌球蛋白重链mRNA和蛋白的表达。用TGF-β1处理RD细胞后,肌球蛋白重链和肌节肌动蛋白(Sarcomeric-Actin)阳性着色细胞数明显下降(P<0.05)。MyoD1的表达在处理前后未见明显差异。横纹肌肉瘤组织中TGF-β1表达与肌球蛋白重链呈明显负相关(P<0.05)。结论:TGF-β1可抑制RD细胞的肌源性分化,这一作用可能不依赖于MyoD1的调节。TGF-β1信号传导通路可能与横纹肌肉瘤的肌源性分化受阻有关。     

大肠杆菌表达的人源性抗CTLA4单链抗体三种复性方法比较

比较表达于大肠杆菌中的人源性抗细胞毒性T淋巴细胞抗原4单链抗体(A n ti-CTLA 4 scFv)的三种体外复性方法的复性效率。稀释、透析和亲和柱上三种复性方式复性A n ti-CTLA 4 scFv,采用B rad ford法分析蛋白复性得率,采用间接细胞EL ISA法检测所得蛋白的活性。透析复性蛋白得率最高,稀释复性蛋白得率其次,亲和柱上复性蛋白得率最低;透析复性所得蛋白结合活性是稀释复性的1.95倍,是亲和柱上复性所得蛋白活性的4.13倍(无谷胱甘肽氧化还原对G SH/G SSH)及3.63倍(有G SH/G SSH)。结论:采用含0.15 m o l/L N aC、l1 mm o l/L G SSH和3 mm o l/L G SH的50 mm o l/L T ris-HC l(pH 8.0)缓冲液作为A n ti-CTLA 4 scFv的复性液,4℃下透析复性48 h,可获得较高复性得率和结合活性。     

用单层培养法诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究

骨髓间充质干细胞(MSCs)因其具有多向分化潜能，易于分离，且体外扩增能力强，便于自体移植的特点，近年来被认为是最有希望的种子细胞来源。2000年以来，我们在体外培养条件下采用单层培养方式分阶段研究MSCs这一分化机制，研究骨髓间充质干细胞向成软骨诱导的条件、分化模型及其相互关系，从而为气管、甲状软骨等组织工程重建提供种子细胞的可能性。     

成年兔关节软骨创伤模型中软骨细胞的分离及体外培养观察

目的观察成年兔关节软骨损伤模型中能获得的关节软骨和软骨细胞数量,探讨不同浓度的Ⅱ型胶原酶在不同时间段分离软骨细胞的能力及体外培养所获得的软骨细胞的生物学活性。方法建立成年兔关节软骨损伤模型,用0.1%~0.2%Ⅱ型胶原酶消化4小时,每小时收集消化下来的兔膝关节软骨细胞,计数细胞收获率和细胞存活率。体外培养原代及传代细胞,观察细胞形态和生长规律,绘制生长曲线,检测细胞合成Ⅰ、Ⅱ型胶原、蛋白多糖能力。结果成年兔膝关节软骨细胞的收获率平均为3603.6×104个/克,细胞存活率平均为97.3%,胶原酶浓度与细胞的获取率无显著关系,但与细胞的存活率相关,在消化时间超过3h后细胞的存活率显著降低,在培养过程中出现易老化现象,原代细胞贴壁时间为48~72h,甲苯胺蓝异染反应较强,Ⅱ型胶原免疫组化染色反应呈强阳性,Ⅰ型胶原免疫组化染色为阴性,传3代细胞形态由卵圆形、多角形变为梭形,甲苯胺蓝染色异染反应较弱,免疫组化Ⅰ型胶原为强阳性而Ⅱ型胶原表达极弱。结论0.1~0.2%Ⅱ型胶原酶消化、分批收取细胞具有较高的细胞收获率和存活率,体外培养时,从创伤后关节软骨中获得的原代细胞和1代细胞具有良好的软骨表型,第3代及以后的细胞生物学活性低下。     

人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用表达上调基因的鉴定

目的 探讨人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用后基因表达的变化。方法 人外周血单个核细胞（PBMC）与猪内皮细胞系PIEC共培养18h，对照组为未共培养的PBMC和PIEC。合成两组细胞的cDNA进行抑制消减杂交（SSH）。共培养中上调的cDNA用pGEM-T Easy载体进行T／A克隆，然后测序。用BLAST程序进行同源性分析。结果 经过SSH和克隆，获得一包含300克隆的消减文库。从文库中随机挑取24个克隆进行测序，并在GenBank中进行同源性比较，其中4个为已知的人的基因片段，8个为猪的表达序列标记（EST），9个片段与人的基因有高度的同源性。3个片段未检索到相匹配的同源性序列。结论 人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用的后有许多基因的表达上调。     

开放式管理是慢性精神分裂症患者康复活动的方向

目的：探讨我院对慢性精神分裂症患者实施开放式管理的经验，以促进更多慢性精神分裂症患者得到全面康复，尽快回归社会。方法：抽取178例（开放组81例，封闭组97例）符合CCMD-3精神分裂症诊断标准，符合入组标准的慢性精冲分裂症患者，用简明精神病量表（BPRS）和大体功能评定量表（GAF）以及抗精神病药物用量进行对照评定分析。结果：开放组BPRS分数及抗精神病药物用量低于封闭组（P〈0．05），而开放组的GAF分数高于封闭组（P〈0．05）。结论：开放组患者抗精神病药物服用量少于封闭组，但康复效果优于封闭组。     

豚鼠钩体病PDH模型血浆血栓素和前列腺环素测定的初步研究

豚鼠钩体病肺弥漫性出血(PDH)模型作为实验组,用体重相近的健康豚鼠作为对照组。实验组动物于感染钩体菌后38小时在局麻下作颈总动脉向心端插管采集血标本,用放免法测定血浆血栓素A_2(TXA_2)稳定代谢物TXB_2和前列腺环素(PGI_2)的稳定代谢物6—酮—PGF_1a的值。采血后砍     

血管内皮生长因子基因转染促进成骨细胞增殖及其功能的实验研究

目的探讨外源性血管内皮生长因子（VEGF）基因表达在成骨细胞增殖、分化中的作用。方法利用阳离子脂质体Lipofectamine将pBLAST49-mVEGF基因导人体外培养的成骨细胞,观察外源性VEGF在成骨细胞内的表达,及其对成骨细胞生长曲线、细胞周期和成骨细胞分泌骨钙素和Ⅰ型胶原的影响。结果同步培养后第1、2d,pBLAST49-mVEGF基因转染组细胞数大于对照组,二者间差异无统计学意义（P〉0．05）;从第3d开始,二者间差异具有统计学意义（P〈0．05）。pBLAST49-mVEGF基因转染组第1～5代细胞（G2／M＋S）％明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈O．05）。pBLAST49-mVEGF基因转染组第1～5代细胞合成分泌骨钙素浓度和Ⅰ型胶原的表达均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论pBLAST49-mVEGF基因转染能促进成骨细胞的增殖和成骨活性。