脂质体包裹神经生长因子不同条件储存时的生物学稳定性比较(英文)

背景:神经生长因子在体外、体内稳定性差,容易导致其失去生物活性。目的:观察注射用脂质体包裹的神经生长因子在不同条件下储存的稳定性。设计:以脂质体包裹的神经生长因子为观察对象的对照实验。单位:南京医科大学第一附属医院外科。材料:实验于2002-07/2004-03在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成。将纯化得到的小鼠颌下腺的神经生长因子用脂质体包裹后分别制成冻干剂型,按照以下4组条件分组:①4℃放置。②室温放置。③40℃放置。④40℃+饱和湿度放置。方法:①采用无血清鸡胚背根神经节法测定体外神经生长因子活性。取8日龄鸡胚背根神经节接种于涂有多聚赖氨酸的24孔培养板上,分别加入含有不同浓度的待测样品的Dulbecco's的改良的Eagle's培养基,阴性对照加入相同体积的Dulbecco's的改良的Eagle's培养基,阳性对照加入含有不同浓度神经生长因子的Dulbecco's的改良的Eagle's培养基,在37℃,50mL/L二氧化碳,饱和湿度的培养箱中培养24h,在倒置显微镜下观察神经纤维的生长情况。②模拟体内环境下测定神经生长因子生物稳定性:分别取神经生长因子冻干脂质体和神经生长因子阳性对照品加入0.5mL小鼠血浆,将上述血浆样品和空白血浆于0.5,1,2,3,4,6h加入Dulbecco's的改良的Eagle's培养基2.5mL混合均匀。生物学活性判断标准:根据背根神经节神经纤维的生长长度和密度将其分为4种情况:①无突起生长为“-”为阴性对照。②少量突起生长“+”。③突起较长较密据其程度判为“”或“”。④突起生长最长最密为“”。统计学分析由南京医科大学统计学教研室采用系统分组(嵌套)设计资料行方差分析。主要结局观察:采用无血清鸡胚背根神经节法测定:①10,30,60,90d体外神经生长因子的活性。②0,0.5,1,2,3,4,6h体内神经生长因子的活性。结果:①神经生长因子脂质体冻干粉针体外生物稳定性的长期实验结果:在4℃、室温条件下放置10～90d生物活性稳定();在40℃条件下放置10～60d生物活性稳定(),放置90d生物活性轻微下降();在40℃+饱和湿度条件下放置10d生物活性稳定(),放置30～60d生物活性轻微下降(),放置90d生物活性降低(+)。②模拟体内环境下神经生长因子脂质体冻干粉针生物稳定性的实验结果:在0,0.5,1,2,3h生物活性稳定(或),在4,6h生物活性轻微下降()。结论:脂质体包裹的神经生长因子是稳定的,较高的温度和湿度不利于储存。神经生长因子冻干脂质体在不同贮存条件下的生物学稳定性均优于神经生长因子脂质体混悬液。     

肺栓塞

1病历摘要 患者女性,75岁,因胸闷、心悸3d入院。患者3d前晨起下床行走时突然出现胸闷、心悸并伴有全身大汗,休息后稍缓解,入院当天上午无诱因出现一过性意识丧失,持续约3min,醒后感乏力,遂入我院进一步诊治。     

肠出血性大肠杆菌O157∶H7和霍乱弧菌的多重PCR检测

目的　建立同时检测肠出血性大肠杆菌 (O15 7∶H7)和霍乱弧菌的多重PCR方法 ,为霍乱和肠出血性大肠杆菌感染的快速诊断提供实验依据。方法　首先选择O15 7∶H7的O抗原(rfbE)、H鞭毛抗原 (fliC)基因以及霍乱弧菌外膜蛋白 (ompW )和肠毒素A亚单位 (ctxA)基因特异的 4对引物 ,分别或共同对O15 7∶H7和霍乱弧菌进行PCR扩增 ,并以琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果　所有O15 7∶H7菌株均在 4 97bp和 6 2 5bp处出现O15 7rfbE基因和H7fliC基因扩增产物 ;霍乱菌株均出现 5 6 0bp、30 2bp的ompW和ctxA基因扩增产物 ,O15 7∶H7和霍乱弧菌共同扩增可出现 4条单一条带。结论　选择 4对特异引物的多重PCR方法可简便、特异、快速、灵敏地对O15 7∶H7和霍乱弧菌进行同时检测。     

甲型肝炎病毒在体外培养对人单核巨噬祖细胞增殖的实验研究

甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）最易引起流行，探讨ＨＡＶ和单核巨噬细胞的关系，病毒在体内扩散过程及单核巨噬细胞在发病机制中的作用是很必要的。我们的研究表明ＨＡＶ可侵入患者外周血白细胞并在其中繁殖,单常,单核巨噬细胞培养,并进行了体了体外病毒传代的研究。结核巨噬细胞的培养，并进行了体外病毒传代的研究。结果如下：１．二株ＨＡＶ感染的细胞，于第１０天均查到ＩＦ阳性细胞，培养到１８天将贴壁细胞冻融离心取上清，重新感染单核巨噬细胞，均出现甲肝抗原阳性荧光。用抗ＨＡＶ阳性兔血清可以阻断上述荧光反应。第三代单核巨噬祖细胞…     

抗Ⅱ型单纯疱疹病毒表面抗原gD单克隆抗体的制备及鉴定

制备抗Ⅱ型单纯疱疹病毒(Simplex Herpes VirusⅡ,HSV-2)表面抗原gD的单克隆抗体(mAb)并对其性质进行鉴定。以基因工程重组制备纯化的HSV2-gD为抗原免疫BALB/c小鼠,采用常规融合制备杂交瘤细胞,通过HAT选择培养、有限稀释法获得单克隆细胞株,用间接ELISA法、Western blot方法筛选和鉴定阳性杂交瘤细胞株。获得了4株可稳定分泌抗HSV2-gD抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A11C6、1A11F10、4C9D5以及4C9E9,抗体的类型均为IgG1,轻链均为κ型,Western blot结果显示各单抗都可以特异性识别HSV2-gD。用杂交瘤细胞注射小鼠制备腹水,腹水内的抗体效价均大于1×10-5,腹水内的抗体经硫酸铵-辛酸分级沉淀和阴离子交换柱纯化,成功制备了纯度超过95%的高特异性抗体,抗体有较好的特异性。为进一步研究HSV2感染和临床上的预防、诊断及治疗提供了有力的工具。     

左束支分支阻滞及双束支阻滞50例心电图分析

近几年我院对左束支分支阻滞及双束支阻滞心电图进行了一些观察。现将所收集的50例分析讨论如下: 诊断标准一、左前支阻滞:①额面平均心电轴显著左偏-30°～—90°,一般为-45°～—60°。②QRS_(Ⅰ、aVL)呈qR或R型,QRS_(Ⅱ、Ⅲ、aVF呈rs型,R_(aVL>R_(Ⅰ、(?)VR)。③QRS时间正常或稍延长,一般不超过0.11     

日常化妆指导

人们在洗脸后常搽一些雪花膏之类的护肤类化妆品,以使皮肤滋润、柔嫩。由于皮肤的性质不同,因此在选用化妆品上也要有     

肝素钙雾化吸入治疗喘憋性肺炎疗效观察

自1993年以来,我们用肝素钙雾化吸入治疗喘憋性肺炎,认为止喘效果满意。 1.一般资料:100例喘憋性肺炎住院患者按住院号偶奇数分为治疗组和对照组,两级的性别、年龄、病情具有可比性。 2.治疗方法:两组均采取抗生素、吸氧、镇静、止咳等综合治疗,有心衰者用洋地黄制剂。治疗组加用肝素钙3500U加生理盐水20ml雾化吸入,每日1次,每次20分钟。对照组则用生理盐水50ml、氨茶硷250mg、先峰霉素0.5g雾化吸入,每日1次,每次20分钟。用至喘憋、紫绀、三凹征、烦躁及肺部哮鸣音消失停药。     

松果体胶质细胞瘤放疗后低血流量及新陈代谢性血管病

脑肿瘤放射性治疗的副反应分急性和迟发性,作者报道1例在放疗前后血液动力学与新陈代谢出现变化。女性10岁,头颅CT于松果体区发现一直径2cm×2.5cm的环形强化肿块,伴第三脑室及侧脑室积水。结合脑血管造影及PET检查,拟诊为松果体神经胶质细胞瘤、生殖细胞瘤或非生殖细胞瘤性芽胞细胞瘤而行手术前放疗。照射总剂量为60Gy,分32次,每天1.8～2.0Gy,每周5天,共7周。放疗后肿瘤变化不明显,但局部血流量、氧释放分数、氧代谢率、糖的动力代谢率及比例常数(K_2、K_3)与放疗